应用孔氏葡萄球菌制作生态剂可能性的探索

从安全性和有效性等方面进行孔氏菌球菌能否作为生态菌制成生态制剂的探索,选用一级昆明系统小鼠６４只,采用浓度为５．５＊１０＾８／ｍｌ的孔氏葡萄球菌液经腹腔,静脉和烧伤创面三种途径接种在动物体内,观察动物死亡率和内脏器官细菌播散情况;     

我院医务人员手部葡萄球菌携带调查及增多原因分析

目的调查我院医务人员手部葡萄球菌携带情况,查明其增多原因。方法将医务人员手部携带的部分金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌做了“８４”消毒剂定性杀菌试验、ＭＩＣ检测、β－内酰胺酶、耐甲氧西林检测,抗菌药物耐药谱、质粒酶切谱分型。结果发现我院医务人员手部金黄葡萄球菌、葡萄球菌携带率已分别从１９９２年的８７０％（１０／１１５）、３２１７％（３７／１１５）上升至１９９７年的３４０６％（７８／２２９）、６５９４％（１５１／２２９）,且７７９７％的菌株为ＭＲＳＡ（或ＭＲＣＮＳ）,各科室之间无同源菌株。全部试验菌株在“８４”消毒剂有效氯的含量为１００ｐｐｍ浓度时,１分钟内可将其全部杀灭。结论我院医务人员手部葡萄球菌及金黄色葡萄球菌逐年上升的因素为：①长时间使用“８４”消毒剂,导致了部分菌株对“８４”消毒剂敏感性降低;②医务人员不常洗手;③采用“８４”消毒剂洗手致手部粗糙,难以洗净。     

MRSA和MRCNS院内分布调查

对１６３７ 人（ 件） 次医、护人员手及护理工作台和病房床头桌进行了金黄色葡萄球菌（ＳＡ） 、凝固酶阴性葡萄球菌（ＣＮＳ） 、耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌（ ＭＲＳＡ） 及耐甲氧苯青霉素凝固酶阴性葡萄球菌（ ＭＲＣＮＳ） 的分布调查。结果表明,四种标本上ＳＡ 携带率分别为４．５ ％ 、３．１ ％ 、３．０ ％ 和６．１ ％ ;ＣＮＳ 携带率分别是３１．３ ％ 、３７．７ ％ 、３７．６ ％ 和４３．４ ％ 。而四种标本上ＭＲＳＡ 占检出ＳＡ 的百分率分别是２６．２ ％ 、２４．３ ％ 、２３．０ ％ 、３１．８ ％ ;ＭＲＣＮＳ占检出ＣＮＳ的百分率分别是２８．１ ％ 、２７．６ ％ 、２２．０ ％ 、３４．８ ％ 。所检出的ＭＲＳＡ 和ＭＲＣＮＳ对１４ 种抗生素的耐药性较ＳＡ 和ＣＮＳ都高。鉴于ＭＲＳＡ 和ＭＲＣＮＳ在医院环境中的分布,注意医护人员手及工作环境的清洁和消毒,是切断该类菌交叉感染的有效途径。     

溶葡球菌酶高效表达与应用

溶葡球菌酶(lysostaphin,Lys)是采用基因克隆技术使溶葡球菌酶基因实现外源表达所产生的蛋白质。它是Zn2+依赖的金属蛋白酶,具有肽链内切酶活性,能专一性地水解葡萄球菌细胞壁Gly五肽桥联,使金黄色葡萄球菌(特别是MRSA)细胞壁破裂,达到溶菌杀菌作用,而不产生耐药性。作为一种抗菌剂,在兽药与临床等领域具有巨大的应用潜力。综述对溶葡球菌酶的来源、作用机制、不同表达系统及前景与展望进行综述。     

警惕抗药性致病菌

致病菌当中金葡菌即金黄色葡萄球菌（Staphylococus aureus）系一种对机体有潜在威胁的G^＋致病源,最常见的感染源,其中90％以上的变种具有抗青霉素能力。有些致病菌对强力抗生素如万古霉素产生抗药性,这是在医院获得性感染的主要原因,已发现获得性抗药性基因如tn1546可以从另一种抗药性细菌如粪肠球菌中跳跃进入金葡菌中,这种交叉感染获得性抗药性有更大的危险性。     

葡萄糖类似物甲基葡萄糖对表皮葡萄球菌生物被膜形成的影响及调节机制的研究

生物被膜(Biofilm)是条件致病菌表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)的主要致病因素,生物被膜的形成依赖多糖PIA的合成,PIA合成与细菌糖代谢相关。通过研究葡萄糖类似物甲基葡萄糖(MethylDglucoside,MG)对生物被膜的形成及相关基因表达的影响,考察生物被膜形成的调控机制并寻找抑制生物被膜形成的方法。甲基葡萄糖能抑制97337株生物被膜的形成,而且不同浓度的甲基葡萄糖对生物膜作用不同。甲基葡萄糖对97337株生物被膜形成的早期的粘附有较强的抑制作用;不同浓度的甲基葡萄糖处理后对ica和AtlE基因的mRNA表达水平影响不大,但能诱导agr基因的表达,这与甲基葡萄糖处理不同时间后的结果一致;而且甲基葡萄糖处理后97337的表面相关蛋白的组成明显改变。甲基葡萄糖对生物膜的抑制并不直接由于它对生长的抑制,它对细菌生长和生物被膜形成的抑制与其在细菌糖代谢中的竞争性相关;甲基葡萄糖能通过调控agr基因的表达改变细菌表面从而抑制97337的早期粘附和生物被膜的形成,但没有通过调控icaADBC、icaR的表达抑制生物膜的形成,可能与其对合成PIA相关糖基转移酶的竞争性抑制相关。     

破菌时可自动降解宿主核酸的大肠杆菌BL21(DE3)的lpxM突变株构建

研究利用Red同源重组技术对常用大肠杆菌表达宿主菌BL21(DE3)进行改良, 构建破菌时可自动降解宿主核酸的大肠杆菌表达宿主菌, 该菌株可望有助于解决因破菌时宿主菌染色体核酸释放给后续纯化重组蛋白工作带来的困难。将N端连有OmpA的信号肽的S. aureus nucleaseB(nucB)表达框整合至E. coli BL21(DE3)的lpxM位点, 改造后菌株(称为BLN)经诱导能表达nucB、并分泌至周质空间, 这样可使宿主核酸免受该酶“毒性”影响, 菌体裂解后, nucB释放,能自动降解宿主核酸。BLN菌体生长状态以及表达外源重组蛋白的能力与出发菌基本一致。     

几种鳞毛蕨科药用蕨类植物的抑菌特性分析

研究了6种鳞毛蕨科药用蕨类植物的不同浸提液对几种常见微生物生长的影响情况,结果表明它们普遍表现了很好的抑菌效果,其中对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑制效果最好,最大的抑菌率达到90.4%;通过对鳞毛蕨科3个属的抑菌作用比较,耳蕨属(Polystichum)的普遍抑菌作用占优势;从浸提方法上看,醇提取的方法并不比水提取的方法有明显的优势.     

不同分子量壳聚糖对五种常见茵的抑制作用研究

体外抑菌法研究了六种不同相对分子量的壳聚糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌、变形杆菌的抑菌活性,并对壳聚糖的抑菌机理做了探讨.     

金黄色葡萄球菌肠毒素A Asp227Ala基因的克隆及表达

目的：金黄色葡萄球菌肠毒素A Asp227ala基因的克隆及表达。方法：利用错配PCR方法,从含有金黄色葡萄球菌肠毒素A（Staphylococcal enterotoxn A,SEA)基因的质粒中扩增出约720bp的DNA片段,将其克隆到表达载体7ZTS中,并转化于JM109（DE3）。结果：重组质粒的测序结果表明,它含有702bp（不包括N端72bp的信号肽编码区）,其核苷酸序列与文献报道完全一致,推导的氨基酸序列显示227位的天冬氨酸已突变为丙氨酸。结论：该基因所表达的蛋白为可溶性蛋白,表达量占总蛋白51.5%。表达的蛋白与天然肠毒素A产生的抗体能发生凝集作用,具有与天然SEA类同的抗原活性。