SDE-GC-MS法分析三种虫生真菌菌丝中挥发性成分

采用同时蒸馏萃取-气相色谱质谱联用（SDE-GC-MS）的方法分析了蝉拟青霉、拟细羽束梗孢、根足被毛孢菌丝的挥发性成分,从中分别鉴定出44、28和19种化合物,它们主要为萜类化合物、芳香族化合物、醇类、烷烃类、酯类和醛类。成分比较发现,3种虫生真菌挥发性物质中有3种主要共有成分,分别为丁羟基甲苯、1-辛烯-3-醇、苯乙醛。除共有成分外,它们各自都有大量特有成分,其中蝉拟青霉主要有5-甲基-2-呋喃-乙酸酯、反式-2,4-癸二烯醛、长叶烯等;拟细羽束梗孢主要有5-羟基-2-癸烯酸-δ-内酯、2,4-二甲基-恶唑、苯酚、β-榄香烯等;根足被毛孢主要有3,4,5-三甲基-苯甲醛、1,3-二甲基-3,4,5,6-四氢化-2(1H)嘧啶、顺式-2-羟基-1-（羟甲基）-9-十八碳一烯酸乙酯。     

蝉蜕活性成分的提取及其抑菌活性的研究

本文报道了对传统中药蝉蜕抑菌活性成分提取与抑菌活性研究结果。对4种提取方法和7种提取溶剂的提取效果进行了平行比较研究,研究结果显示,以体积分数95%乙醇作为提取溶剂,4种提取方法中,以超声波法提取时的浸膏得率最高。采用超声波提取法时,在7种提取溶剂中,以95%乙醇提取浸膏的得率最高。抑菌试验结果表明,不同方法获得提取物与对照组相比对Escheridia coli均有明显的抑菌作用(P≤0.05),但不同提取方法得到的提取物之间,并无显著的抑菌活性差异。其中采用超声波提取法,以95%乙醇为提取溶剂时,所得提取物的抑菌活性最高,对E.coli的最小抑菌浓度为0.078 mg/mL。该研究结果是蝉蜕抑菌成分的首次报道。     

与蝉花有关的虫草菌生物多样性的研究II：重要药用真菌蝉花有性型的发现及命名

我国重要药用真菌蝉花的分类地位和学名在国内外长期混乱,因其有性型未被发现,长期以来误作为根据巴西标本命名的Isaria (Paecilomyces) cicadae。作者最近在井冈山发现了其有性型,研究了标本及分离物的形态特征及多位点系统发育特征,并与GenBank中相关种类的序列进行了对比,证明I. cicadae是物种复合群,确定蝉花是虫草科虫草属中的新种,使用传统药用真菌蝉花的古老名称将其命名为Cordyceps chanhua。蝉花子座淡橙色到淡桔黄色,子囊壳半埋生,475-602×222-319μm,子囊孢子246-360×1.5-1.8μm,分孢子圆筒形,6.4-13.8×2.1-3.1μm。孢梗束淡黄色至淡黄褐色,分生孢子长椭圆形或圆筒形,3.5-10.5×1.5-4.5μm。     

Differential community development of fouling species on the pearl oysters Pinctada fucata,Pteria penguin and Pteria chinensis (Bivalvia,Pteriidae)

Abstract

A field experiment documented the development of fouling communities on two shell regions, the lip and hinge, of the pearl oyster species Pinctada fucata, Pteria penguin and Pteria chinensis. Fouling communities on the three species were not distinct throughout the experiment. However, when each species was analysed separately, fouling communities on the lip and hinge of P. penguin and P. chinensis were significantly different during the whole sampling period and after 12 weeks, respectively, whereas no significant differences could be detected for P. fucata. There was no significant difference in total fouling cover between shell regions of P. fucata and P. chinensis after 16 weeks; however, the hinge of P. penguin was significantly more fouled than the lip. The most common fouling species (the hydroid Obelia bidentata, the bryozoan Parasmittina parsevalii, the bivalve Saccostrea glomerata and the ascidian Didemnum sp.) showed species-specific fouling patterns with differential fouling between shell regions for each species. The role of the periostracum in determining the community development of fouling species was investigated by measuring the presence and structure of the periostracum at the lip and hinge of the three pearl oyster species. The periostracum was mainly present at the lip of the pearl oysters, while the periostracum at the hinge was absent and the underlying prismatic layer eroded. The periostracum of P. fucata lacked regular features, whereas the periostracum of P. penguin and P. chinensis consisted of a regular strand-like structure with mean amplitudes of 0.84 μm and 0.65 μm, respectively. Although the nature and distribution of fouling species on the pearl oysters was related to the presence of the periostracum, the periostracum does not offer a fouling-resistant surface for these pearl oyster species.     

蝉蜕、僵蚕对大鼠系膜增生性肾炎作用的实验研究

目的:研究蝉蜕、僵蚕对大鼠系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)的治疗作用。方法:采用改良慢性血清病法制备的MsPGN模型,随机分为模型对照组、蝉蜕高剂量组、蝉蜕低剂量组、僵蚕高剂量组、僵蚕低剂量组,另设正常对照组。分别在用药5周、8周后检测大鼠24h尿蛋白;8周后处死大鼠,行血液生化指标检测和肾组织HE染色观察,免疫组化法检测TGF-β1的表达水平。结果:与模型对照组比较,用药5周后蝉蜕、僵蚕高剂量组显著降低大鼠24h蛋白尿(P<0.01);8周后各治疗组大鼠肾组织TGF-β1表达量,24h蛋白尿和血清胆固醇均显著下降,蝉蜕高、低剂量组血清白蛋白均有所升高,差异具有显著性意义(P<0.01)。肾组织形态学观察显示,蝉蜕、僵蚕高剂量组个别区域肾小球系膜细胞轻度增生,系膜区轻度增宽,管腔无挤压现象,较模型组明显改善。结论:蝉蜕、僵蚕均能有效降低MsPGN大鼠24h尿蛋白,改善脂质代谢,其作用机制可能与抑制TGF-β1的过度表达有关。     

干旱胁迫对蝉拟青霉SOD活性的影响

为探讨蝉拟青霉Paecilomyces cicadae抗旱的生理生化基础,利用聚乙二醇6000(PEG-6000)对采自贵州省荔波县的蝉拟青霉GZUIFR-3L菌株液体发酵进行胁迫,用氮蓝四唑法连续测定不同培养时间SOD活性,考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量,从而测定SOD比活力。结果表明,胁迫和非胁迫情况下,蝉拟青霉蛋白质含量、SOD活性和SOD比活力分别在发酵培养第7,8,6d时达到最大值;经干旱胁迫的蝉拟青霉SOD活力及其比活力均比未经胁迫处理的高,初步推测蝉拟青霉抗旱能力与SOD活性有一定的相关性。     

蝉花的人工培养及其药理作用研究

蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)在马铃薯-蔗糖,Richnrd,Czapek等液体培养基上,室温静培14天,液面形成菌膜,产生大量产孢结构和分生孢子。深层培养只长菌丝团,未见有分生孢子产生。在一些自然基物上,菌丝体生长繁茂,并形成和寄主体上生长相似的孢梗束。蝉花及其人工培养物,经药理学实验显示出明显的镇痛、镇静和解热等功效。     

蝉棒束孢菌孢梗束培植过程中主要成分含量的变化规律及其复方对小鼠睡眠的影响

分析检测蝉棒束孢菌株BAI0101在培植过程中不同时间点孢梗束的转化率和孢梗束中多糖、虫草酸、腺苷和N ⁶-(2-羟乙基)腺苷含量的变化规律,对配伍的孢梗束复方辅助改善睡眠功能进行了初步评价。结果表明,从培植18d起,孢梗束的转化率呈现上升趋势,在培植30d左右,有保持稳定趋势;孢梗束中的多糖、虫草酸和腺苷含量均随着培植时间的延长呈现增高趋势,均在22-24d达到最高值,其后开始呈现降低趋势,而孢梗束中的N ⁶-(2-羟乙基)腺苷含量随着培植时间的延长呈现降低趋势,在24-26d左右达到最低值,其后呈现上升趋势,在培植至36d左右达到含量的最高值并保持稳定;对利用该菌株培植的孢梗束,经中药配伍组成的保健品小复方进行了辅助改善睡眠保健功能的初步评价,结果表明该复方有明显促进阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠作用,能明显降低巴比妥钠诱导小鼠睡眠潜伏期,且无直接睡眠作用,不影响戊巴比妥致小鼠睡眠时间,根据《保健食品检验与评价技术规范》,判定该复方具有辅助改善睡眠的保健功能。     

一种与蝉花易混淆虫草的鉴定及内菌核细菌群落分析

【背景】中国浙江省民间常将一种称为"雄蝉花"(也称独角龙)的虫草误认为是雌蝉花(Isaria cicadae Miquel)的同种,因此有必要为二者作出区分。【目的】通过形态、rDNA ITS序列比较蝉花和独角龙的差异,为2种虫草的鉴别提供理论依据;探究二者内菌核细菌群落组成及功能,加深对2种虫草的理解。【方法】通过分离纯培养技术获得蝉花和独角龙菌株;显微镜观察比较2种真菌产孢细胞的形态特征;通过高通量测序技术检测内菌核细菌群落组成并进行功能分析。【结果】经鉴定,蝉花为蝉棒束孢(Isariacicadae),独角龙为独角龙弯颈霉(Tolypocladiumdujiaolongae);在细菌属水平上,蝉花内菌核优势细菌属为无色杆菌属(Achromobacter)、Diplorickettsiaceae未定名属和根瘤菌属(Rhizobium),独角龙弯颈霉内菌核细菌有鞘氨醇杆菌属(Sphingobacterium)、沙雷氏菌属(Serratia)等潜在病原菌属;蝉花和独角龙弯颈霉细菌COG数据库预测功能相似,KEGG Pathway丰度相近。内菌核细菌群落涉及24种基因功能家族,其功能大多与转运和代谢相关,其中与新陈代谢相关的丰度最大。【结论】蝉花和独角龙是不同的物种,而且内菌核细菌群落组成差异较大,细菌主要参与2种虫草的代谢过程;独角龙弯颈霉内菌核存在病原性细菌类群,食用独角龙弯颈霉同食用蝉花相比安全性有待研究。     

蝉棒束孢显微形态变异式样

【目的】揭示蝉棒束孢居群形态性状的变异式样。【方法】通过对15个居群,75个蝉棒束孢菌株17个显微形态性状的观察和测量,采用SAS 8.1软件对蝉棒束孢显微形态性状数据进行描述性、巢式方差和Q聚类分析,获得蝉棒束孢显微形态变异数据。【结果】蝉棒束孢具有大小两型分生孢子,产孢细胞的形态可分为葫芦状和瓶状2种类型;蝉棒束孢在PDA培养基中易形成数量众多的厚垣孢子,菌丝间多能形成融合菌丝,并可观察到少量的融合菌丝在厚垣孢子与菌丝间、产孢细胞间形成。描述性分析表明,蝉棒束孢居群17个形态性状的变异系数(CV)在13.07%–104.09%之间,在物种水平上表现出丰富的变异;巢式方差分析表明,蝉棒束孢显微形态性状在居群间平均方差分量占总变异的11.29%,居群内个体间平均方差分量占总变异的15.27%,菌株内观察值间平均方差分量占总变异的73.44%。【结论】蝉棒束孢菌株形态性状变异丰富,是形态性状变异的主要来源,蝉棒束孢居群显微形态性状不存在明显的地理相关性。