STAT3信号转导系统介导了CNTF对大鼠尾壳核出血后的神经保护作用

目的研究睫状神经生长因子(CNTF)在中枢神经元抗损伤中的作用及机制。方法对尾壳核出血大鼠进行CNTF治疗,观察海马信号转导和转录激活蛋白-3(STAT3)含量及阳性神经元分布的变化。结果CNTF能显增加尾壳核出血大鼠海马STAT3阳性神经元数量、海马STAT3含量。结论CNTF能通过促进STAT3的表达增强中枢神经元的抗损伤能力。     

肿块型乳腺癌的超声造影特征及定量参数与sE-cad、sTNFR-P55的相关性及其诊断价值分析

摘要 目的：探讨肿块型乳腺癌的超声造影（CEUS）特征及定量参数与可溶性E-钙黏蛋白（sE-cad）、可溶性肿瘤坏死因子受体P55（sTNFR-P55）相关性研究,并探讨其对肿块型乳腺癌的诊断价值。方法：选取2019年1月至2021年1月于本院诊治并行CEUS检查的162例乳腺肿块患者,根据病理结果分为肿块型乳腺癌组（82例）和良性组（80例）,另选取本院体检健康的80例女性作为对照组。三组均行血清sE-cad、sTNFR-P55水平检测。比较肿块型乳腺癌组与良性组CEUS特征及定量参数的差异,采用Pearson相关分析肿块型乳腺癌患者CEUS定量参数与血清sE-cad、sTNFR-P55水平的相关性。对CEUS、血清sE-cad、sTNFR-P55水平单独或三者联合诊断的方式采用敏感度、特异度、准确性、阳性预测值、阴性预测值指标表达。结果：肿块型乳腺癌组大部分表现为增强后形态不规则、高增强、向心性灌注、造影剂分布不均匀以及呈慢出型的强化方式,且所占比例显著高于良性组（P<0.05）。与良性组相比,肿块型乳腺癌组CEUS定量参数TTP、G显著降低（P<0.05）,而PI、K显著升高（P<0.05）。肿块型乳腺癌组血清sE-cad、sTNFR-P55水平显著高于良性组、对照组（P<0.05）,且良性组血清sE-cad、sTNFR-P55水平还显著高于对照组（P<0.05）。肿块型乳腺癌患者的CEUS定量参数TTP、G与血清sE-cad、sTNFR-P55水平呈负相关（P<0.05）;而PI、k与血清sE-cad、sTNFR-P55水平呈正相关（P<0.05）。CEUS联合血清sE-cad、sTNFR-P55水平诊断肿块型乳腺癌的准确度、敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值最高。结论：CEUS特征及定量参数对肿块型乳腺癌具有一定的鉴别诊断价值,而且CEUS定量参数与血清sE-cad、sTNFR-P55水平具有一定的相关性,说明CEUS定量参数可在一定程度上可反映乳腺癌的恶性生物学行为;同时CEUS联合血清sE-cad、sTNFR-P55水平检测有助于提高对肿块型乳腺癌的鉴别诊断价值,进一步为临床医生的定性判断提供更加科学的影像学依据。     

二斑叶螨生物学研究

作者于1994—1995年对生活在花生和苹果叶上的二斑叶螨的生物学进行了研究。研究结果表明,以花生叶片为食科,该螨在25℃、30℃恒温条件和26．5℃-29．1℃变温条件下,其发育历期分别为11．04天,7．96天和8．64天。雌成螨在25℃、30℃恒温条件和23．8℃-30℃变温条件下,寿命分别是13．14天、10．5天和12．43天;产卵量分别是37．75粒、60,42粒和54．62粒。以苹果叶为食科,该螨在25℃、28℃和30℃恒温条件下,其发育历期分别是11．48天、9．56天和8．63天;雌成螨在25℃、30℃恒温条件和24.4℃-28．1℃变温条件下,其寿命分别为16．75天、14．78天和11.56天;产卵量分别是20粒、31.08粒和33．21粒。在花生上,该螨卵发育的起始温度是6．44℃,有效积温是69．79日度;虫期发育的起始温度是14．65℃．有效积温是74.98日度。在苹果上,卵发育的起始温度是4．61℃,有效积温是82,67日度,虫期发育的起始温度是12．41℃,有效积温是93．99日度。     

不同保藏处理的昆虫标本DNA提取及其随机扩增多态DNA反应

实验利用CTAB法对柳二十斑叶甲Chrysomela vigintipunctata (Scopoli)、异色瓢虫Harmonia axyridis Pollas、七星瓢虫Coccinella septempunctata Linnaeus、小地老虎Agrotis ypsilon (Rottemberg)、红蜻Crocothemis servilia Drury、无齿稻蝗Oxya abentata Willemse和中华稻蝗Oxya chinensis (Thunberg)等7种昆虫进行了基因组DNA提取。从自然干燥标本、烘干标本及酒精浸泡标本获得的DNA均可用于RAPD-PCR反应,且烘干标本、酒精浸泡标本提取效果优于自然干燥标本。这种提取方法简便易行,容易掌握,且耗资小于其它分子生物学方法。     

过表达或沉默棉花GhPCBER基因株系的获得及其茎叶木质素和木脂素含量研究

编码苯基香豆满苄基醚还原酶(phenylcoumaran benzylic ether reductase,PCBER)的基因PCBER属于PIP亚家族,是苯丙烷代谢途径中参与木脂素合成的关键基因。该研究构建了棉花GhPCBER基因的植物过表达载体并转化拟南芥,同时构建了VIGS(virus induced gene silencing,病毒诱导的基因沉默)载体转化棉花,采用实时荧光定量PCR技术对GhPCBER基因在不同组织中的表达进行分析;对野生型和转基因植株茎叶组织中的木质素和木脂素含量进行测定分析。结果表明:(1)成功构建了GhPCBER植物过表达载体pGWB17-GhPCBRE以及基因沉默重组载体pTRV2-GhPCBER;经遗传转化获得6株转棉花GhPCBER基因抗性拟南芥植株,同时获得15株GhPCBER基因沉默棉花植株(5株为一组)。(2)PCR检测表明,6株转基因拟南芥均为过表达株系,其中株系1、2、3相对表达量更高,且在茎、叶组织中的表达量分别较野生型提高了7～14倍和6～16倍,表明GhPCBER基因成功在拟南芥中过表达;GhPCBER基因沉默棉花植株的茎、叶组织中的表达量分别比野生型棉株约下降12%和26%,表明烟草脆裂病毒(TRV)体系(pTRV2-GhPCBER)成功抑制了GhPCBER基因的表达。(3)转GhPCBER基因拟南芥茎、叶中木质素和木脂素含量较野生型均显著降低;GhPCBER基因沉默棉花植株茎、叶中木质素和木脂素含量较野生型均极显著降低;组织化学染色观察发现GhPCBER基因沉默棉花植株茎秆颜色明显比野生型染色浅,也证明沉默基因棉花植株茎秆中的木质素含量减少。(4)苯丙烷代谢通路中8个相关基因的实时荧光定量PCR分析发现,过表达或抑制GhPCBRE基因均会导致苯丙烷代谢途径发生重新定向。     

西藏卡拉山土样中放线菌的多相分类研究

从西藏念青唐古拉山卡拉山支脉的土样中分离到40株放线菌,对其中的13株菌进行了多相分类。形态、培养特征和系统发育结果表明,所有菌株均属于链霉菌属。从系统发育结果看,840018、850003和Z851023各处于一个独立的分支,分别与Streptomyces rishiriensis、Streptomyces cyanoalbus和Streptomyces albus subsp.albus的相似性达到99%。菌株Z851010、Z851004、850011和850070聚成一个小群,它们之间的相似性达到95%,与Streptomyces sp.YIM26的相似性达到98%;Z851013和Z851024聚成小群,它们之间的相似性达到100%,它们有可能是同一种菌株;850008和Z851020聚成小群,它们的相似性达到95%;Z850007和850040聚成小群,与已知菌种的相似性只有96%,有可能是新的分类单元。     

不同保藏处理的昆虫标本DNA提取及其随机扩增多态DNA反应

实验利用CTAB法对柳二十斑叶甲Chrysomelavigintipunctata (Scopoli)、异色瓢虫HarmoniaaxyridisPollas、七星瓢虫Coc cinellaseptempunctataLinnaeus、小地老虎Agrotisypsilon (Rottemberg)、红蜻CrocothemisserviliaDrury、无齿稻蝗OxyaabentataWil lemse和中华稻蝗Oxyachinensis (Thunberg)等 7种昆虫进行了基因组DNA提取。从自然干燥标本、烘干标本及酒精浸泡标本获得的DNA均可用于RAPD PCR反应 ,且烘干标本、酒精浸泡标本提取效果优于自然干燥标本。这种提取方法简便易行 ,容易掌握 ,且耗资小于其它分子生物学方法。     

家蝇3种丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin基因克隆、序列分析及表达模式

对家蝇3种丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin基因SP2、SP13和SP16进行克隆、序列分析和时空表达模式检测。运用瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统（ExPASy）和美国国家生物技术信息中心（NCBI）等有关的生物信息学分析工具,预测和分析3条Serpin基因编码蛋白质的结构与生物学功能。以RPS18（核糖体S18蛋白）为内参基因,采用实时荧光定量PCR（Real-Time PCR）技术检测3条 Serpin 基因在家蝇不同发育时期,以及家蝇3龄幼虫中脂肪体、唾液腺、中肠、马氏管和体壁的表达特征。SP2、SP13、SP16基因序列的开放阅读框ORF全长分别为1191 bp、1137 bp和1212 bp,分别编码含396、378和403个氨基酸残基的蛋白质,其理论分子量分别为45315.3 Da、43701.5 Da和45011.5 Da,等电点分别为9.01、5.98和6.04,蛋白质的N端都含有一段信号肽,并具有Serpin基因的保守结构域,属于Serpin家族。SP2和SP16在蛋白质的C端含反应中心环（Reactive center loop,RCL),而SP13 C端不含RCL。时空表达模式分析结果显示,SP2基因在2龄幼虫中的表达量最高,而雄蝇的表达量与卵期相比有所下调;SP13基因在蛹中的表达量最高,1龄幼虫和雌蝇中的表达量与卵期相近;SP16基因在2龄幼虫和3龄幼虫中的表达量最高,雄蝇与雌蝇的表达量与卵期相比有所下调。在家蝇3龄幼虫的各主要组织中,以体壁为参照,SP2基因在唾液腺表达水平最高,其次是脂肪体,中肠和马氏管均低于体壁;SP13基因在马氏管和脂肪体中的表达水平最高,中肠和唾液腺的表达量低于体壁;SP16基因在唾液腺、中肠、脂肪体和马氏管的表达量均低于体壁。推测Serpin基因在家蝇个体发育和免疫调节中起不同作用。     

幽门螺杆菌热休克蛋白A基因的克隆、表达及免疫原性研究

幽门螺杆菌的感染可诱发人体产生胃炎和消化性溃疡,其组成成分热休克蛋白Ａ（ＨｓｐＡ）可刺激机体产生保护性的免疫反应。用ＰＣＲ方法从幽门螺杆菌的染色体ＤＮＡ上扩增出ＨｓｐＡ基因片段,将其插入原核表达载体ｐＥＴ２２ｂ（＋）中,并在ＢＬ２１（ＤＥ３）大肠杆菌表达。经测序ＨｓｐＡ基因片段有３５４ｂｐ组成,可编码１１８个氨基酸残基的多肽。ＳＤＳＰＡＧＥ和免疫印迹分析检测发现,ＨｓｐＡ基因表达的蛋白质分子量约为１５ｋＤ,并证实该重组蛋白质可以被幽门螺杆菌感染阳性患者的血清所识别,同时将其免疫小鼠可刺激机体产生抗该重组蛋白质的抗体。ＨｓｐＡ有可能作为一种有效的蛋白质疫苗用于幽门螺杆菌感染的预防和治疗。