微生物甲醛脱氢酶的研究进展

甲醛脱氢酶(FADH)属于中等锌链醇脱氢酶家族中的一员,存在于绝大多数原核生物以及所有的真核生物中,是微生物中主要用于甲醛解毒的酶。近年来一些研究确定甲醛脱氢酶还具有S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)的活性,用于调节内源性NO的动态平衡。对微生物甲醛脱氢酶的结构,生理生化特性,基因克隆以及在环保上的应用方面进行综述。     

控释肥施用对土壤N2O排放的影响——以华北平原冬小麦/夏玉米轮作系统为例

控释肥作为一种能够提高肥料利用率、保障作物产量和节约劳动力的新型肥料已经在作物生产中得到广泛应用,而控释肥对土壤N_2O排放影响结果的差异使其成为当前科学评估控释肥施用环境效应的焦点问题之一。因此,旨在探讨不同种类控释肥及氮素水平施用对华北平原冬小麦/夏玉米轮作系统土壤N_2O排放的影响,为科学评价控释肥施用的环境效应及其推广应用提供科学依据。本研究监测采用静态暗箱—气相色谱法对不同控释肥施用下土壤N_2O排放、环境因素以及产量进行了周年监测,探讨了不同处理(对照处理(CK)、控释肥处理1(CRF1)、优化控释肥处理1(80%CRF1)、优化控释肥处理2(80%CRF2)和控释肥处理3(CRF3+尿素))下土壤N_2O排放特征及土壤温湿度对其的影响。结果表明:控释肥施用下冬小麦/夏玉米轮作系统中土壤N_2O排放峰高值主要出现在基肥施用并伴随灌溉(或降雨)后,一般持续时间约为7—10 d,小麦返青期灌溉以及玉米后期降雨会引起微弱的N_2O排放峰。不同处理土壤N_2O排放通量变化范围为~(-2)35.61—2625.01μg N_2O m~(-2)h~(-1),平均排放通量为23.88—51.39μg N_2O m~(-2)h~(-1),与CRFI相比,80%CRF1和80%CRF2处理能够减小施肥期的N_2O排放峰值,但不改变轮作周期土壤N_2O排放季节变化规律。CK处理和CRF3+尿素处理土壤N_2O排放通量与5 cm深度土壤温度之间表现出显著的正相关性(r~2=0.38,P0.01;r~2=0.30,P0.05);CRF1处理和80%CRF1处理在冬小麦生长季及整个轮作周期内与土壤孔隙含水率(WFPS)表现为显著的正相关关系(冬小麦生长季分别为r~2=0.50,P0.01;r~2=0.39,P0.05;整个轮作周期分别为r~2=0.39,P0.05;r~2=0.43,P0.05)。80%CRF2处理N_2O年排放总量最高,为(2.89±0.24)kg N/hm~2。相同控释肥种类条件下,80%CRF1处理比CRF1处理减少了14.23%,但并未达到显著水平;相同施氮量水平下,CRF1处理与(CRF3+尿素)处理之间N_2O年排放总量差异不显著,而80%CRF1处理比80%CRF2处理N_2O年排放总量减少16.16%,并达到显著水平(P0.05)。本研究不同处理之间N_2O直接排放系数在0.29%—0.42%之间,均明显低于IPCC 1.0%的默认值。各控释肥处理产量与当地农民常规施肥量条件下产量没有显著性差异。因此在华北地区冬小麦/夏玉米轮作系统中应用控释肥技术可以在保证产量的前提下有效减少土壤N_2O排放,并且仍存在一定的减排空间。     

京杭运河杭州段城市景观格局对河网水环境的影响

近年来人类活动显著改变了陆地生态环境,城市化作为人类活动的重要组成部分,对陆地生态环境中的水环境也产生了深刻的影响。以杭州市作为研究区,以京杭运河杭州段为研究对象,在对水质监测点建立不同半径缓冲区的基础上,分析了城市景观格局对河网水环境的影响。结果表明：（1）京杭运河杭州段城市景观和农村景观镶嵌分布,河网水系发达,景观破碎化程度高,斑块形状复杂多变,城乡交错带特征典型,人类活动强度高低分化明显;（2）各种景观类型沿河分布的空间特征明显,景观格局指数随缓冲半径的增大而变化,当缓冲半径达到1000m以后格局指数维持相对稳定状态;（3）京杭运河杭州段水系的氮源污染物含量整体处于较高水平,总磷含量处于低水平。水质受到建设用地和农业用地的影响较高;（4）不同的景观格局指数对不同的水质指标在不同的时期具有一定的解释能力,且同一景观指数在汛期和非汛期对水环境的影响作用差异较大甚至相反,景观格局在河网密集型城市区域对河流水环境影响的整体利弊还需进一步权衡量化。     

新生儿坏死性小肠结肠炎病原菌分布、耐药性及发病的影响因素分析

摘要 目的：观察新生儿坏死性小肠结肠炎（NEC）病原菌分布、耐药性,并分析NEC患儿发病的影响因素。方法：选取2016年8月~2020年9月期间在我院接受治疗的NEC患儿50例（NEC组）,另选取同期于我院出生的100例健康新生儿作为对照组。观察NEC患儿病原菌分布、耐药性,并分析NEC发病的影响因素。结果：50例NEC患儿共培养出病原菌63株。病原菌中革兰阴性菌38株,占比60.32%;革兰阳性菌23株,占比36.51%;真菌2株,占比3.17%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌均对氧氟沙星、头孢哌酮、头孢他啶、头孢唑林、阿莫西林、氨苄青霉素、环丙沙星、头孢曲松的敏感性较低,对亚胺培南/西司他丁、哌拉西林/他唑巴坦、美罗培南、多粘菌素高度敏感。单因素分析结果显示,NEC发病与新生儿体重、母乳喂养、产前使用糖皮质激素、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、新生儿Apgar评分、是否合并肺部感染、合并败血症有关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析发现：母乳喂养是NEC发病的保护因素,合并败血症、妊娠期糖尿病、新生儿体重、合并肺部感染、新生儿Apgar评分均是NEC发病的危险因素（P＜0.05）。结论：NEC患儿的病原菌以革兰阴性菌为主,同时影响NEC发病的因素较多,应结合相关的影响因素制定针对性干预或治疗措施,以减少NEC的发病风险。     

围产期母鼠染毒双酚A对雄性子代脑内谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸受体发育的影响

为了探讨围生期双酚A (bisphenol A,BPA) 暴露对雄性子代大鼠海马和前皮层谷氨酸N- 甲基-D- 天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate Receptor, NMDAR) 表达的影响,作者通过对妊娠第7 天至仔鼠出生后21 天的母鼠灌胃染毒BPA (200, 50, 5, 0.5 mg/(kg·d)),用Western-blot法分别检测出生后4、7、14、21、56 天的雄性仔鼠海马和前皮层NMDA 受体NR1、NR2A、2B 亚基的表达。结果显示,在海马区,较低剂量(0.5～50 mg/(kg·d))BPA 剂量依赖性地下调NMDA 受体各亚基表达,而高剂量(200 mg/(kg·d)) BPA 最显著下调NR1 表达,却对
NR2A、2B的影响最小;但所有BPA剂量组的NMDA受体亚基表达均显著低于对照组。在前皮层,NMDAR 亚基表达对BPA 的敏感性相对较低,只有较高剂量(50～200 mg/(kg·d)) BPA 可明显下调NR2A、2B 亚基表达。此外,BPA 明显改变NMDAR 的亚基组成,NR2A/NR1 和NR2B/NR1 比值在海马区被200 mg/(kg·d) BPA 上调,在前皮层却被0.5 mg/(kg·d) BPA 上调;其它剂量BPA 均下调两脑区的该比值。以上结果提示,母体围生期双酚A 暴露下调NMDA 受体表达和亚基组成,这可能是BPA 影响雄性子代脑发育的机制之一。     

乙型肝炎病毒X蛋白定量试验与临床研究

HBV X蛋白 （HBx）是由乙型肝炎病毒（HBV）基因组编码的调控蛋白,与由乙肝引起的肝癌发生具有密切的关系。血清HBx对乙型肝炎、肝癌的诊断及发病机理研究有较高的临床应用价值。在表达并纯化HBx、制备出HBx单克隆抗体与酶标抗体的基础上,研制了HBx定量检测试剂盒（增强化学发光法）,对其灵敏度、特异性等指标进行分析,并将该试剂盒应用于临床研究。结果表明,原核表达并纯化的HBx纯度≥94%;试剂盒灵敏度达0.1ng/ml;线性范围达到0.5ng/ml -600ng/ml;特异性高,与球蛋白、脂蛋白、血红蛋白、酸性糖蛋白、HBc、HBe、HBs、HBV preS2不发生交叉反应;批间CV≤6.5%;临床标本检验慢性乙型肝炎阳性率为55%、肝硬化阳性率为68%、肝癌阳性率70%,表明此试剂盒可应用于乙肝、肝硬化、肝癌的临床诊断及发病机理研究。     

止颤汤联合重复经颅磁刺激治疗帕金森病合并睡眠障碍、抑郁的临床疗效观察

摘要 目的：评价止颤汤联合重复经颅磁刺激（rTMS）治疗帕金森（PD）合并睡眠障碍、抑郁的临床疗效。方法：选入我院2022年9月~2023年1月收治的PD合并睡眠障碍、抑郁患者80例，随机分为对照组和观察组，各40例。对照组予以常规西药+rTMS治疗，观察组在对照组基础上加服中药止颤汤。评价两组的临床疗效、睡眠及抑郁状况等，并进行统计比较。结果：两组治疗后中医证候积分较治疗前下降（P＜0.05），而观察组下降幅度显著高于对照组（P＜0.05）；两组总有效率无明显差异（P＞0.05），但观察组愈显率较对照组高（P＜0.05）；与治疗前比较，两组治疗后UPDRS-Ⅰ、UPDRS-Ⅱ、UPDRS-Ⅲ，NMSE和HAMD量表得分明显下降，PDSS得分明显上升（P＜0.05），而观察组下降幅度更大（P＜0.05）；两组不良反应发生率无差异（P＞0.05）。结论：止颤汤联合rTMS治疗PD合并睡眠障碍、抑郁疗效肯定，可有效改善患者的临床症状，提高睡眠质量，缓解抑郁状态，且安全性良好。     

人IgG四亚类对噬菌体展示Ig结合蛋白单结构域随机组合文库的体外进化筛选

金黄色葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal protein A,SpA)和链球菌蛋白G(Streptococcal protein G,SpG)是细菌产生的特异结合宿主抗体的细菌免疫球蛋白结合蛋白(Immunoglobulin(Ig)-binding proteins,IBPs)的代表分子。SpA和SpG均包含由多个序列高度同源的结合结构域重复组成的抗体结合区,各单结构域都具有完全的结合IgG的功能。为研究这些单结构域随机组合能否产生具有新结合特性的组合分子,将SpA的A、B、C、D、E以及SpG的B2、B3共7个单结合结构域随机组合构建成噬菌体展示文库后,应用人IgG1、2、3、4为诱饵分子对该文库进行4轮筛选,获得了SpA天然分子中不存在的单结构域排列组合分子D-C。在筛选过程中,阴性对照噬菌体的逐渐减少、展示两个结构域以上的噬菌体比例不断增多,尤其是D-C组合的选择性富集和其随机连接肽的严格筛选都显示了筛选的有效性和D-C组合的重要性。噬菌体ELISA进一步证实D-C与人IgG四亚类的结合能力远强于天然SpA分子。该研究应用分子进化技术首次获得了一种与人IgG四亚类具有结合优势的新型组合分子D-C,不仅可为IgG纯化、制备、检测等方面的应用提供新的候选分子,还为细菌IBP结构功能的进一步研究提供新的手段。     

血小板浓缩生长因子对正畸大鼠牙移动及牙周组织CCR-1和HO-1表达的影响

摘要 目的：研究血小板浓缩生长因子（concentrated growth factors, CGF）对正畸大鼠牙移动及牙周组织CC类趋化因子受体-1（CC chemokine receptor-1, CCR-1）及血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1, HO-1）表达的影响。方法：150只大鼠随机分为对照组和观察组,每组75只,两组均建立正畸牙移动模型,观察组每日腹腔注射10 % CGF生理盐水溶液,对照组注射等体积生理盐水溶液,共注射14 d。分别检测第0 d、1 d、3 d、7 d和14 d两组大鼠的牙移动距离,TRAP染色并进行破骨细胞计数,检测牙周组织中CCR1和HO-1 mRNA的相对表达。结果：随正畸力作用时间的延长,两组大鼠牙移动距离均显著增长、破骨细胞计数显著增多、牙周组织中CCR1和HO-1 mRNA的相对表达均显著升高（P＜0.05）;对照组与观察组在第1 d和第3 d时牙移动距离相比无统计学差异（P＞0.05）,而在第7 d开始,观察组牙移动距离显著长于对照组（P＜0.05）;观察组大鼠破骨细胞计数和牙周组织中CCR1和HO-1 mRNA的相对表达均显著高于同时间点的对照组（P＜0.05）。结论：CGF可促进正畸大鼠牙移动,增加破骨细胞数量,从而促进正畸牙移动和牙周组织重建,其机制可能与增加牙周组织中CCR1和HO-1的表达水平有关。     

一次性施肥技术对水稻-油菜轮作系统氮素淋失特征及经济效益的影响

一次性施肥技术是指在作物根际附近只进行一次基施肥的新技术,具有简化施肥管理、降低劳动成本等优点,但其对环境的影响如氮素淋失等仍需进一步分析.本研究以长江中下游地区典型的水稻-油菜轮作模式为例,设置了空白对照(CK)、农民习惯施肥(FP)、优化施肥(OPT)、一次性基施尿素(UA)、一次性基施控释肥(CRF)5个处理,采用地下淋溶原位监测的方法,获取了不同处理下水稻-油菜轮作系统土壤90 cm深度处氮素(N)淋失特征,评估了一次性施肥技术对氮素淋失的影响,并综合分析了其经济效应.结果表明: 油菜季和水稻季土壤渗漏液中氮素的主要形态不同,油菜季渗漏液中以NO₃^--N为主,水稻季渗漏水中NO₃^--N和NH₄⁺-N各占约50%.从整个轮作周期看,氮素淋失主要发生在水稻季,与FP、OPT和UA相比,CRF氮淋失总量分别显著减少33.7%、20.8%和20.7%;但各施肥处理对油菜季氮素淋失影响不显著.在相同施氮量的条件下,与OPT相比,UA不仅保证油菜和水稻均稳产,而且使油菜季氮肥农学效率显著提高了15.1%,但是没能提高水稻季氮肥农学效率;CRF水稻产量和氮肥农学效率均差异不显著,但油菜产量和氮肥农学效率分别显著提高10.7%和18.9%.经济效益上,与OPT相比,UA和CRF处理油菜分别增收3660和3048 元·hm^-2,水稻分别增收3162和2220元·hm^-2.因此,对于长江中下游典型种植系统而言,综合考虑对氮素淋失、作物产量和经济效益的影响,一次性基施控释肥技术能在保证作物稳产或增产、提高农民经济效益的同时显著降低氮淋失量,是未来水稻-油菜轮作系统值得推荐的一种生产技术.