鸡胚胎原始生殖细胞体外培养

以14-15期鸡胚血液为材料,采用Ficoll密度梯度离心方法,提取鸡胚胎原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs),在无基质细胞和基质细胞上分别进行体外培养。从实验结果可以看出：在含有胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、鸡血清(chicken serum,CS)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、人胰岛素样生长因子(hIGF-1)、小鼠白血病抑制因子(mLIF)和青,链霉素双抗的M199培养液中培养时,鸡PGCs最多能够存活4天：当采用细胞因子和5天鸡胚胎性腺基质细胞共培养时能存活23代且每代细胞增殖可达近10倍。提纯后的PGCs细胞冻存复苏后,经台盼蓝染色鉴定存活率可达80％左右。     

苹果新品种"昌红"的离体培养与规模化快速繁殖

1植物名称苹果(Malus pumila Mill.)新品种"昌红"(图1). 2材料类别茎尖. 3培养条件以MS为基本培养基.(1)启动培养基:MS 6-BA 2.0 mg·L-1 (单位下同) NAA 0.5 3%蔗糖;(2)增殖培养基:MS 6-BA 1.5 NAA 0.05 3%白砂糖;(3)生根培养基:1/2MS IBA 0.7 IAA0.2 2%白砂糖.以上培养基均加入6 g·L-1 琼脂,pH 5.8,在121℃、0.11MPa灭菌20 min.培养温度25～27℃,光照12 h·d-1,光照度2 000 lx.     

粉葛的离体培养和无糖生根

1植物名称粉葛(Pueraria thomsonii Benth),又名甘葛藤. 2材料类别幼嫩的茎段、茎尖. 3培养条件丛芽诱导培养基:(1)MS 6-BA 0.2mg·L-1(单位下同) NAA 0.2;(2)MS 6-BA 0.5 NAA 0.2;(3)MS 6-BA 1.0 NAA 0.2.继代增殖培养基:(4)MS 6-BA 0.3 NAA 0.3;(5)MS 6-BA0.6 NAA 0.3.无糖生根培养基:(6)MS大量元素 NAA 0.2.粉葛的生根利用箱式无糖培养专利技术[1]进行,基质为蛭石,在培养基中不添加糖分,以C O2作为碳源,培养箱中C O2浓度为0.1%～0.12%,空气流速为2 L·min-1,光照度为5 000lx.在丛芽诱导和继代阶段,培养基中的糖浓度均为3.0%,琼脂的用量为6.0 g·L-1,pH 5.6～5.8.培养温度24～26℃,光照时间10～12 h·d-1,光照度1 500～2000 lx.     

藓羽藻的组织培养和快速繁殖

1植物名称藓羽藻(Bryopsis hypnoides). 2材料类别叶状体片段. 3培养条件培养基均为高压灭菌的天然海水,内含0.1mol·L-1NaNO3和0.1 mol·L-1NH3H2PO4.诱导分化的条件为:温度18℃,光照度15 μmol·m-2·s-1,光照时间12 h·d-1.移植后的培养条件为:温度18℃,光照强度20～50μmol·m-2·s-1,光照时间8 h·d-1.     

黑果枸杞的组织培养

1植物名称黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.). 2材料类别带腋芽的嫩茎段. 3培养条件诱导分化培养基:(1)MS 6-BA 1.0mg·L-1(单位下同) NAA 0.2,(2)MS 6-BA 0.5 NAA0.2;芽增殖培养基:(3)MS 6-BA 0.5 NAA 0.1(4)MS 6-BA 0.5 NA 0.2;生根培养基为:(5)1/2MS NAA 0.1.以上诱导分化及增殖培养基均加2.5%蔗糖和0.8%琼脂,生根培养基的蔗糖和琼脂量减半,pH 5.8～6.0.培养温度为23～25℃,光照时间10～12 h·d-1,光照度为2000 1x.     

火焰兰的种子培养和试管育苗

1植物名称火焰兰(Renanthera CoCCinea). 2材料类别种子. 3培养条件种子萌发培养基:(1)VW;(2)VW 100 mL·L-1椰子乳;(3)KC;(4)KC 100 mL·L-1椰子乳(5)1/2MS;(6)MS.生根育苗培养基:(7)3 g·L-1花宝1号(美国Haponex公司产品,N:P:K=7:6:19) 2 g·L-1蛋白胨 2 g·L-1活性炭 0.5 mg·L-1NAA 0.2 mg·L-16-BA;(8)1 g·L-1花宝1号 1 g·L-1花宝2号(N:P:K=20:20:20) 2 g·L-1蛋白胨 2 g·L-1活性炭 0.5 mg·L-1NAA 0.2 mg·L-16-BA.以上培养基均附加1.5%蔗糖、0.6%琼脂,pH 5.2～5.4.培养温度为(25±2)℃,光照度1 500～2000lx,光照时间12 h·d-1.     

番木瓜组织培养中玻璃化苗的发生与预防

本文对番木瓜(Caricapapaya L.)组培过程中玻璃化苗的发生和预防初步进行了研究.以番木瓜品种"穗中红"为实验材料,实验处理有:(1)琼脂浓度(5、7、9、11 g·L-1);(2)分化培养基中6-BA浓度(0.5、1.0、2.0 mg·L-1);(3)培养基的水源(去离子水和自来水);(4)外植体培养代数(第5、10、15、20、25代);(5)培养基中加活性炭(0和0.3%).实验采用单因子对比实验,每个处理分化芽数为39株,每瓶3株,重复3次.取第7代的番木瓜芽为实验材料,以MS为基本培养基(pH5.7),培养1个月后,观察和统计玻璃化苗情况.培养条件为(27±2)℃,光照12 h·d-1,光照度为35μmol·m-2·s-1.得到如下结果(表1):     

植物生长调节剂在彩色马蹄莲组培与快繁中的生理效应

马蹄莲(Zantedeschia aethiopica Spreng)红色和黄色品种的幼嫩叶片在自来水下冲洗2 h,0.1%HgCl2 2%乙醇溶液浸泡5～7 min,无菌水冲洗4～5遍,剪成0.5 cm的方块,接种在MS KT5 mg·L-1(单位下同) 6-BA 1.0 3%白糖 0.4%琼脂的培养基上.     

半蒴苣苔的组织培养和快速繁殖

1植物名称半蒴苣苔(Hemiboea subcapitata). 2材料类别幼叶. 3培养条件(1)诱导不定芽分化培养基:MS 6-BA 0.1 mg·L-1(单位下同) NAA 0.1;(2)生根培养基:1/2MS 0.5%活性炭.以上培养基均加入3.0%蔗糖和0.7%琼脂,培养基灭菌前pH 5.8.培养室室温为(25±2)℃.光照12 h·d-1,光照度2 000lx左右.     

紫雪花的组织培养与快速繁殖

1植物名称紫雪花(Plumbago indica). 2材料类别叶片. 3培养条件(1)愈伤组织诱导培养基:MS 6-BA1 mg·L-1(单位下同) IBA 1;(2)增殖培养基:MS 6-BA3 IBA 0.1;(3)生根培养基:改良的White(1/2硝酸钙) IBA 0.1.以上培养基均加入30 g·L-1蔗糖和6 g·L-1琼脂,pH 5.8～6.0.培养温度26～28℃,环境湿度70%～80%,光照度1 200～1 500 lx,光照时间8 h·d-1.