《昆虫知识》2009年第46卷第3期要目预告

科技前沿 昆虫葡萄糖氧化酶及其功能…胡永红等 蜜蜂及熊蜂微孢子虫rRNA基因研究进展…陈文锋等     

葡萄糖氧化酶产生菌Z—l—C的分批发酵与恒化培养

本文对葡萄糖氧化酶产生菌z—I—c的分批发酵与恒化培养进行了研究。实验发现,在以葡萄糖为生长限制性基质的恒化培养中,该产生菌的维持系数为O．04 g葡萄糖／g菌体．H,生长得率系数Y^max_G=O．714 g菌体／g葡萄糖,最大比生长速率μmax=O．385h^-1,饱和常数Ks=4．76g/L,理论最适稀释度Dm=0．260h^-1,最大酶比活(E／x)max为2．16×10³μ／mg,其值较分批发酵的最大酶比活(1．5l×10³μ／mg)提高43％。当向恒化培养的补料培养基中添加0．02％的α-甲基-D-葡萄糖时,由于该葡萄糖结构类似物的诱导作用,可使(E／x)max达3．11×10³μ／mg,较分批发酵之值提高106％。     

固定化原生质体生产葡萄糖氧化酶*

用溶壁酶处理对数生长前期的黑曲霉GP 024细胞,分离得到原生质体,再用光交联树脂包埋制备固定化原生质体,用于生产葡萄糖氧化酶。其胞外葡萄糖氧化酶的比产率几乎达到相应的游离细胞生产的胞内和胞外全部葡萄糖氧化酶的比产率。用光交联树脂制备的固定化黑曲霉细胞的产酶特性与游离细胞相似,而用溶壁酶处理过的固定化细胞的产酶特性与固定化原生质体相似。     

葡萄糖氧化酶解除黄曲霉毒素 B1应用研究

黄曲霉毒素是由真菌产生的一类剧毒物质,含黄曲霉毒素B1的饲料对小鸡的危害很大。研究中发现,用5％o25U／g（25U／mL）葡萄糖氧化酶完全可以解除饲料中500ppb浓度黄曲霉毒素B1的毒性。用含2000ppb浓度黄曲霉毒素B1和添加5‰ 25U／g葡萄糖氧化酶的饲料喂小鸡,相比对照组,实验组存活数量提高39．5％,在小鸡饮用水中加入5％e25U／mL葡萄糖氧化酶,存活数量可提高28．5％。     

葡萄糖氧化酶产生菌的诱变育种及发酵工艺优化

文章为优化葡萄糖氧化酶产生菌的诱变育种和发酵工艺，将桔青霉CICC 40277作为生产菌株，通过对固、液培养基中菌种的生长和产酶活力进行比较，选取木薯叶为培养基质，经固体培养活化后，菌株的产酶活力最高达到66.48 U/g。然后采用2-脱氧-D-葡萄糖为菌株抑制剂，以甲基红为指示剂设计了一种高效、简便的筛选方法。通过紫外诱变育种，最终筛选得到一株高产菌株Uv-7，其产酶活力达到79.76 U/g，比原始菌株提高了20%。采用单因素试验对Uv-7菌株产葡萄糖氧化酶的最佳菌种活化条件进行优化，得到最适条件为：培养时间144 h、培养温度30℃、接种量20%(V/V)；最适培养基组分为：以5.5 g木薯叶为固体基质，按照1∶1(W/V)的固液比添加盐溶液(g/L):MgSO₄·7H₂O 0.5、Na₂HPO₄ 2.0、KCl 0.3、CaCO₃ 3.0、葡萄糖30、酵母粉6，当pH为6.0时，菌株经活化后产葡萄糖氧化酶的活性提高到了101.52 U/g，与原始菌株相比提高了52.7%...     

从土壤中快速筛选葡萄糖氧化酶产生菌及发酵工艺的优化

目的:从土壤中筛选葡萄糖氧化酶产生菌,并通过对其产酶特性研究及工艺优化提高其产酶量,为下一步育种工作打下良好基础。方法:采用Fiedure K.J.显色法从土壤样品中分离葡萄糖氧化酶产生菌,通过均匀设计等方法对培养基和发酵条件进行优化。结果:获得一株葡萄糖氧化酶产生菌L7。经优化后的培养基成分(g.L-1)为:葡萄糖60,蔗糖40,蛋白胨6,NaNO37,KH2PO40.5,Mg2SO4.7H2O1.1,KCl0.8,CaCO33.5。最适发酵条件为发酵温度26℃,消前pH值6.0,摇床转速250r.min-1,发酵周期3d。结论:从土壤中筛选到一株葡萄糖氧化酶产生菌L7,经过条件优化后酶活可达到2.56μmol.min-1。