帕金森病研究进展

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种多发于中老年期的,以黑质多巴胺能神经元选择性变性为主要病理改变的神经系统退行性疾病。目前,对该病的病因和发病机制还不清楚,尚未建立特异的、灵敏的预警和早期诊断体系以及确切有效的神经保护和治疗的方法。PD的发病与人口老龄化密切相关,随着我国老龄化社会的到来,PD发病率不断增加,给社会和经济都带来严重的危害,因此,越来越受到国家和政府的关注。本世纪以来,科技部先后设立"神经变性病的机制和防治的基础研究"以及"帕金森病发病机制及防治策略的研究"两个973计划项目,以求系统、深入研究PD的病因,神经元选择性、进行性变性死亡的关键机制以及寻找能延缓或阻断疾病的药物等防治新策略,期望推动我国的PD研究,为建立PD防治的新理论、新策略和新技术等奠定扎实的基础。对这两个973项目PD研究团队的主要原创性工作进行综述。     

中药Ⅰ号方对APP/PS1双转基因模型小鼠APP代谢的影响

目的研究中药I号方对APP/PS1双转基因模型小鼠APP代谢的影响。方法将5月龄APP/PS1双转基因模型小鼠随机分为模型组（vehicle）、中药Ⅰ号方低剂量组（0.6 g/kg）、中剂量组（1.2 g/kg）和高剂量组（2.4 g/kg）,并以同窝阴性小鼠作为正常对照组（wild-type,WT）,每组16只,雌雄各半。给药小鼠每天灌胃一次,模型组和正常对照组分别给予等体积的双蒸水灌胃。给药四个月后,用免疫组化和Western blot检测淀粉样前体蛋白（APP）及其代谢产物和分解酶的变化。结果 Western blot结果显示,与模型组相比,治疗组低剂量、中剂量和高剂量给药组能显著降低APP分解酶（ADAM10和BACE1）（P〈0.01）及APP的分解产物的量,如：β-CTF（C99）、α-CTF（C83）、s APPα、s APPβ（P〈0.01）。结论中药I号方通过影响APP的分解过程减少淀粉样蛋白（β-amyloid peptide,Aβ）的生成,减少脑内老年斑的沉积。     

人源多巴脱羧酶的表达、纯化以及高通量抑制剂筛选模型的建立

帕金森病是一种常见的神经系统退行性疾病。多巴脱羧酶（DDC）是帕金森病研究的靶点蛋白之一,但是目前没有高通量的测活模型。因此,需要构建一种高通量多巴脱羧酶抑制剂的筛选模型,用于发现新型抑制剂。采用克隆表达纯化得到多巴脱羧酶和用于酶偶联反应的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）。基于一系列酶联反应将CO2固定,检测其含量,从而测定多巴脱羧酶的活性。结果得到人源多巴脱羧酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的体外纯酶,建立了一种高通量筛选模型,并且从70个天然化合物中,筛选得到2个多巴脱羧酶的抑制剂。成功构建了一种基于体外纯酶高通量多巴脱羧酶抑制剂的筛选模型。     

Apathy in Parkinson disease

Apathy is one of the least investigated symptom of Parkinson disease （PD）. In the article there are data of frequency, diagnostic features, pathophysiology and treatment of apathy in PD. The aim of the investigation was to evaluate the frequency of apathy in PD without dementia, evaluate the relationship with other neuropsychiatric and motor disorders, influence on the life quality. 115 patients （age-63.84±0.6 years, stage 2.6±0.3） with PD without dementia were included in the investigation. There were used the following scales： scale of evaluation stages of PD by Hoehn-Yahr, UPDRS （part 〈〈activity of daily living〉〉, 〈〈motor functions 〉〉）; Beck Depression Inventory, Spielberger State Trait Anxiety Inventory, Parkinson Disease Sleep Scale- PDSS, Epworth Sleepiness Scale, Parkinson Fatigue Scale-PFS- 16, SCOPA-Cog, Lilli Apathy Rating Scale LARS and Apathy Scale AS. Apathy was found in 25% of patients. The frequency and severity of apathy does not depend on stage and duration of PD. It was found positive correlation of apathy and hypokinesia. In different stages of PD there was variability of relationships of apathy with depression, executive functions and sleep disorders. We suppose the heterogeneity of apathy in PD because of the variability of the association with other neuropsychiatric （affective, cognitive, sleep） disorders. It was found the negative influence of apathy on daily activity, emotional and social aspects of life quality.     

右美托咪定复合地佐辛静脉镇痛对老年腹腔镜胆囊切除术后患者认知功能、氧化应激及炎性因子的影响

摘要 目的：探讨右美托咪定复合地佐辛静脉镇痛对老年腹腔镜胆囊切除术后患者认知功能、氧化应激及炎性因子的影响。方法：前瞻性选择2017年4月至2019年12月于我院拟行腹腔镜胆囊切除术的老年患者103例,采用随机数字表法将患者分为A、B两组。A组51例,给予舒芬太尼镇痛,B组52例,给予右美托咪定复合地佐辛静脉镇痛。对比两组不良反应,镇静、镇痛效果、认知功能、氧化应激及炎性因子。结果：B组术后12 h、24 h、48 h视觉模拟评分法（VAS）评分低于A组（P<0.05）,B组术后12 h、24 h、48 h Ramsay 镇静评分高于A组（P<0.05）。B组术后1 d、术后3 d、术后5 d简易智能量表（MMSE）评分均高于A组（P<0.05）,B组认知功能障碍（POCD）发生率低于A组（P<0.05）。B组术后3 d、术后5 d丙二醛（MDA）低于A组,总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）高于A组（P<0.05）。B组术后3 d、术后5 d白介素-6（IL-6）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）低于A组（P<0.05）。对比两组不良反应无差异（P>0.05）。结论：与舒芬太尼相比,在地佐辛静脉镇痛基础上,加以右美托咪定,可在腹腔镜胆囊切除术后老年患者中取得较好镇痛镇静效果,可减轻其认知功能损害、氧化应激及炎性反应,且安全可靠。     

APP/PS1小鼠中PEG-PLA纳米粒的表面蛋白冠组成及其脑内递送的实验研究

摘要 目的：研究阿尔茨海默病（Alzhemer''s disease,AD）模型鼠中聚乙二醇聚乳酸（poly(ethylene glycol)-poly(l-lactide),PEG-PLA）纳米粒表面蛋白冠组成及其对脑内递送特性的影响。方法：制备PEG-PLA纳米粒,测定纳米粒的zeta电位及粒径,采用透射电子显微镜观察纳米粒形态。通过双光子显微镜观察APP/PS1小鼠与野生型（Wild Type,WT）小鼠脑内PEG-PLA纳米粒分布特性。采用液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术对PEG-PLA纳米粒分别与APP/PS1小鼠和WT小鼠血浆孵育形成的两种不同蛋白冠进行蛋白组学分析。结果：制备的PEG-PLA纳米粒粒径均一,分散性较好。静脉注射PEG-PLA后,APP/PS1小鼠脑内纳米粒量明显高于WT小鼠。蛋白质组学结果显示,APP/PS1小鼠血浆孵育组PEG-PLA纳米粒表面蛋白冠中凝聚素（Clusterin）明显高于WT小鼠血浆孵育组,该蛋白与纳米粒逃避机体清除有关。此外,纳米粒蛋白冠中血管性血友病因子（Von Willebrand factor）、玻连蛋白（Vitronectin）、肌球蛋白重链-9（Myosin-9）等参与细胞粘附作用相关蛋白在APP/PS1小鼠血浆孵育组也明显多于WT小鼠血浆孵育组。结论：PEG-PLA纳米粒在AD模型小鼠中表现出的高入脑量,可能与AD疾病影响纳米粒蛋白冠组成有关。     

阿尔茨海默病的病因及遗传与病理学分析

阿尔茨海默病的真正成因至今仍然不明,医学界普遍认为阿尔茨海默病病患主要是在大脑中发现有Tau蛋白以及类淀粉样蛋白(Amyloid)堆积,并且认为这两种蛋白质可能是造成阿尔茨海默病的病变原因.本研究综述了迄今为止最为流行的几个不同的假说,遗传与基因以及病理学,试图解释阿尔茨海默病的病因及其分子机理,为预防、治疗和护理阿尔茨海默病提供参考.     

SIRT2抑制对MPP+诱导的帕金森病细胞模型凋亡和线粒体动态平衡的影响*

探究siRNA敲减沉默信息调节因子2(SIRT2)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP⁺)诱导的帕金森病细胞模型细胞损伤的影响和机制。CCK-8法检测不同浓度MPP⁺处理对体外培养小鼠海马神经元HT-22细胞生存率的影响。将细胞分为对照组、MPP⁺最佳浓度处理组(1 mmol/L MPP⁺处理组)、阴性转染组(对照组基础上转染SIRT2阴性序列)、SIRT2 siRNA处理组(损伤组基础上转染SIRT2 siRNA)。观察各组细胞凋亡情况,检测凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Caspase-9)、线粒体分裂及融合相关蛋白(Drp1、Fis1、OPA1、Mfn1、Mfn2)。与对照组相比,MPP⁺处理组细胞抑制率均升高,细胞抑制率随MPP⁺浓度增加而逐渐增加(P<0.05)。与SIRT2 siRNA转染组相比,损伤组Bax、Caspase-9、Drp1、Fis1蛋白表达和细胞凋亡率升高,Bcl-2、Mfn1、Mfn2蛋白表达降低(P<0.05)。SIRT2在MPP⁺诱导帕金森病细胞模型中表达升高,抑制SIRT2可减轻MPP⁺诱导帕金森病细胞模型中细胞凋亡并促进线粒体融合,从而对神经元具有一定的保护作用。     

谷胱甘肽促进液体发酵体系中蛹虫草合成虫草素

虫草素是药用真菌蛹虫草Cordyceps militaris的主要活性成分,具有抗癌、抗肿瘤、抗病毒等多种生理活性。研究表明,氧化应激参与丝状真菌的次级代谢调控,然而在蛹虫草虫草素代谢中尚未见报道。本研究以蛹虫草深层液体发酵体系为研究对象,添加谷胱甘肽（glutathione,GSH）调节细胞氧化还原状态,考察其对虫草素代谢的影响。添加3.0g/L GSH,发酵20d虫草素产量达到(439.69±12.43)mg/L,较无添加对照组提高471.24%,同时谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GPX）活力提高414.82%;基因表达分析显示,添加GSH后虫草素生物合成关键基因Cns1和Cns2表达显著上调,发酵第15天其表达量分别是对照组的540.67倍和25.81倍。研究结果初步证实,氧化应激参与蛹虫草中虫草素代谢调控。     

地佐辛联合小剂量右美托咪定辅助全身麻醉对功能性鼻内镜鼻窦手术患者氧化应激水平和炎性因子的影响

目的:观察地佐辛联合小剂量右美托咪定辅助全身麻醉对功能性鼻内镜鼻窦手术患者氧化应激水平和炎性因子的影响。方法:选取2013年6月到2018年6月期间于我院接受功能性鼻内镜鼻窦手术的患者130例,根据信封抽签法将患者分为对照组(n=65,单纯全身麻醉)和实验组(n=65,地佐辛联合小剂量右美托咪定辅助全身麻醉),对比两组血流动力学、氧化应激和炎性因子水平,记录两组苏醒期躁动情况及呛咳发生率。结果:两组插管前(T1)~拔管后5 min(T4)心率(HR)、平均动脉压(MAP)呈升高后降低趋势,血氧饱和度(SpO2)呈降低后升高趋势(P<0.05),且实验组HR、MAP低于对照组,SpO2高于对照组(P<0.05)。两组术后1d、术后3d超氧化物歧化酶(SOD)较术前升高,且实验组高于对照组(P<0.05);丙二醛(MDA)较术前降低,且实验组低于对照组(P<0.05)。两组术后1d、术后3d白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)呈降低趋势,且实验组低于对照组(P<0.05)。两组拔管时~拔管后10 min Riker镇静躁动评分(SAS)评分呈降低趋势,且实验组低于对照组(P<0.05)。实验组的呛咳发生率较对照组低(P<0.05)。结论:地佐辛联合小剂量右美托咪定辅助全身麻醉用于功能性鼻内镜鼻窦手术患者,减少苏醒期躁动,预防呛咳发生,使血流动力学维持平稳,减轻机体氧化应激反应和炎性应激反应。