Ⅱ型限制性核酸内切酶NcrⅠ的研究

 在肉色诺卡氏菌C-212株Nocardia carnea C-212中筛选到一种Ⅱ型限制性核酸内切酶NcrⅠ,经与BglⅡ的λDNA降解物的酶谱比较,以及酶识别特异性和切割位点的检测,证明了NcrⅠ是已知的限制酶BglⅡ的同切限制酶,而且其切割位点也与BglⅡ相同,其为:     

小麦幼苗根系镉螯合素

从经Cd~(2+)处理的小麦幼苗根系中分离得到一种镉结合复合物(Cd-BC)。通过SephadexG75,DEAE-52柱层析纯化,鉴定了此复合物性质:(1)紫外吸收光谱在255～265 tim间有一个“肩”,A_(250)/A_(280)>1;(2)在Sephadex G75柱层析上的表观分子量约为10kD,但在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈现的条带紧接着前沿,分子量非常小;(3)氨基酸组分分析,约90％的氨基酸残基为Glu/Gln,Cys和Gly,三者比例约为4:4:1。结果说明小麦幼苗根系Cd-BC是寡聚肽,是植物镉螯合素(Cd-PCs)的聚合体。     

流行性出血热循环免疫复合物组分分析

应用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫转印技术对流行性出血热患才血清中免疫合物组分进行了分析。流行性出血热循环免疫复合物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离,考马斯亮兰染色,显色主要有７条带,分子量分别为２３ｋＤ,５０ｋＤ,５２ｋＤ,６５ｋＤ,７２ｋＤ,８０ｋＤ及１００ｋＤ。采用该病毒特异性抗血清、单克隆抗体以及人免疫球蛋白、补体成分抗血清识别,在其特环免疫复合物中可检出特异性病毒抗在及相应的免疫球状蛋白和补体成     

流行性出血热患者皮肤组织内病毒抗原及免疫复合物检测与意义

应用常规病理、免疫病理及超微病理技术,对３３例流行性出血热（ＥＨＦ）患者皮肤活检标本的病理变化及病毒抗原、免疫复合物进行观察,同时与血清病毒抗原、抗体及循环免疫复合物检出情况进行比较。在２３例ＥＨＦ患者皮肤微血管内皮细胞中检出病毒抗原,部分组织中可同时检出免疫球蛋白及Ｃ３,少数组织仅能检出病毒抗原或免疫球蛋白。配对血清小也可检出ＥＨＦ病毒抗原、抗体及循环免疫复合物。组织及血清免疫复合物形成与血清补体Ｃ３水平下降有关,组织内肥大细胞脱颗粒与血清ＩｇＥ水平升高相关,提示多种变态反应参与了流行性出血热的发病机制。     

人鼻咽癌细胞基因组中瘤基因Ha－ras－1的Dnase Ⅰ超敏感位点的初步研究

ＤＮａｓｅⅠ超敏感位点的研究能够发现潜在的调控基因转录活化的位点,比较正常人外周血有核细胞,淋巴瘤细胞株Ｐ３ＨＲ１和人鼻咽癌低分化磷癌细胞株ＨＯｎＥ１和ＨＮＥ２中Ｈａ－ｒａｓ－１瘤基因的ＤＮａｓｅⅠ超敏感位点发现,只有ＨＯＮＥ１和ＨＮＥ２细胞基因组中存在一个ＤＮａｓｅⅠ超敏感位点,位于第一个外显子上游０．３７ｋｂ处,上述结果提示正常白细胞和Ｐ３ＨＲ１细胞中Ｈａ－ｒａｓ－１基因处于失活状态,而在鼻咽癌细胞基因组中则处于活化状态,它的活化可能与０．３７ｋｂ处的ＤＮＡ序列有密切的关系。     

质体醌重组的D1／D2／Cytb559复合物的荧光衰减动力学和光破坏作用

光系统Ⅱ反应中心Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ５５９ 在分离纯化过程中失去了电子受体ＱＡ 和ＱＢ,人工合成的质体醌可以与Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ５５９ 复合物发生重组。癸基质体醌（ＤＰＱ）与Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ５９９ 复合物的重组导致该复合物的荧光强度下降及发射光谱蓝移,同时两个与光化学活性相关的长寿命（２４ ｎｓ和７３ ｎｓ）荧光衰减组分占整个荧光的百分数下降,这些结果表明ＤＰＱ作为Ｐｈｅｏ－ 的电子受体,限制了Ｐ６８０＋ ·Ｐｈｅｏ－ 的电荷重组。ＤＰＱ 的加入对Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ５５９复合物中Ｃｈｌａ 分子的光破坏敏感性影响不大,但β－胡萝卜素在加入ＤＰＱ 之后可以被光照破坏,这个过程可能与β－胡萝卜素的生理功能相关。     

RGDS肽对大鼠主动脉球囊内膜剥脱后血管壁增殖的影响

在大鼠主动脉球囊内膜剥脱术后血管壁细胞过度增殖模型上,用合成的血小板膜纤维蛋白原受体（ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎⅡｂ／Ⅲａｃｏｍｐｌｅｘ,ＧＰⅡｂ／Ⅲａ）拮抗剂ＲＧＤＳ（Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ－Ｓｅｒ,５０μｍｏｌ·ｋｇ－１·ｄ－１）治疗可有效地抑制损伤血管壁的细胞计数增加和内膜增厚以及血管平滑肌细胞增殖,显著降低其血管组织３Ｈ－ＴｄＲ和３Ｈ－Ｌｅｕ的参入增加程度。实验结果提示ＲＧＤＳ肽作为血管成型术的辅佐剂,对于防治血管再狭窄可能具有潜在的临床应用前景。     

天花粉蛋白与FMP复合物的晶体结构

用浸泡法得到了天花粉蛋白（ＴＣＳ）与ＦＭＰ复合物的晶体,在ＳＩＭＥＮＮＳＸ－２００Ｂ面探测器系统上收集了一套２．０分辨率的Ｘ射线衍射数据。用同晶差值傅立叶法解析了复合物的结构,经Ｘ—ＰＬＯＲ程序修正得到了ＴＣＳ—ＦＭＰ复合物的分子结构并找出了１９７个水分子,最后的Ｒ因子为０．１７２,键长和键角的ＲＭＳ偏差分别为０．０１５和２．９２２度。ＴＣＳ—ＦＭＰ复合物中,ＦＭＰ与天花粉蛋白分子有较好的结合,其结合位置正处于根据三维结构和突变体信息推测的Ｎ一糖苷酶活性口袋之中。它的类嘌呤环夹在Ｙ７０和Ｙ１１１两个侧链环之间,与Ｙ７０环近乎平行,其Ｎ７和Ｎ６分别与ＴＣＳ分子的Ｇ１０９４羰基氧和Ｉ７１的Ｎ成氢键,Ｎ３靠近Ｒ１６３的侧链,其磷酸根则伸向活性口袋的底部,与Ｅ１８９、Ｅ１６０和Ｒ１６３等残基作用。     

不同年龄大鼠主动脉壁凝集素组织化学的图像分析研究

本文利用凝集素组织化学的方法,结合应用ＩＢＡＳ图像分析系统对不同年龄（１０天,６个月及２年）大鼠主动脉壁的凝集素受体进行研究。在所采用的六种生物素化凝集素中（ＣｏｎＡ、ＲＣＡＩ、ＵＥＡ－Ｉ、ＰＮＡ、ＳＢＡ及ＷＧＡ）,ＣｏｎＡ、ＲＣＡ－Ｉ及ＷＧＡ在大鼠主动脉壁呈阳性反应,它们在各年龄组大鼠主动脉壁内膜及外膜均表现出强阳性反应,而在中膜反应较弱。ＵＥＡ－Ｉ、ＰＮＡ和ＳＢＡ表现出无明显反应。此外,三种阳性反应凝集素在主动脉壁的反应产物随增龄而减少,图像分析结果显示其灰度值随增龄的变化趋势是逐渐增加。上述结果提示,大鼠主动脉壁含α－Ｄ－Ｍａｎｎｏｓｅ、β－ＤＧａｌａｃｔｏｓｅ、ｓｉａｌｉｃａｃｉｄ或Ｎ－ａｃｅｔｙｌ－Ｄ－Ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ残基的糖复合物含量随增龄而减少,可能使ＬＤＬ易于通透而致脂质在动脉壁沉积,加速脂纹病变的形成,从而易于导致动脉粥样硬化。     

苏芸金杆菌MS07A的Cry Ⅰ基因在大肠杆菌中的克隆及表达

分离了苏芸金杆菌库斯塔克变种MS07A(Bacillus thuringiensis var.kurstaki MS07A)的质粒,经HindⅢ酶解、凝胶电泳和Southern转移后,用DIGdUTP标记的质粒pES1的EcoR Ⅰ—F片段作探针进行DNA分子杂交,发现5.3、6.6和7kb左右的DNA片段含Cry Ⅰ基因。用Glass milk合并回收这些片段,克隆到pUC18的HindⅢ位点上并转化大肠杆菌JM109。通过菌落原位杂交、重组质粒的限制性消解等分析方法,选出带有Cry Ⅰ基因并能在大肠杆菌中表达其毒蛋白的转化子。初步生物测定结果表明。转化子TM48和TM76对松毛虫和菜青虫有毒杀活性。