以CB—F83—Oligo（dT）—纤维素批量亲和层析分离poly（A）RNA

Poly(A)RNA分离是反向转录cDNA,构建cDNA文库以及进行差异杂交等的基础工作,也是改善RNA凝胶吸Ep和S_1核酸酶保护实验质量的基本措施。Poly(A)RNA的分离主要采用Oligo(dT)-纤维素柱亲和层析的方法。我们在非洲爪赡卵母细胞及早期胚胎Poly(A)RNA的分离过程中,先后使用了Poly(A)Quick Column(Stratagene产品)和 Oligo(dT)Cellulose,Type 7(pharmacia产品)柱亲和层析以及CB-F 83-Oligo(dT)-纤     

抑菌试验用于测定T-2毒素

本文从镰刀菌中提取T-2毒素,对不同的酵母菌进行抑菌试验,结果证明红酵母属(Rho-dotorula)的三个种,即红酵母(R.glutrnis)、深红酵母(R.ruber)和小红酵母(R.minuta)对T-2毒素最敏感,被定为测毒敏感菌。将抑菌试验与家兔皮肤反应试验、豌豆发芽抑制试验进行对比,结果有部分重合,但不能相互取代。由于抑菌试验具有快速、简便、准确的优点,可做为测定T-2毒素的方法之一。     

Ames试验中菌落呈色计数法的探讨

本实验利用氯化三苯四氮唑(TTC)使革兰氏阴性菌显色的原理,在平板法Ames试验中,添加TTC浓度为lmg/皿时,使测试菌株(鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型株TA97、TA98、TA100、TA102)呈为红色。试验证明TTC本身无诱变性,亦不干扰阳性物(2-AF)的诱变性。菌落呈色后便于菌落计数,并在一定程度上提高试验结果的准确性。     

昆虫胆碱酯酶测定方法综述

<正> 胆碱酯酶(Cholinesterase,ChE)可以分成两类:一类是乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE),又称真胆碱酯酶;另一类是丁酰胆碱酯酶(Butyrylcholinesterase,BuChE),又称假胆碱酯酶。在昆虫中主要是AChE,因此这里介绍的测定方法主要是针对AChE。昆虫的AChE测定方法很多,主要有测压法、测pH法、比色法(分光光度法)、荧光法、同位素法和电化学法等。以下就一些常用的方法作一简单介绍。     

一种新的病毒空斑技术

本文报道了一种不同于Dulbecco细胞单层法和Cooper琼脂细胞悬浮法的病毒空斑技术——速成单层法病毒空斑试验。用24孔细胞培养板,不经预先制备细胞单层,将Vero细胞和水泡性口炎病毒Indiana株同时加入培养孔内,使细胞在贴壁的同时被病毒吸附,继后在营养凝胶下,细胞形成单层的同时病毒产生空斑。结果表明,此法简单快速,稳定可靠,经济节约,方便易行。用于单纯疱疹病毒分型的鸡胚细胞空斑形成试验,亦获得满意结果。     

马流产杆菌脂多糖终止小白鼠妊娠的初步研究

参照酚—水法从马流产杆菌中提取出脂多糖,其纯度达到参考标准品的要求。用它对早、中和晚期妊娠小鼠进行腹腔或尾静脉注射,每只小鼠(体重25—30克)注射剂量在5—30μg均能产生终止妊娠的效果,有效率达93—100%。每只注射剂量25和25μg以下的妊娠小鼠全部存活,无明显毒性反应,而30μg剂量的8只小鼠中有2只死亡。     

DNA操作技术领域里的两种新工具酶

ＤＮＡ操作技术领域里的两种新工具酶张显亮（中国科学院国家基因研究中心，上海２００２３３）关键词Ⅰ－内切酶超多位点内切酶（ｈｙｐｅｒｆｒｅｑｕｅｎｔｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅ）序列专一的ＤＮＡ双链内切酶是ＤＮＡ重组领域必不可少的工具之一。应用最普遍的是来...     

过表达IL-12调节单核系肿瘤细胞向巨噬细胞分化

构建过表达白细胞介素-12（interleukin-12,IL-12）的THP-1单核系肿瘤细胞模型,从形态学、巨噬细胞表面标志表达水平及吞噬功能3方面探究过表达IL—12能否调节单核系肿瘤细胞向巨噬细胞分化。结果发现,与空白和空载组相比,IL-12组的THP．1细胞界限不明显,散在细胞增多;呈圆形或不规则圆形,偶见毛刺状突起;核仁模糊或消失,核染色质条索状浓集;CD68mRNA和蛋白表达量均升高俨〈0．05）。与空白组相比,CDllbmRNA和蛋白表达量升高不明显俨〉O．05）,但72hCD11b蛋白表达量明显高于相同培养条件下的空载组（P〈O．05）。培养72h后各组细胞吞噬能力比较,IL-12组吞噬率（36．7±1．2）％高于空白组（15．7±3．1）％和空载组（28．O±1．5）％,差异有统计学意义（P〈0．05）。上述结果提示,过表达IL-12可以促进单核系肿瘤细胞向巨噬细胞分化。     

水稻籽粒发育过程中各器官镉积累量的变化及其与基因型和土壤镉水平的关系

以镉（Cd）积累潜力不同的2个籼稻品种为材料,研究了籽粒发育过程中各器官中Cd含量的动态变化及其与土壤中Cd含量的关系。结果表明,在含Cd的生长环境中,水稻根系中的Cd含量在整个生育期中保持稳定增长的趋势,而茎叶、穗轴和稻壳等器官在营养生长阶段积累了大量的Cd,然后在籽粒充实过程中向外输出,其中旗叶和稻壳中的Cd输出率在50%以上,明显高于其他营养器官。根系和叶片中的Cd含量与土壤中的Cd含量呈高度线性相关,茎秆和籽粒中的Cd含量与土壤中的Cd含量呈抛物线相关,说明根系、茎秆、叶片等营养器官对Cd有储存和“过滤”作用。低积累品种‘X24’穗轴中的Cd含量明显低于高积累品种‘T705’,说明营养器官中的Cd向籽粒中转运的速率是决定籽粒中Cd积累量的关键因素。但是,只有当土壤中的Cd含量为0.3~1.2 mg＆#183;kg-1时,低积累品种精米中的Cd含量才会显著低于高积累品种;当土壤中的Cd含量高于2.4 mg＆#183;kg-1时,2个品种精米中的Cd含量没有显著差异。     

紫花苜蓿对铜胁迫生理响应的傅里叶变换红外光谱法研究

为阐明紫花苜蓿(Medicago sativa L.)对铜胁迫的耐性机理,采用准确度好、分辨率高和简便快捷的傅里叶变换红外光谱法(FTIR)研究在不同铜浓度(0、1、5、20、100 mol/L)处理时紫花苜蓿根、茎、叶化学组分的变化。结果表明:随着铜处理浓度的增加,紫花苜蓿根、茎、叶生物量变化不大。其根组织在2924 cm~(-1)处峰高处呈现出先下降后上升的趋势,反映了在低铜(5 mol/L)处理条件下紫花苜蓿分泌的有机酸不断螯合Cu,造成羧酸0-H的减少,但随着Cu含量的升高,其羧酸螯合力变弱,有机酸含量渐渐升高;根组织在1381 cm~(-1)处峰高先下降后上升,反映了含油脂化合物含量先下降后升高。可能与植物在细胞壁结构上增强抗逆性有一定关系,即低Cu处理下细胞壁可能通过提高阳离子交换能力(CEC),增强了耐Cu性;茎组织在2924,1643,1381,1064 cm~(-1)等处峰高无明显变化;叶组织所有峰值在低浓度(5 mol/L)Cu处理下变化不明显,高浓度(5 moL/L)Cu处理下所有峰值先升后降,随着这可能与可溶性糖及可溶性蛋白质等物质含量都呈现先升后降的趋势有关。这表明紫花苜蓿通过根部有机酸含量的变化和提高细胞壁阳离子交换能力,将吸收的Cu大部分积累在根部,阻止Cu向地上部分运输,有效地保护了植物地上部分组织。