杆状病毒SpltMNPVSl136基因的克隆、表达及其产物功能

计算机分析斜纹夜蛾核多角体病毒（SpltMNPV)基因组序列,发现第136个读码框基因表达产物具有病毒囊膜蛋白的基本特征,计算机预测的SL136蛋白氨基酸序列N端具有信号肽,C端具有跨膜区,N端区还有一个许多病毒融合蛋白共有的卷曲螺旋结构。通过PCR扩增,我们克隆了Sl136基因并分别构建了原核表达载体pBVSl136及重组病毒表达载体,SDS-PAGE结果表明Sl136基因在大肠杆菌和昆虫细胞中均获得了较高的表达,另外,我们还构建了一个瞬时表达载体pUCSl136。单独转染Sl-zsu-1细胞后,低pH值环境可诱导细胞发生膜融合并形成合胞体,这些实验结果表明,Sl136基因表达的产物是一个病毒膜融合蛋白。     

斜纹夜蛾核多角体病毒DNA XbaI 4.0 kb片段锌指蛋白基因及重复序列分析

测定了斜纹夜蛾核多角体病毒 (Spodopteralituranucleopolyhedrovirus,SpltNPV)中山大学分离株基因组DNAXbaI4.0kb片段全序列 ,该片段包括一个锌指蛋白基因及三个区域的DNA重复序列 (SR1、SR2、SR3)。该锌指蛋白基因读码框为 2 196个核苷酸 ,编码 731个氨基酸的蛋白质 ,分子量为 83 .0 9kD ,该蛋白的等电点为 4.6 1。在其 5′非编码区内有一个杆状病毒早期启动子基序GAGT及一个TATA盒 ,在其终止密码的下游有 5个真核生物转录mRNA时poly(A)加尾信号AATAAA。在 2 2 3～ 2 41氨基酸残基之间有一个锌指蛋白基序 ,这一基序属于锌指蛋白基序中的C3HC4类 ,即环指 (Ringfinger)类基序。在 32 3～ 340氨基酸残基区域为一个核定位信号。该蛋白可能为一个高度折叠的蛋白质。在该片段中存在三个DNA重复序列区域 (SR1、SR2、SR3) ,其中SR1与SR3区域存在更大量的重复序列 ,SR1区域其中的一个重复序列长达 41bp ,SR1、SR3重复序列区域可能作为该病毒转录的增强子 ,或者作为DNA复制的起始点。     

斜纹夜核多角体病毒DNA XbaⅠ4.0kb片段锌指蛋白基因及重复序列分析

测定了斜纹夜核多角体病毒（Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)中山大学分离株基因DNA XbaI4.0片段全序列,该片段包括一个锌指蛋白基因及三个区域的DNA重复序列（SR1、SR2、SR3）。该锌指蛋白基因读码框为2196个核苷酸,编码731个氨基的蛋白质,分子量为83．09KD,该蛋白的等电点为4．61,在其5‘非编码区内有一个杆状病毒早期启动子基序GAGT5及一个TATA盒,在其终止密码的下游有5个真核生物转录mRNA时poly(A)加尾信号AATAAA。在223－241氨基酸残基之间有一个锌指蛋白基序,这一基序属于锌指蛋白基序中的C3HC4类,即环指（Ring finger)类基序,在323－340氨基酸残基区域为一个核定位信号,该蛋白可能为一个高度折叠的蛋白质。在该片段中存在三个DNA重复序列区域（SAR1、SR2、SR3）,其中SR1与SR3区或存在更大量的重复序列,SR1区域其中的一个重复序列长达41bp,SR1,SR3重复序列区域可能作为该病毒转录的增强子,或者作为DNA复制的起始点。     

以23S rDNA一个多变区作为分子标记对致病杆菌属细菌进行分类鉴定

【目的】致病杆菌属(Xenorhabdus)细菌是一类重要的生物杀虫剂,斯氏属昆虫病原线虫的共生菌,建立快速准确的分类鉴定方法,对研究开发这类细菌至关重要。【方法】本研究PCR扩增测序了本室保藏的26株,含20种已定名致病杆菌属细菌的一段845 bp的23S rDNA序列,构建了基于这段序列的致病杆菌属系统树并与基于几乎全长16S rDNA序列的相应系统树进行比较,分析了两者作为致病杆菌属细菌分类鉴定分子标记的优缺点。【结果】结果表明,与全长16S rDNA序列相比,所选择的23S rDNA序列片段所含可变位点、简约信息位点比例更高,遗传距离数值跨度大。【结论】上述结果显示该序列片段可用于致病杆菌属细菌进行分类鉴定,特别适用于对野外资源调查中采集到的大量菌株进行快速鉴定。     

不同干燥方法对蝇蛆蛋白粉营养价值的影响

采用化学分析和动物实验的方法对冷冻干燥、微波干燥和低温干燥的蝇蛆粉进行了营养评价。结果表明,3种干燥方法不影响蝇蛆粉的粗蛋白和灰分含量,但微波干燥蝇蛆粉的脂肪含量显著降低;氨基酸分析显示,冷冻干燥蝇蛆粉的氨基酸总含量>微波干燥的蝇蛆粉>低温干燥的蝇蛆粉,而3种方法干燥的蝇蛆粉EAA/TAA均等于或大于41%,说明干燥所得的蝇蛆粉均属优质蛋白。另外,与FAO/WHO参考模式值相比,冷冻干燥蝇蛆粉的必需和半必需氨基酸总量明显高于FAO/WHO参考模式值,微波干燥的蝇蛆粉与FAO/WHO参考模式值相当,而低温干燥的蝇蛆粉中必需与半必需氨基酸含量显著低于FAO/WHO参考模式值,说明微波干燥及低温干燥会破坏蝇蛆中的某些必需或半必需氨基酸。动物实验结果表明,冷冻干燥的蝇蛆粉在动物体内被吸收利用的程度最高,其次是酪蛋白,再次是低温干燥的蝇蛆粉,而微波干燥的蝇蛆粉被动物吸收利用的程度最低。     

蚁蛉生物学研究进展

蚁蛉科Myrmeleontidae昆虫的幼虫俗称蚁狮,我国古人很早就将其入药,是一种具有良好开发利用前景的药用昆虫。文章对蚁蛉分类学、生物学、人工饲养、药用价值和杀虫活性物质分离等方面的研究进行综述,以期较全面了解蚁蛉的研究进展,为进一步研究、开发和利用蚁蛉提供参考。     

SZZ-Harpin融合蛋白在苏云金芽孢杆菌中的表达及活性测定*

PCR扩增编码SZZ短肽与植物过敏素 (harpin)融合蛋白的 1 5kb基因片段 ,克隆到苏云金杆菌 (^{Bacillusthuringiensis} ,Bt)表达载体pHZB1上 ,并置于晶体蛋白cry1类基因的启动子下游 ,从而构建表达质粒pHSZH。将表达载体pHSZH电激转化晶体缺陷型的BtK CryB菌株 ,获得工程菌Bt pHSZH。SDS PAGE蛋白分析和生物测定结果显示 ,培养 4 8h的Bt pH SZH明显表达SZZ Harpin融合蛋白 ,表达产物具有诱导烟草     

粉纹夜蛾核型多角体病毒诱导的胸苷激酶特性研究

粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)核型多角体病毒(TnNPV)感染草地贪夜蛾(Spodop-tera frugiperda)细胞后能诱导提高胸苷激酶的活性。不论是正常或感染细胞中的胸苷激酶都可将脱氧胞苷磷酸化,酶活最适pH及Mg~( )离子浓度值基本相同,DEAE-纤维素和Cibacron blue-sepharose柱层析所得酶活性图谱亦相似。TnNPV在胸苷激酶缺陷型的草地贪夜蛾细胞中能正常复制,但被感染细胞不具有胸苷激酶活性。由此可以确定,经TnNPV感染诱导后,活性有所提高的胸苷激酶不是病毒基因编码的。     

斜纹夜蛾核多角体病毒与增效剂混配对斜纹夜蛾幼虫的防治效果研究

斜纹夜蛾核多角体病毒 (Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｌｉｔｕｒａｎｕｃｌｅａｒｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓｖｉｒｕｓ ,简称ＳｐｌｔＮＰＶ)杀虫剂是一种无公害的生物杀虫剂 ,主要用于防治多食性的重要经济害虫斜纹夜蛾 ,同时兼治其它一些鳞翅目害虫。该产品主要由ＳｐｌｔＮＰＶ、增效剂、填料等组成。本文研究了斜纹夜蛾核多角体病毒 (ＳｐｌｔＮＰＶ)、增效剂以及两者混配对斜纹夜蛾幼虫的防治效果。在室温条件下 ,斜纹夜蛾幼虫的死亡率随病毒浓度或增效剂添加量的提高而增加。增效剂和ＳｐｌｔＮＰＶ混配后 ,对斜纹夜蛾幼虫防治效果比单独使用…     

高毒广谱杀虫Bt工程菌TnY

目前 ,农作物害虫在不同程度上对Ｂｔ制剂产生了抗性或不够敏感 ,在对这些害虫有效的Ｂｔ制剂中均不含Ｃｙｔ1Ａａ蛋白。含有ｃｙｔ1Ａａ和ｃｒｙ1 1Ａａ基因的天然苏云金杆菌 ,这两个基因均位于大质粒上。而通过质粒转移或ＩＣＰｓ的共表达构建苏云金杆菌重组菌株以期扩大Ｂｔ杀虫谱和增强毒力 ,常因质粒的不稳定性和质粒间的排斥性而受到一定限制。本研究利用转座子衍生载体ｐＴＶ1ＴＳ将ｃｙｔ1Ａａ和ｃｒｙ1 1Ａａ基因导入新分离Ｂｔ菌株Ｓ1 84的染色体中 ,并使之缺失转座酶而获得遗传稳定的初始工程菌Ｂｔ ＴｎＸ。在筛选工程菌过程中 …