西红花的离体成花

1植物名称西红花(Crocus sativus). 2材料类别球茎的幼嫩顶芽,长度在20～30 mm. 3培养条件诱导培养基分别为:(1)MS NAA 5mg·L-1(单位下同) 6-BA 5;(2)MS NAA 5 6-BA7;(3)MS KT 5 NAA 4;(4)MS 2,4-D 2 KT0.5;(5)MS 6-BA 2 2,4-D 0.1;(6)MS 6-BA2 IBA 1;(7)B5 KT 5 IAA 4 2,4-D 1 Pro 0.5;(8)B5 KT 5 IAA 4 2,4-D 1 Pro 0.5.以上培养基均添加琼脂0.8%;(1)～(5)中加蔗糖4%,(6)中3%,(7)中6%,(8)中4%;pH 5.8.培养温度(20±2)℃,黑暗培养.     

异源表达AtCYSa基因烟草的耐盐和抗虫特性分析

植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂在植物防御生物与非生物胁迫过程中发挥着重要的作用。拟南芥中的半胱氨酸蛋白酶抑制剂AtCYSa基因的表达能够受到多种胁迫的诱导,且在拟南芥中过量表达AtCYSa基因可以增强转基因拟南芥抵御盐、干旱和氧化等非生物胁迫的能力。为了进一步探究AtCYSa基因的功能以及在烟草中的应用,构建了植物表达载体pCAMBIA 1302-AtCYSa。通过PCR以及RT-PCR验证共获得4株阳性转基因烟草,选择其中3株转基因烟草进行盐胁迫处理和抗虫活性实验。在盐胁迫处理中,100mmol/L NaCl和200mmol/L NaCl处理组的丙二醛含量显著低于野生型对照组。伊文思蓝染色和细胞相对活性结果表明,转基因烟草的细胞活性比野生型烟草明显偏高。这说明在盐胁迫处理下,AtCYSa基因的表达能够起到保护转基因烟草的作用。抗虫活性研究发现,实验组的幼虫总重均呈明显的下降趋势,且幼虫死亡率显著高于对照组。这些结果表明,AtCYSa基因在烟草中的过量表达能够增强转基因烟草的耐盐以及抗虫的能力。     

血脂代谢指标及血清维生素A、E水平与子痫前期的相关性分析

目的:探讨血脂代谢指标及血清维生素A、E水平与子痫前期的相关性。方法:选取2016年12月至2017年12月期间来我院产检及住院分娩的722例妊娠妇女,选取94例子痫前期的妊娠妇女作为A组,其中轻度子痫前期32例作为A1组,重度子痫前期62例作为A2组,并从剩余的628例正常妊娠者中选取126例自愿参与本研究的妊娠妇女作为B组。收集并记录妊娠妇女的临床指标,包括入院时的孕周、孕次、产次、流产次数、血脂代谢指标、血清维生素A、E水平,分析血脂代谢指标、血清维生素A、E水平与子痫前期的相关性。结果:三组孕妇总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、载脂蛋白A(ApoA)、载脂蛋白B(ApoB)、维生素A、维生素E水平整体比较差异均具有统计学意义(均P0.05);A1组、A2组的TC、TG、LDL、HDL、ApoA、ApoB、维生素A、维生素E水平与B组比较,差异均有统计学意义(均P0.05),A2组TG、LDL高于A1组,而维生素A、维生素E水平低于A1组,差异均有统计学意义(均P0.05),Spearman秩相关分析结果显示,TC、TG、LDL、ApoB水平与子痫前期呈正相关(r=0.214,0.432,0.517,0.226,P=0.012,0.008,0.005,0.012),HDL、ApoA、维生素A、维生素E水平与子痫前期呈负相关(r=-0.282,-0.357,-0.539,-1.217,P=0.010,0.009,0.003,0.000)。结论:血脂代谢指标、维生素A、维生素E水平在子痫前期孕妇中表达异常,且这些指标与子痫前期密切相关,应重视妊娠期孕妇的血脂代谢指标、维生素A、维生素E水平的监测,并控制其水平,从而有效防治子痫前期。     

麻风树生物柴油研究和开发进展

随着世界能源消耗量的不断剧增,生态环境恶化加剧,能源安全与环境问题正在越来越深刻地影响着当今全球社会和经济的可持续发展。寻求发展生物能源等可再生能源或新能源来解决目前和未来的能源与环境问题已成为国际上备受关注的热点,不少国家正在或已制定有关生物能源的发展战略。     

麻风树生物柴油研究和

随着世界能源消耗量的不断剧增,生态环境恶化加剧,能源安全与环境问题正在越来越深刻地影响着当今全球社会和经济的可持续发展.寻求发展生物能源等可再生能源或新能源来解决目前和未来的能源与环境问题已成为国际上备受关注的热点,不少国家正在或已制定有关生物能源的发展战略.     

水稻精细胞差异表达基因RSG6的克隆和初步研究

用水稻 (OryzasativaL .)精细胞优势表达克隆BF4 75 2 0 7为探针 ,筛选水稻精细胞cDNA文库 ,得到一全长为1176bp的序列 ,其开放读码框编码 2 81个氨基酸 ,与已知蛋白质无明显同源性 ,属于一新发现的基因 ,GenBank登录号为AF4 4 2 4 90。Southern杂交显示该基因可能含有内含子。RT_PCR结果显示该基因在根、叶、二细胞花粉、成熟花粉、授粉子房和精细胞中均有表达 ,但在精细胞中的表达量要高得多 ,是精细胞差异表达基因。将此基因命名为RSG6 (ricespermgene 6 )。将RSG6的编码区克隆到表达载体pQE30上 ,构建重组质粒。在大肠杆菌M15中表达出N端融合了 6×His的融合蛋白。用纯化的融合蛋白免疫家兔 ,制得高效价、高特异性的抗体     

水稻miRNA3026启动子及硫氧还蛋白基因OsTxnDC9的克隆与分析

硫氧还原蛋白基因 OsTxnDC9 是水稻miRNA3026的宿主基因。克隆出了水稻miRNA3026启动子,其总长度为1 477bp;构建出4个缺失片段,瞬时表达表明这个启动子为弱启动子。在此基础上克隆出水稻硫氧还原蛋白 OsTxnDC9 基因,其长度为480bp。生物信息学表明 OsTxnDC9 基因编码的氨基酸序列与二穗短柄草硫氧还原蛋白基因编码的氨基酸(XP_003573612.1)序列同源性最高。荧光定量PCR发现OsTxnDC9在水稻花粉一核中表达量最高,亚细胞定位表明其主要在细胞质中表达。这为探索miRNA3026启动子和宿主基因的关系奠定了基础。     

麻疯树核糖体失活蛋白基因的克隆和表达

麻疯树(Jatropha curcas L.)核糖体失活蛋白(curcin)是存在于麻疯树种子中的一种毒性较强的蛋白,它与蓖麻毒蛋白和相思子毒蛋白的性质相似,属Ⅰ型核糖体失活蛋白.从麻疯树种子中分离得到一种分子量为28.2 kD的蛋白质,其对无细胞系统中蛋白质合成的抑制活性较强,IC50为(0.19±0.01)nmol/L,具有RNA N-糖苷酶活性.依据curcin的N端部分氨基酸设计简并引物,通过RT-PCR和5'-RACE技术从未成熟种子总RNA中克隆到curcin全长cDNA序列.该cDNA全长由1 173个碱基组成,包含一个编码293个氨基酸的前体蛋白,前42个氨基酸为信号肽.推测的多肽序列与测定的蛋白质N端序列相同,与多种己发表的Ⅰ型核糖体失活蛋白和Ⅱ型核糖体失活蛋白的A链有一定的同源性.将curcin的编码区与表达载体pQE-30相连后,转入大肠杆菌(Escherichia coil)M15菌株中得到了有效的表达.将表达的融合蛋白纯化后发现,它具有抑制无细胞系统蛋白质合成的能力.