银染色法——检测聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质和核酸的一种快速方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是分析蛋白质和核酸样品的有力工具,在分子生物学及有关学科的基础和应用研究中都获得了越来越广泛的应用。1979年以来,Switzer及其他作者陆续报道了检测PAGE中蛋白质和核酸区带的新方法——银染色法,使检测的灵     

一种简单而灵敏的蛋白质肽图分析方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)已广泛用于多组分蛋白质体系的分离、纯化和分子量比较分析,而蛋白质肽图分析方法则能进一步在寡肽的水平上对蛋白质进行比较研究。部分揭示蛋白质氨基酸组成的异同。常规的肽图分析方法所需样品量较大(n mole或接近mg量),制备样品不仅步骤繁杂而且损耗量大,因而限制其广泛应用.1977年Elder等对PAGE分离得到的凝胶小片中的蛋白质,直接用放射性碘标记,然后进行酶解、电泳-层析、放射自显影     

用脊髓灰质炎病毒作表达载体的研究进展

用脊髓灰质炎病毒（ＰＶ）减毒株构建的表达载体可分３种类型：ＰＶ抗原嵌合体、有缺损的ＰＶ杂交复制子和非缺损的ＰＶ杂交病毒。本文对这３种类型ＰＶ表达载体的研究进展进行综述。     

狂犬病毒糖蛋白DNA疫苗的研制及其免疫效果的观察

构建了含有狂犬病毒（RV）CVS株糖蛋白（GP）基因的重组质粒pCMVCVSRG,将其转染至鼠NIH3T3细胞中,用间接免疫荧光法和APAAP法均证实RVGP能在真核细胞中表达。分别将合RV不同毒株的GP基因的质粒（DNA疫苗）及空白载体质粒（对照组）免疫小鼠,仅DNA疫苗免疫的小鼠产生了中和抗体。以RV攻击后,DNA疫苗免疫组小鼠的存活率与对照组相比,差异有极显著性意义（P＜0．01）;不同的启动子（CMV或SV40）与不同GP基因（来源于CVS株或ERA株）对DNA疫苗的免疫效果无明显影响。在注射120d后．用PCR方法仍可检测出RVGP基因。结果表明：狂犬病DNA疫苗能够诱生低水平的中和抗体和记忆性B淋巴细胞,并能保护小鼠抵抗RV的攻击。该疫苗能在体内稳定存在。狂犬病DNA疫苗的研制为狂犬病免疫开辟了一条新途径,并可为防治其他疾病的DNA疫苗的研制奠定基础。     

中国6株狂犬病病毒街毒株全基因组测序与分析

实验研究中对分离于中国的6株狂犬病病毒街毒株进行了全基因组测序,对基因组的5个结构基因(N、P、M、G和L)的核苷酸和推断的氨基酸序列以及非编码区序列进行了分析与比较,并与来自GenBank的40株毒株从全基因组水平进行了分子进化分析。所测6株中国狂犬病病毒街毒株的全基因组核苷酸序列长度介于11 907 nt(CQ92)和11 924 nt(SH06和gg4)之间,基因组结构相同,用全基因组和不同的结构基因构建的进化树拓扑结构相似,基因组3′和5′末端高度保守而且末端11个核苷酸互补配对,5个结构基因的保守性依次是NLMGP,核苷酸同源性的最小值依次分别是81.9%、81.7%、80.7%、78.3%和76.7%。     

婴幼儿疫苗开发的最新进展

感染性生物体没有地域性,它们不受边界或国界的限制。对新开发的和现有疫苗的主要挑战是如何使它们能得到尽可能广泛和适当的应用。在一个半球进行的预防可能对另一个半球有好处。而且,抗传染病疫苗的开发正调整并应用于开发针对癌症和其它疾病的疫苗。如同在其它所有的学科中一样,     

狂犬病病毒基因重组载体的构建及其在重组疫苗研究中的应用

本文概述了狂犬病病毒(RV)基因重组载体构建的基本原理、该载体的优点、将该载体用于构建人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)重组疫苗的方法,以及所获得的疫苗在小鼠中的免疫效果,最后讨论了对该载体系统作进一步研究的可能发展方向.