热休克蛋白90的N端与ATP类似物的晶体结构揭示其功能调控

分子伴侣热休克蛋白90(Hsp90)对于许多涉及细胞周期调控、信号转导以及细胞生长调控蛋白质的折叠、成熟及稳定是必需的．Hsp90的N端结构高度保守,包含一个ATP结合口袋并具有ATP酶活性,Hsp90的功能依赖于ATP与Hsp90结合后诱导的构象重排及之后的ATP水解．为了深入研究ATP与Hsp90结合后N端的结构及其功能状态,使用悬滴法共结晶了Hsp90的N端与ATP类似物AMPPNP及ATPγS的复合物,并利用分子置换法对其结构进行了解析．两个复合物晶体结构都捕获到了核苷酸的电子密度,尤其是γ-磷酸的电子密度,从而观察到γ-磷酸与蛋白质之间的相互作用．ATPγS中γ-磷酸的捕获证实了之前报道的结构中没有捕获到γ-磷酸是其处于无序状态而非被水解．单体状态下的人源Hsp90^N- AMPPNP与处于二聚体化的酵母Hsp90-AMPPNP结构对比可见S1和ATP lid的位置有明显区别,结构分析表明,E18-K100和N40-D127之间形成的氢键相互作用,在一定程度上阻碍了S1和ATP lid的摆动,很可能阻止了二聚体的形成．     

川芎高频再生体系的建立

为建立川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)高频再生体系,优化了诱导和分化培养基及培养条件.以叶柄为外植体,以MS为基本培养基,KT2.0 mg/L+ IAA0.5mg/L的激素组合对不定芽分化最有利.在此基础上,针对外植体来源、培养条件和愈伤组织继代时间3个因素进行优化.结果表明:采用川芎无菌苗叶柄作为外植体,黑暗条件下诱导出愈伤组织,再在光照下继代培养15d后转入分化培养基中对不定芽诱导最为有利,分化率为44.4％.分化后得到的不定芽在含NAA0.5 mg/L和IBA 0.5 mg/L的1/2MS培养基上生根率达90％,移栽存活率为95％.     

麻疯树的组织培养及植株再生

1　植物名称　麻疯树 (Ｊａｔｒｏｐｈａｃｕｒｃａｓ)。2　材料类别　无菌萌发的种子苗 (种子采自四川省攀枝花 )。3　培养条件　基本培养基为ＭＳ。无菌苗萌发培养基 :( 1 )ＭＳ 6 ＢＡ 5 .0ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＩＢＡ 0 .1 ;( 2 )ＭＳ 6 ＢＡ 2 .5 ＩＢＡ 0 .1 ;     

西藏白菜型油菜遗传多样性的RAPD分析

通过利用22个10bp随机引物对来自西藏高原地区107份白菜型油菜种质资源材料的PAPD分析,探讨了西藏白菜型油菜品种之间的遗传分化关系,结果表明：（1）供试的107份材料共产生236条谱带,其中210条谱带有多态性,占88．98％,说明白菜型油菜在西藏高原地区具有较丰富的遗传多样性;（2）根据引物扩增出的DNA指纹图谱,运用UPGMA分析法,在遗传距离为0．078处,可将供试的107份白菜型油菜划分为11个类群,发现来自于同一地区或气候相似区的品种往往聚在一起,表明西藏高原白菜型油菜品种的相似性与其原产地的地理,气候背景密切相关,并在此基础上,结合西藏高原农业发展历史,气候背景以及地形地貌特点和植物地理学,植物区系学,植物进化论等方面的综合分析,提出西藏高原是世界白菜型油菜起源地的观点。     

青刺果离体快速繁殖

1植物名称青刺果(PrinsepiautilisRoyle),又名扁核木、青刺尖、打油果。2材料类别种子萌发的无菌苗茎尖及带腋芽茎段。3培养条件(1)诱导培养基:MS+6-BA2.0mg·L-1(单位下同)+NAA0.1;(2)壮苗培养基:MS+6-BA0.5+NAA0.1;(3)生根培养基:改良1/2MS+IBA1.0,以上培养基均添加8g·L-1琼脂和30g·L-1蔗糖,pH5.8。培养温度为(26±1)℃,光照时间为12h·d-1,光照强度为40μmol·m-2·s-1。4生长与分化情况4.1无菌外植体的获得青刺果种子采自四川攀西地区,由我校资源生物学与生物制药工程实验室提供。选择饱满种子,剥去外果皮,浸泡在蒸馏水中,…     

用GC-MS分析不同采收和贮存时期的麻疯树种子油的脂肪酸

将采收于青果期、黄果期、黑果期及储存1a、2a的麻疯树种子提油,测定其理化性质,并利用GC-MS分析这5个不同时期的种子所提取的麻疯树种子油成分。结果表明:5个油样的水分、酸值、出油率有较大差异,主要化学成分、碘值、皂化值差异不大。青果的出油率为13.13%,水分为0.66%,酸值为69.21,不饱和脂肪酸含量最低。新采成熟果实的出油率为54.64%,水分为0.36%,酸值为1.51,不饱和脂肪酸含量也相对较高。因此,新采的成熟果实较为适合作生物柴油的原料。     

水稻盐胁迫相关内含子microRNA的表达及其生物发生机制

内含子microRNA是一类位于编码基因内含子区域的非编码小RNA。目前,动物内含子microRNA研究报道较多,而关于植物体内含子microRNA的功能及其生物发生机制报道较少。本研究通过高通量测序技术,结合生物信息学方法,发现在盐胁迫条件下水稻幼苗中共85个内含子microRNAs表达,其中差异表达的有24个。预测到的51个靶基因的功能分析,主要涉及抗氧化途径、植物激素信号转导途径及功能基因表达调控途径。此外,根据宿主基因的表达情况推测,共30个内含子microRNAs具有独立表达的功能。通过分析内含子microRNA前体DNA片段上游1 kb序列中的启动子核心元件,初步验证其具有独立表达的能力。因此,推测水稻幼苗在盐胁迫条件下,部分内含子microRNA独立于宿主基因表达,并参与水稻盐胁迫下的自我防御机制。     

水稻盐胁迫相关内含子microRNA的表达及其生物发生机制北大核心CSCD

内含子microRNA是一类位于编码基因内含子区域的非编码小RNA。目前,动物内含子microRNA研究报道较多,而关于植物体内含子microRNA的功能及其生物发生机制报道较少。本研究通过高通量测序技术,结合生物信息学方法,发现在盐胁迫条件下水稻幼苗中共85个内含子microRNAs表达,其中差异表达的有24个。预测到的51个靶基因的功能分析,主要涉及抗氧化途径、植物激素信号转导途径及功能基因表达调控途径。此外,根据宿主基因的表达情况推测,共30个内含子microRNAs具有独立表达的功能。通过分析内含子microRNA前体DNA片段上游1 kb序列中的启动子核心元件,初步验证其具有独立表达的能力。因此,推测水稻幼苗在盐胁迫条件下,部分内含子microRNA独立于宿主基因表达,并参与水稻盐胁迫下的自我防御机制。     

转基因烟草表达西红花CSzCD基因产生西红花酸

为研究转基因烟草中产生西红花酸的可行性,在本研究中,西红花玉米黄素裂解酶（CSzCD）基因插入到pBI121载体的花椰菜花病毒（CaMV）35S启动子下游,通过农杆菌介导整合到烟草基因组中。通过Southern blotting 分析得到21株转基因烟草植株系; 转基因烟草叶片提取物Western blotting 和HPLC分析显示有西红花酸的产生,然而阴性对照中并没有发现西红花酸的存在。     

水稻精细胞差异表达基因RSG6的克隆和初步研究

用水稻 (Oryza sativa L.)精细胞优势表达克隆BF475207为探针,筛选水稻精细胞cDNA文库,得到一全长为1 176 bp的序列,其开放读码框编码281个氨基酸,与已知蛋白质无明显同源性,属于一新发现的基因,GenBank登录号为AF442490.Southern杂交显示该基因可能含有内含子.RT-PCR结果显示该基因在根、叶、二细胞花粉、成熟花粉、授粉子房和精细胞中均有表达,但在精细胞中的表达量要高得多,是精细胞差异表达基因.将此基因命名为RSG6 (rice sperm gene 6).将RSG6的编码区克隆到表达载体pQE30上,构建重组质粒.在大肠杆菌M15中表达出N端融合了6×His的融合蛋白.用纯化的融合蛋白免疫家兔,制得高效价、高特异性的抗体.