髓样细胞触发性受体-1基础研究与临床应用

髓样细胞触发性受体-1（triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1）是表达于中性粒细胞、单核细胞与巨噬细胞表面的免疫球蛋白家族胞膜受体。有研究显示,TREM-1能够放大模式识别受体介导的炎性反应,在全身炎性反应综合征（SIRS）中发挥重要作用。TREM．1在慢性炎性活动期、恶性肿瘤等病理过程中也有不同程度上凋。以TREM-1为靶点的靶向药物有望对上述疾病治疗产生重大影响。同时,游离型TREM-1（soluble TREM-1,sTREM-1）可作为判断多种疾病预后的重要指标。     

复方清下汤对脓毒症大鼠细胞因子调控及其肺损伤的作用

目的盲肠结扎穿孔导致大肠埃希菌腹膜炎进而建立脓毒症肺损伤大鼠模型,检测炎性反应时,细胞因子的调控变化,探讨肺水肿的形成机制。经复方清下汤处理后检测上述变化,以期为脓毒症肺损伤的防治提出可能的新途径。方法将健康SD大鼠随机分为4组,每组10只：假手术组（SHAM组）,只翻动盲肠,不做其他处理;脓毒症肺损伤组（模型组）,盲肠结扎穿孔诱发AL（急性肺损伤）I模型;盲肠结扎穿孔＋复方清下汤组（造模后立即灌胃给药,造模后8 h再次灌胃1次,剂量为10 m l/kg）;盲肠结扎穿孔＋头孢哌酮/舒巴坦组（抗生素舒普深）（造模后立即静脉注射1次,造模后8 h再次静脉注射1次,剂量为0.2 g/kg）造模24 h后收集标本。分别观察大鼠的一般状态,肺组织匀浆MPO的测定,留取下腔静脉血清进行TNF-α的测定。镜下观察肺组织病理形态学改变,测量肺湿/干比值的变化。结果与SHAM组比较,模型组MPO、TNF-α水平明显升高（P〈0.01）,肺间质和肺泡内水肿,伴大量红细胞渗出（出血）和纤维素沉积,肺泡间隔毛细血管内皮细胞高度肿胀。肺湿/干比值明显增加（P〈0.01）,抗生素及中药处理组与模型组比较,MPO、TNF-α水平明显降低（P〈0.01）,肺湿/干比值明显降低（P〈0.01）,肺组织镜下表现：中药处理组及抗生素组较模型组肺泡间隔变窄,毛细血管内皮细胞肿胀减轻,出血减轻,纤维素渗出明显减少。结论脓毒症大鼠肺损伤时细胞因子TNF-α过度表达,炎性介质的过度表达可能是造成脓毒症肺损伤的重要原因,而复方清下汤可以减轻脓毒症时的肺损伤和抑制TNF-α的表达,它们之间可能存在一定的联系。     

脓毒症患者血清炎症因子与SOFA评分的关系研究

目的:探究脓毒症患者血清炎症因子与序贯器官衰竭评估(SOFA)评分的关系,从而有助于评价患者病情严重程度,科学判断预后效果。方法:选择2014年1月至2015年12月期间在本院内接受治疗的脓毒血症患者142例作为研究对象。入院后24 h内患者进行血清炎症因子IL-6、PCT、CRP水平测定,同时进行SOFA评分。按照患者在入院治疗28天内生存结局状况进行分组,分别为死亡组(87例)和存活组(55例),另按照患者合并多器官功能障碍综合症(MODS)与否,分为MODS组(76例)和非MODS组(66例),对比不同组别间IL-6、PCT、CRP及SOFA评分差别;对比不同SOFA评分患者血清IL-6、PCT、CRP水平差异,分析其相关性。结果:IL-6、PCT以及SOFA评分比较,死亡组高于存活组,MODS组高于非MODS组,差异有统计学意义(P0.05);SOFA评分越高,血清IL-6、PCT水平越高,差异有统计学意义(P0.05);SOFA评分升高,患者病死率显著增加,SOFA10分,病死率为78.3%,差异有统计学意义(P0.05);Spearman相关分析结果显示,SOFA评分与血清IL-6水平呈显著正相关关系(r=0.261,P=0.012),与血清PCT水平呈正相关关系(r=0.453,P=0.000),SOFA与CRP水平无相关性(r=0.112,P=0.323)。结论:血清IL-6、PCT水平与SOFA评分具有相关性,可以在脓毒症患者病情严重程度及预后状况判断中作为生物学指标进行常规监测。     

血必净注射液治疗脓毒症凝血功能障碍的研究进展

<正>脓毒症是宿主对感染反应失调而产生的、威胁生命的器官功能损害,是全球范围内重症患者死亡的首要原因,病死率居高不下。目前,对其发病机制、病理生理改变及诊断策略仍在不断探讨,宿主对感染的炎症反应,可能最终被认为是机体抵御微生物入侵的一种保护机制~([1])。炎症和凝血紊乱密不可分地联系在一起,两者互为激活对方的正反馈因子。凝血异常在脓毒症患者中几乎普遍存在,越来越多研究     

抗内毒素Fab’对严重烧伤早期肠源性内毒素血症小鼠NO、MDA与iNOS的影响及意义

目的：观察抗内毒素Fab’对严重烧伤早期肠源性内毒素血症小鼠肠组织中NO、iNOS、MDA水平的影响,探索防治烧伤脓毒症的新措施。方法：采用严重烧伤早期肠源性内毒素血症小鼠模型,分为烧伤组、治疗组及对照组,分别于6、12、24、48h4个时相点测定肠组织中NO、iNOS、MDA的浓度：结果：烧伤后肠组织中NO、iNOS、MDA水平均比正常对照组显著增高;治疗组肠组织中NO、iNOS、MDA水平较烧伤组显著降低。结论：抗内毒素Fab’能减轻内毒素对机体的损害,从而起到对严重烧伤早期肠源性脓毒症的防治作用。     

生物喋呤的生物学效应及其在脓毒症中的意义

研究表明,一氧化氮（ＮＯ）的过度产生可能是诱发脓毒性休克的最后共同通路,而生物喋呤为一氧化氮合酶（ＮＯＳ）重要的辅因子。多种免疫刺激因子均可诱导细胞内ＢＨ４合成显著增加,其可瑟ＮＯＳ紧密结合,调控ＮＯ的合成与释放。本文讨论了ＢＨ４的生物学效应,调控机制及其在脓毒症中的作用,并简要介绍其合成抑制剂在脓毒症防治中的潜在意义。     

miR-135b-5p抑制脓毒症引起的小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制*

目的: 探究miR-135b-5p在小鼠脓毒症(sepsis)引起的急性肺损伤(ALI)模型中的表达水平及其对小鼠肺部炎症反应和细胞焦亡的影响。方法: 将C57BL/6小鼠随机分为6组,每组8只,通过盲肠结扎穿刺法(CLP)手术构建CLP诱导的脓毒症小鼠模型:腹腔注射0.1 mg/kg的巴比妥麻醉,腹部纵向切开暴露盲肠,结扎盲肠并用注射器针头进行穿孔,挤出部分肠道内容物后缝合伤口。假手术组(Sham组)开腹后不做任何处理缝合伤口,无CLP手术处理。治疗组分为CLP+NC mimic组,CLP+miR-135b-5p mimic组,CLP+NC mimic+empty vector组,CLP+消皮素D (GSDMD)组,CLP+miR-135b-5p mimic+GSDMD组。治疗组小鼠在CLP手术前一周皮下注射200 μl溶解于生理盐水的NC mimic(200 nmol/L),miR-135b-5p mimic(200 nmol/L),empty vector(100 nmol/L),GSDMD vector(100 nmol/L),每天注射1次,连续一周。术后24 h采用二氧化碳窒息法实施安乐死。采用qRT-PCR检测小鼠肺组织样本中miR-135b-5p和GSDMD mRNA的表达水平;苏木精-伊红(HE)染色检测小鼠肺组织形态和损伤状态;采用5 ml生理盐水冲洗小鼠右肺3次,每次持续约3~5 min,收集肺泡灌洗液(BALF),酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中GSDMD、白介素1β(IL-1β)和白介素18(IL-18)的表达水平;蛋白免疫印迹法检测小鼠肺组织内含NLR家族PYRIN域蛋白3(NLRP3),半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase 1)以及切割后的N-端GSDMD端蛋白结构域(cleaved-GSDMD-N)的表达水平。双荧光素酶报告基因检测系统验证miR-135b-5p与GSDMD的靶向结合关系。结果: 与对照组相比,CLP组小鼠肺组织中有大量的炎症细胞浸润,肺泡损伤,细胞间质水肿及肺泡塌陷等病理特征,小鼠肺组织内细胞焦亡相关蛋白(NLRP3,caspase-1和GSDMD)的表达水平明显增加(P<0.01),但miR-135b-5p的表达水平明显下调(P<0.01);与CLP组相比,超表达miR-135b-5p能够明显抑制CLP诱导的小鼠肺组织内细胞焦亡(P<0.01),靶向抑制GSDMD的表达水平(P<0.01);超表达GSDMD能够逆转超表达miR-135b-5p对肺组织细胞焦亡的抑制作用(P<0.01),超表达miR-135b-5p能够通过靶向GSDMD抑制小鼠BALF中IL-1β及IL-18的表达水平(P<0.01)。结论: miR-135b-5p靶向下调GSDMD抑制细胞焦亡,改善脓毒症引起的ALI,为脓毒症诱导的ALI治疗提供了潜在的治疗靶点和理论依据。     

脓毒症患者短期预后的影响因素及YAP联合STAT3检测的预测价值研究

摘要 目的：研究脓毒症患者短期预后的影响因素及Yes相关蛋白（YAP）联合信号转导子和转录激活子3（STAT3） 信使RNA（mRNA）检测的预测价值。方法：选择我院2019年3月～2021年1月收治的131例脓毒症患者,将其按照28d预后情况的差异分成死亡组以及生存组。比较两组各项基线资料,外周血单个核细胞YAP、STAT3 mRNA表达水平。采用多因素Logistic回归分析脓毒症患者短期预后的影响因素。此外,通过受试者工作特征（ROC）曲线分析外周血单个核细胞YAP、STAT3 mRNA表达预测脓毒症患者短期预后的效能。结果：死亡组患者的外周血单个核细胞YAP、STAT3 mRNA相对表达量均高于生存组患者（P＜0.05）。死亡组年龄大于生存组,住院时间短于生存组,APACHEⅡ评分高于生存组,合并基础疾病、机械通气的患者比例高于生存组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄、APACHEⅡ评分、合并基础疾病、机械通气以及外周血单个核细胞YAP、STAT3 mRNA表达水平是脓毒症患者短期预后的影响因素（P＜0.05）。外周血单个核细胞YAP、STAT3 mRNA联合检测预测脓毒症患者短期预后的曲线下面积为0.845,高于两指标单独检测的0.623、0.687。结论：脓毒症患者短期预后的影响因素包括年龄、APACHEⅡ评分、机械通气以及合并基础疾病等,联合检测外周血单个核细胞YAP、STAT3 mRNA表达对脓毒症患者短期预后具有一定预测价值。     

和厚朴酚通过激活SIRT1/FOXO1信号通路抵抗小鼠脓毒症脑损伤

目的:探究和厚朴酚是否通过激活SIRT1/FOXO1信号通路抵抗小鼠脓毒症脑损伤。方法:通过C57BL/6小鼠盲肠结扎穿孔法建立脓毒症脑损伤模型。小鼠随机分为以下6组:假手术(Sham)组;和厚朴酚处理(HKL)组;盲肠结扎穿孔(CLP)组;盲肠结扎穿孔+和厚朴酚处理(CLP+HKL)组;EX527 (SIRT1特异性抑制剂)预处理+盲肠结扎穿孔+和厚朴酚处理(CLP+HKL+EX527)组;EX527预处理+盲肠结扎穿孔(CLP+EX527)组。盲肠结扎穿孔48 h后检测脑组织内水含量、凋亡率及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和cleaved Caspase-3的表达情况、炎症相关分子IL-1β与TNF-α、SIRT1信号通路相关蛋白表达情况。结果:与CLP组相比,CLP+HKL组脑组织内SIRT1的表达量及活性、Bcl-2表达量明显增加,而脑组织水含量、凋亡率、Bax、cleaved Caspase-3、IL-1β与TNF-α的表达量明显降低(均P 0.05)。EX527可明显抑制HKL的上述脑保护作用(P 0.05)。结论:和厚朴酚主要通过激活SIRT1/FOXO1信号通路,抑制凋亡与炎症,从而缓解脓毒症脑损伤。     

血必净注射液联合持续血液净化治疗重症脓毒症的效果及对血清IL-6、TNF-alpha的影响

目的：研究血必净注射液联合持续血液净化治疗重症脓毒症的效果及对血清白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-alpha（TNF-alpha）的 影响。方法：将2012 年1 月至2013 年12 月我院收治124 例重症脓毒症患者随机分为治疗组和对照组,每组62 例。对照组给予 常规抗感染、对症支持、脏器保护治疗,治疗组在此基础上加用血必净注射液联合持续血液净化治疗。于治疗前及治疗第7 天记 录并比较两组患者多器官功能障碍（MODS）发生率、脓毒症休克率、死亡率、好转率、氧合指数（动脉血氧分压（PaO2）/ 吸入氧浓度 （FiO2））、血清IL-6、TNF-alpha水平以及急性生理和慢性健康评分Ⅱ（APACHE Ⅱ）。结果：经7 天治疗后,两组MODS 发生率、IL-6、 TNF-alpha水平以及APACHE Ⅱ评分较治疗前均显著降低,PaO2 /FiO2水平较治疗前显著提高（均P＜0.05）;治疗组脓毒症休克率较 治疗前显著降低（P＜0.05）;治疗组MODS 发生率、脓毒症休克率、死亡率、IL-6、TNF-琢水平以及APACHE Ⅱ评分均显著低于对 照组,好转率以及PaO2 /FiO2水平显著高于对照组（均P＜0.05）。结论：血必净注射液联合持续血液净化治疗重症脓毒症能维护多 器官功能、降低MODS及脓毒症休克发生率,提高动脉血气氧合指数等疗效。