茶树花粉特异蛋白基因CsPSP1的分离及序列分析

利用cDNA-AFLP技术比较了茶树[Camellia sinensis(L.)O.Kuntze cv.Wulong]花蕾发育早期和晚期的基因表达,结果表明存在明显差异。以E12和M20为引物对在晚期发育花蕾中筛选出一条281 bp特异表达的差异条带TDF53(transcipt-derived-fragment,TDF)。RT-PCR分析表明该片段只在晚期发育花蕾中特异表达。用RACE方法延伸其末端序列,克隆并测序获得全长cDNA序列(GenBank登录号:DQ887753)。该基因全长2079 bp,开放阅读框1701 bp,编码567个氨基酸,其分子量为63 kDa。序列和结构的同源性分析表明:该基因编码的氨基酸序列与烟草、油菜的花粉特异蛋白等同源性较高,由此推定,该基因为编码茶树花粉特异蛋白的基因,并将分离到的花粉特异蛋白基因命名为CsPSP1。     

葱兰是细胞减数分裂实验的好材料

葱兰是细胞减数分裂实验的好材料詹少华,余梅（安徽省六安师专生物学系２３７０１２）葱兰［Ｚｅｐｈｙｒａｎｔｈｅｓｃａｎｄｉｄａ（Ｌｉｎｄ）Ｈｅｒｂ］百合科葱属草本花卉植物,常栽培于花园四周或盆栽,全国各地均有分布。近年来,我们结合教学,试用葱兰作减数分...     

青海湖M1菌发酵液体外抗菌活性及稳定性的初步研究

从青海湖中分离得到一株霉菌M1,采用平板抑菌法进行体外抗菌作用以及pH值、温度因素对其抗菌活性的影响。结果表明：该菌株发酵液对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌及金黄色葡萄球菌都有明显的抑菌效果。M1菌株发酵液的抑菌活性对热稳定性较差,在pH值3～7的条件下抑菌效果最佳,遗传稳定性也不高。     

应用ＣＡＴＳ法分离和鉴定猪ＧＦＡＰ基因的研究

根据比较锚定序列宗踪（ＣＡＴＳ）法,选择人和小鼠胶质细胞原纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）基因的同源区域设计引,用ＰＣＲ方法从二花脸猪基因组中分离到４１２bp的基因片段,经与基因资料库中已训功能基因的同源性比较,该片段可鉴定为猪的ＧＦＡＰ基因,利用猪－啮齿类体细胞杂克隆板将ＧＦＡＰ基因定位于猪１２号染色体１２p11-(2/3)P13区域。     

Tx-TnT在不同发育时期的艾维茵鸡和洪山鸡肌肉组织中的表达分析

以艾维茵鸡和湖北省地方鸡种洪山鸡为实验材料 ,借助特异性识别Tx残基肽的单克隆抗体 6B8,采用Western杂交方法 ,检测Tx TnT异构体在洪山鸡和艾维茵鸡 7个发育时期 (孵化第 14d、初生 1日龄、7、14、2 1、2 8和35日龄 )的胸肌和腿肌中的表达差异 ,并与胸肌重进行相关分析。结果表明 ,Tx TnT在腿肌和孵化第 14d的胸肌中均不表达 ,在初生 1日龄后胸肌中的表达随发育逐步增长 ,统计分析发现 ,Tx TnT在艾维茵鸡和洪山鸡胸肌中的表达量具有显著差异 (P <0 0 5 ) ,与胸肌重具有显著相关 (P <0 0 5 )。     

盐角草和盐芥3个超氧化物歧化酶基因的克隆和功能分析

为了探究盐生植物的耐盐机制,比较不同盐生植物超氧化物歧化酶(SOD)基因耐盐性的大小,采用RACE技术克隆了盐角草锰和铜/锌两种SOD的cDNA全长。序列分析表明,盐角草MnSOD基因(SeMSD,GenBank登录号为JQ061158)含有699bp的开放阅读框,编码一个长233个氨基酸的多肽,其预测相对分子量为25.7kD。Cu/ZnSOD基因(SeCSD,GenBank登录号为JQ061160)开放阅读框长为684bp,并编码228个氨基酸的多肽,相对分子量为23.3kD。根据已获得的这两个cDNA序列和GenBank公布的盐芥MnSOD基因序列(ThMSD,EF140719),构建了3个原核表达载体pET30a-SeMSD、pET30a-SeCSD和pET30a-ThMSD,并将它们转化大肠杆菌BL21,成功表达出了目的蛋白。通过优化IPTG的诱导浓度,在6.5%和7.5%盐度下对这3个SOD基因的耐盐能力验证结果显示,相比对照菌BL21(pET30a),转化了pET30a-SeMSD和pET30a-ThMSD载体的重组菌具有更高的耐盐性,而转化pET30a-SeCSD载体的重组菌没有表现出耐盐性的提高。     

香菇原生质体单核化过程中细胞核相对优势等级的研究

食用菌原生质体单核化过程中常常会出现偏分离现象,这个现象在香菇中研究较早,这是一个有趣又似乎是无序的现象,但是目前对偏分离的机制还缺少清晰的认识。为了细致深入研究原生质体单核化中的偏分离现象,本研究定义了强势核和弱势核概念。为了解不同强势核和弱势核的等级地位变化,本研究选取了10个香菇强势核菌株和6个弱势核菌株作为供试菌株,通过强势核菌株间、弱势核菌株间、强势核菌株与弱势核菌株间3种单单杂交方式获得26个新的双核体菌株,再检测这些双核体菌株在原生质体单核化中偏分离情况。结果表明：26株双核体都存在偏分离现象,并且强势核和弱势核的地位会发生逆转。研究结果暗示不同强势核和弱势核之间存在等级关系。本研究结果还表明同核异质体在偏分离现象中强势核和弱势核的表现是一致的。希望本研究能够为深入探索双核体细胞中两个细胞核的互作机制提供路径和借鉴。     

一个新的猪肌肉组织EST的分离、定位与表达

利用mRNA差异显示技术,从猪骨骼肌组织中分离到一个新的表达序我标签（expressed sequence tag ,EST)ESThp9-1(其GenBan登录号：BI596262）,其序列长196bp,经BLAST程序与GenBank中存在的序列比对后,发现与猪的所有序列无同源性,但与大鼠的U3A核内小RNA基因及小鼠的U3B．4核内小RNA基因同源性分别为87％（93个碱基）和85％（96个碱基）。半定量RT－PCR表明,此EST在猪的多数组织中均有表达。通过体细胞杂种板（somatic cell hybrid panel,SCHP)及辐射杂种板（radiation hybrid panel,RH)分析,EST hp9-1被定位于猪的12号染色体长臂,与微卫星标记S0090连锁。根据同源性比对和物理定痊结果,推测EST hp9-1为猪的U3基因家族中一员。     

黄鳝二价染色体上地高辛配基标记随机引物原位DNA合成的研究

在黄鳝二价染色体上, 运用地高辛配基标记的随机引物原位DNA合成技术诱导出了明暗相间、基本稳定且类似于R带的带状结构。本文对该结果进行了较详细的分析和讨论。 Abstract:The dark bands alternating with light bands,relatively stable and R-band-like structure was showed on the pachytene bivalents of Rics-field eel(Monopterus albus Zuiew)by using the random-primed in situ digoxigenin-labelled DNA synthesis technique,and the results were analysed and discussed in detail.     

甘蔗黑穗病菌RNA干扰相关基因ssdcl的功能研究

甘蔗黑穗病菌(Sporisorium scitamineum)是典型的二型态真菌,由其引起的甘蔗黑穗病是一个全球性的病害,对甘蔗产量和含糖量造成巨大损失。RNA干扰是一种保守的小RNA介导的转录后基因沉默机制。目前甘蔗黑穗病菌的RNA干扰系统尚未明确。本研究用蛋白保守结构域对甘蔗黑穗病菌基因组进行搜索,发现了一个RNA干扰组件DICER-LIKE (SsDcl)蛋白。序列分析显示此蛋白具有剪切双链RNA所必需的RNaseⅢ结构域和双链RNA识别区域。为了研究ssdcl基因的功能,本研究以甘蔗黑穗病菌单倍体JG36为出发菌株,构建了ssdcl基因的缺失突变株。与野生型相比,Δssdcl突变体的生长速度较慢,与野生型JG35配合后形成的二倍体菌丝更为细小,且分支较多,表明ssdcl基因的缺失可能影响了黑穗病菌菌丝的生长发育过程。另外,Northern blot和qRT-PCR的结果显示,ssdcl基因缺失突变体中milR-4的表达量下调,提示ssdcl基因在甘蔗黑穗病菌milRNAs形成过程中起重要作用。