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991.
庚型肝炎病毒包膜糖蛋白E2基因在昆虫细胞中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
用PCR扩增出HGV E2全基因,克隆进杆状病毒表达载体pFASTBACHTa中,构建成重组转座载体pFASTBAC-E2,转化DH10BAC大肠杆菌感受态细胞,筛选阳性菌落,抽提大分子质粒DNA,获得含HGV E2基因的重组杆状病毒穿梭载体,转染昆虫草地夜蛾Sf9细胞,出现细胞病变后,收集含有重组病毒颗粒的培养上清,重新感染草地夜蛾Sf9单层细胞及甜菜夜蛾幼虫,分别收集Sf9细胞和甜菜夜蛾幼虫体内的血淋巴细胞,进行12%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,可见表达的融合蛋白带,经亲和层析进行蛋白纯化,用ELISA方法检测各类血清标本,初步研究HGV E2糖蛋白的抗原性. 相似文献
992.
以含有P19和cyt1A基因的以色列亚种72MD质粒的9
7kb HindⅢ片段为模板进行PCR扩增,分别获得P19基因和cyt1A基因片段。与表达
载体pUHE24连接转化大肠杆菌XL1,获得3个克隆株。LZ19含有P19基因;pLZcyt1A含
有cyt1A基因;LZ19A含有P19和cyt1A两个基因。利用cyt1A蛋白质可使大肠杆菌细胞致
死的特性,在IPTG诱导下,测定了各克隆基因表达对大肠杆菌有致死作用;pLZ19A对大肠杆菌的起始致死作用明显快于pLZcyt1A,这种现象可能是P19基因促进cyt1A基因高表达的结果。 相似文献
993.
棕色固氮菌nifZ与固氮酶钼铁蛋白P—cluster合成的关系 总被引:4,自引:2,他引:2
与野生型固氮菌(OP)MoFe蛋白相比,缺失nifZ的棕色固氮菌(AzotobactervinelandiiLipann)突变种的△nifZMoFe蛋白对乙炔的还原活性和Fe/Mo比值都显著降低。在相同实验条件下从这两种MoFe蛋白中抽提出的FeMoco在催化活性和金属组成方面都很相似,而这两种蛋白的圆二色(CD)谱则有显著差异,除在540-750nm外,△nifZMoFe蛋白在可见光区域380-540nm的△ε明显降低并在430nm附近处出现一个奇特的尖负峰;而在紫外区域的208nm和222nm负峰的高度却明显增加。△nifZMoFe蛋白可在合适浓度的PEG8000和MgCl2溶液中结晶出来,而晶体大小和出现沉淀多少与上述CD谱的负峰有关。这表明:棕色固氮菌nifZ与MoFe蛋白P-cluster的合成有关,并由此影响蛋白质的构象、稳定性和结晶过程。 相似文献
994.
采用高效液相色谱(HPLC)的分析方法,对菠菜(SpinaciaoleraceaMill.)叶绿体PSⅡ反应中心光破坏过程进行了研究,结果表明:(1)在本实验条件下,45min的光照处理,可以使PSⅡ反应中心的光化学活性基本接近丢失。(2)从光照约20min开始至约40min,Chla的含量逐渐减少到原有含量的2/3左右,然后浓度保持不变至约60min此后,Chla的含量出现了第二次下降,到80m 相似文献
995.
丹皮多糖PSM2b的纯化及其理化性质研究 总被引:8,自引:1,他引:7
从中药丹皮(MoutanCortex)蒸馏水浸提液得到粗多糖,经DEAE Cellulose 52柱层析分离得到降血糖组分PSM2b,Surperdex200柱层析进一步纯化得到PSM2b A和PSM2b B两个组分,快速层析纯化系统(FPLC)和电泳鉴定为均一的多糖蛋白复合物。FPLC法测定A和B两组分的分子量分别为1.16×105、1.30×104,苯酚 硫酸法测得其总糖含量分别为76.91%、32.00%,Folin 酚法测得其蛋白含量分别为9.90%、42.60%。气相色谱分析PSM2b A的单糖组成为:L 鼠李糖、L 岩藻糖、L 阿拉伯糖、D 木糖、D 甘露糖、D 葡萄糖、D 半乳糖,摩尔比依次为1.00∶0.18∶4.30∶0.50∶1.30∶2.41∶6.97,PSM2b B的单糖组成为:L 鼠李糖、L 岩藻糖、L 阿拉伯糖、D 葡萄糖、D 半乳糖,摩尔比依次为1.00∶1.17∶0.183∶2.34∶4.18。两者的红外光谱呈现多糖吸收特征峰,含有吡喃糖苷键。β消去反应初步证明所提取的两种糖蛋白不存在O 型糖肽键。 相似文献
996.
应用噬菌体展示技术筛选人巨细胞病毒糖蛋白M新的中和抗原表位 总被引:1,自引:0,他引:1
人巨细胞病毒(HCMV)糖蛋白复合物Ⅱ包括两种蛋白,即糖蛋白M(gM)和糖蛋白N(gN).尽管来自于HCMV阳性病人血清中的糖蛋白复合物Ⅱ的IgG抗体能够中和HCMV粒子,但迄今为止,还没有gM中和性抗原表位的相关研究.应用消减杂交技术,通过噬菌体肽库筛选获得gM抗原的一个表位,即MAD.MAD氨基酸序列与gM第32~38位序列高度同源.将MAD与钥孔血蓝蛋白偶联免疫小鼠可产生抗MAD多抗,该多抗不仅结合天然HCMV病毒粒子,而且特异结合重组表达的gM30~78多肽.ELISA结果表明MAD能够特异结合HCMV阳性的病人血清.病毒中和实验结果进一步证明抗MAD多抗能够抑制HCMV AD169株病毒感染人胚肺细胞.总之,MAD表位有可能成为HCMV病毒疫苗潜在的保护性抗原. 相似文献
997.
999.
家兔第四脑室注射P物质对肺动脉压和颈动脉压的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本工作将P物质(SP)注入麻醉家兔第四脑室,观察其对肺动脉压和颈动脉压的影响。结果观察到:(1)脑室注射SP后,肺动脉压升高或降低,颈动脉压上升,心率减慢。(2)切断肺动脉压下降组家兔的两侧颈部迷走神经,再ivt.SP,则引起肺动脉压的升高,降心率反应则明显减弱。(3)预先用酚妥拉明或α_1受体阻断剂哌唑嗪均可阻断SP引起的肺动脉和颈动脉升压反应。(4)α_2受体阻断剂育亨宾或纳洛酮均可增强这二个升压反应。(5)心得安对这二个升压反应无明显影响。(6)SP的心血管效应可被SP受体拮抗剂[D-pro~2.D-Trp~(7.9)]-SP阻断。 实验结果表明:脑中SP升高可通过SP受体引起肺动脉压和颈动脉压上升,心率减慢;在SP引起的加压反应的中枢环节中有肾上腺素能α_1受体活动参与;中枢肾上腺素能α_2受体系统和内啡肽系统对传递SP中枢加压作用的路径有抑制性的调制作用。看来,SP与儿茶酚胺及阿片样物质一起参与脑干对血压的调节。 相似文献
1000.