"睡美人"转座子系统研究进展

转座子在脊椎动物中的应用远落后于在其他生物系统中的应用。“睡美人”转座子(sleeping beauty transposon)是Tc1/mariner转座因子超家族中的一员,是存在于鲑鱼基因组中的1个已经失活的转座子。1997年,Ivics等将这个转座子进行重建并恢复了它的活性。短短几年内的有关研究表明,“睡美人”转座子是目前在脊椎动物中转座活性最高的转座子。结合该转座子系统逐步显示出的广阔应用前景,本文重点论述了其结构、转座机制及应用,并提出了应用“睡美人”转座子系统须注意的问题。     

表油菜素内酯对单细胞藻生长和某些生化物质含量的影响

选择处于指数生长期,细胞密度适宜,无污染的亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)和球等鞭金藻(Isochrysis galbana),摇匀后接种于已灭菌的改良1/2F培养液中(Janet RS.Handbook ofPhycological methods.Cambridge UniversityPress 1987.p.8),进行限量培养。表油菜素内酯(epi-Br)处理浓度见表1。两种藻的培养温度分别为16～23℃和20～23℃、光照强度分别为5000～10000lx和1500～3000lx(散射光)。每日3次振荡通气。接种后每日上午测细胞数。用最佳浓度处     

三角褐指藻光合与生长参数测量方法的研究

三角褐指藻是生产生物柴油的优势藻种,监测其光合和生长参数是利用它们生产生物柴油的关键环节。本研究通过细胞计数对细胞生长量进行监测,利用多激发波长调制叶绿素荧光仪(Multicolor PAM)、NanoDrop紫外分光光度计与荧光分光光度计分别检测叶绿素荧光参数、培养基中硝酸盐含量、细胞叶绿素荧光强度与中性脂相对含量。结果显示细胞密度与叶绿素荧光强度只有在生长期才具有线性关系,达到稳定期后,叶绿素荧光强度显著性下降,此时与细胞密度不成比例;PSII最大光化学量子效率F_v/F_m与叶绿素荧光值比生长速率呈正相关,在整个培养阶段F_v/F_m的变化趋势呈现两次上升与下降的过程;光化学淬灭系数qL在培养过程中呈上升趋势,而相对电子传递速率rETR与实际光合效率Y(II)均呈现先升后降的趋势;培养基中硝酸盐含量消耗到一定程度后保持恒定,不再降低;细胞中性脂相对含量在藻细胞接种1天后稍下降,随后持续上升,并在培养基硝酸盐含量不再下降后继续增加。本研究中光合与生长参数测量得到的相关数据,以及培养基硝酸盐含量和细胞中性脂相对含量测量方法的建立,可以为三角褐指藻实验室培养及其代谢产物积累的研究提供必要的研究基础与检测手段。     

紫菜色素突变体研究进展

色素变异是紫菜常见的突变性状。发生色素突变的紫菜可以为其遗传育种提供优秀的种质资源,并为其生理及基因功能研究提供理想的实验材料。结合色素突变体在育种工作和遗传基础研究等领域逐步显示出的广阔应用前景,本文重点论述了紫菜色素突变体的诱变、遗传特征、突变分子机制及应用等方面的研究进展。     

裙带菜PSⅠ复合物的荧光特异性

以褐藻裙带菜（Undaria pinnatifida）为实验材料,采用蔗糖密度梯度超速离心的方法,去污剂SDS为增溶剂（SDS:Chl＝20:1,4℃增溶20 min）,蔗糖密度梯度为60%、50%、40%、30%、20%、15%和10%,分离制备光系统Ⅰ(PSⅠ)复合物。结果表明, 40% 蔗糖层带所含色素蛋白复合物是PSⅠ复合物。利用红藻作参照对比,光谱结果表明从裙带菜中得到的PSⅠ复合物没有730 nm的荧光峰。分析认为这是所有褐藻包括裙带菜PSⅠ复合物的荧光特异性。     

拟南芥Leafy Cotyledon 2的表达提高了小球藻Chlorella sorokiniana的油脂含量

油脂含量是影响微藻产业化生产生物柴油的因素之一。基因工程的方法是培育高产藻株的一个重要手段。Leafy Cotyledon 2(LEC2)在拟南芥中是调节种子成熟及油脂积累的重要转录因子,在藻类植物中尚无相关的报道。本研究从拟南芥中获取LEC2基因,构建表达载体p CIMBIA1300-35s-GFP-ATLEC2,通过基因枪介导法转入小球藻C.sorokiniana。经过PCR、RT-PCR、Western blotting分析,筛选出一株转ATLEC2基因藻株。对总脂肪酸含量的分析发现,转ATLEC2基因藻株的脂肪酸含量比原始藻株提高了1倍且没有明显影响生长。以上结果表明,ATLEC2能促进小球藻油脂的积累。     

利用叶绿素荧光快速筛选紫外诱变高含油小球藻

本实验利用尼罗红荧光与叶绿素荧光比值表征小球藻的油脂含量,快速筛选出一株紫外诱变高产油藻株。经过叶绿素荧光分析表明,诱变株M2的生长及光合作用没有显著变化。检测诱变株M2总油脂含量32.1%,比野生藻株的23.1%提高了9个百分点。     

海带磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶的提取和特性(简报)

提取得到的海带PEP羧激酶粗酶比活性为1.21nmolNADH/mg蛋白·分。经硫酸铵分步沉淀和冻融过程后其比活性提高近4倍。抗氧化剂可提高PEPCK活性。该酶催化的羧化反应底物是PEP。ADP和Mn~(2+)是必需的辅助因子。酶反应的最适pH值是7.5。用部分纯化酶测得底物HCO_3~-的K_m值是14.0mmol/L,pEP是0.3mmol/L,ADP是0.1 mmol/L。