胃激素调节肽与Ⅱ型糖尿病相关因素的研究概况

胃激素调节肽(ghrelin,也称:胃生长激素释放激素、生长激素释放肽)是新发现的一种肽类激素,除具有促生长激素分泌外,还参与促进食欲、增加食量、减少能量消耗和促使脂肪积聚,从而导致体重增加,身体肥胖。另外,还与胰岛素、抵抗素、脂联素、瘦蛋白(leptin)及能量代谢密切相关,并可诱发胰岛素抵抗(IR)等。假以时日,随着胃激素调节肽研究的深入,有可能为Ⅱ型糖尿病发病机制的探讨、预防和诊治领域的研究开辟新途径。     

CCK-C受体与肿瘤

自从Smith等在1999年报道在胰腺癌中发现一种新型缩胆囊肽(cholecystokinin,CCK)受体(即CCK-C受体)以来,关于其结构及功能的研究已经引起广泛的兴趣。近几年相继有报道在多种癌组织中发现这种CCK-C受体,并明确了CCK-C受体是一种保留了第四内含子的CCK-B受体的变异体。研究还揭示了许多CCK-C受体的新特性,并发现其产生是由于癌细胞中低水平的U2AF35剪接因子造成的。由于CCK-C受体表现出与恶性肿瘤的密切关系,故目前研究的热点已经移向探求CCK-C受体的表达对肿瘤发生及生长的影响及其机制,并期望以此发现一种诊断及治疗多种恶性肿瘤的有力工具。     

用噬菌体随机肽库筛选SARS冠状病毒S蛋白单克隆抗体2C5的模拟表位

SARS-CoVS蛋白特异的单克隆抗体2C5具有病毒中和作用。以单克隆抗体2C5为筛选靶分子,筛选噬菌体展示随机7肽库。经三轮淘洗后随机挑选20个噬菌体克隆进行ELISA分析和序列测定。在10个ELISAOD值大于0.2的阳性噬菌体克隆中,有8个噬菌体克隆展示有共同的7肽序列TPEQQFT。展示有该序列的噬菌体克隆能竞争抑制SARS-CoVS蛋白抗原与单抗2C5的结合。结果表明TPEQQFT为单克隆抗体2C5的模拟表位。该结果可对进一步研究S蛋白结构与功能和设计SARS疫苗有一定的参考意义。     

一种特异性识别小细胞肺癌细胞的小分子肽

应用“一个珠子一个化合物”的组合化学肽库技术,筛选得到特异性识别小细胞肺癌细胞(DMS53)的小分子肽.初次筛选共得到32个与DMS53阳性结合的珠子,经氨基酸序列分析后发现,含有cNGRXXXc或cXNGRXXc肽链结构的序列共有10个.再次合成三种有代表性的小分子肽,发现cFNGRQQc与DMS53的结合率明显高于其他小分子肽.选择cFNGRQQc作进一步的细胞特异性研究,发现cFNGRQQc与DMS53的粘附特异性明显高于其他细胞系,对cFNGRQQc的结构分析显示,-NGR-及六肽长度对小分子肽与DMS53细胞的粘附非常重要.用抗整合素、E-cadherin、NCAM及ICAM的抗体或多肽阻断小分子肽与DMS53细胞表面的相应受体结合,未见明显的阻断效应.小分子肽与DMS53细胞表面的结合位点有待于进一步证实.     

圆柏属常绿木本植物叶片抗氧化系统季节变化与抗冷冻的关系

测定分析圆柏属2种常绿木本植物叶抗氧化系统在冷冻适应过程中的季节变化。结果表明,叶能在组织结冰状况下生存与其具备完善的抗氧化保护系统有关,该系统能及时清除氧自由基、抑制膜脂过氧化、维持膜的完整性;冷适应期积累的活性氧可能诱导了抗氧化保护系统使叶片获得抗冻性。祁连圆柏的抗氧化系统比圆柏在抗冻性诱导中具有更广泛的适应策略。     

血管钠肽对大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞Ca2+激活K+通道的作用

目的研究血管钠肽(VNP)对大鼠肠系膜动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)Ca2+激活K+通道(Kca)的作用及其机制.方法采用全细胞膜片钳技术观察VNP对Kca的影响,以及HS-142-1、8-Br-cGMP和美蓝(MB)在这一过程中的作用.结果①VNP(10-6 mol/L)显著增强Kca(P＜0.05,n=5).②8-Br-CGMP(10-3mol/L)模拟VNP增强Kca的作用(P＜0.05,n=6).③HS-142-1(2×10-5mol/L)或MB(10-5mol/L)完全阻断VNP增加Kca电流密度的作用.结论VNP通过作用于VSMCs的钠尿肽GC耦联受体,升高细胞内的cGMP水平,激活Kca.     

乳铁蛋白肽基因的合成及其在动物乳腺中的表达

根据已发表的编码牛乳铁蛋白肽(LfcinB)25个氨基酸的mRNA序列,设计了4条用于合成牛乳铁蛋白肽全基因的引物,用重叠延伸PCR法合成149 bp的牛乳铁蛋白肽基因(包括牛乳铁蛋白信号肽序列、上下游酶切位点和终止密码子),并将此基因克隆到载体pI-B,获得了乳腺特异性表达质粒pI-BL,该质粒经生理盐水稀释后直接注入稳定泌乳期奶山羊和奶牛乳腺组织(注射量为400μg),以琼脂板溶圈法检测奶样抑菌活性。结果显示,注射后3~48 h,奶样有明显抑菌活性,其中3~9 h抑菌活性最高。     

噬菌体展示随机十肽库的构建及抗WSSV单链抗体A1的模拟抗原表位的淘选和鉴定

本实验以pCANTAB5E噬菌粒为载体,成功构建了较高容量的噬菌体展示随机十肽库,并将其应用于抗原模拟表位的淘选和鉴定。将一种特异识别对虾白斑综合症病毒(Whitespotsyndromevirus,WSSV)的单链抗体A1对十肽库和十五肽库分别进行淘选,结果得到一系列能与单链抗体A1特异性结合的阳性克隆。将这些阳性克隆所编码的多肽氨基酸序列与已知的单链抗体A1的抗原WSSV388片段氨基酸序列做比对,发现多数阳性多肽序列都与WSSV388片段序列的C端一处K????R??R?QS的氨基酸片段相似,由此推论单链抗体A1的模拟抗原表位可能是由该不连续氨基酸片段所构成的构象表位,而非线性表位。研究结果表明,噬菌体展示随机肽库技术是一种用于研究抗原表位结构的有效方法,有助于进一步探讨WSSV的结构蛋白的构象及功能,以及相应单链抗体与细胞受体相互作用的机理。     

机遇与挑战

半个世纪以来,戚正武院士从事活性肽及酶蛋白的研究,取得了科研和育人的丰硕成果。这篇科学回忆,以感人的笔法记述了他的实感真情,他还以已故的曹天钦院士的治学精神培养学生,再三强调“先道德后文章,先团队后个人,重奉献后名利,重创新轻浮躁”的崇高思想值得弘扬。在科研的生涯中,他战胜了多次的挑战,现在他还以“著名神经科学家张香桐院士的话——老牛自知近黄昏,不用挥鞭自奋蹄——以自律”的执着追求精神给人以鼓舞和力量。     

产脂酵母产脂培养条件研究及脂肪检测方法初探

目的：研究产脂酵母产脂条件及脂肪提取方法。方法：探讨了单因素如：pH、碳源、氮源、葡萄糖浓度、金属微量元素等对其产脂能力的影响,并进行了正交试验;脂肪测定方法研究,用对比分析法,并对其中的方法加以改进,采用光谱扫描以确定酵母脂肪最大吸收波长。结果：试验范围所得酵母产脂最佳条件是：接种量3%,MnCl_2 0．05%、FesO_4 0．04%、(NH_4)_2SO_4 0．3%、葡萄糖2%、pH 6．5,培养5d,45ml的发酵液其油脂的吸光度(252nm)可达2．4082;酵母脂肪最大吸收波长为252nm,在此波长下测定,获得了快速、准确的结果。结论：所得产脂条件可为进一步的开发研究打下基础。研究出的酵母脂肪测定方法,是一种快速、简便的方法,可满足产脂酵母菌种筛选和产脂条件研究的需要。