人肾上腺基因表达谱的建立及其功能的新认识

为深入理解人类肾上腺（AD）的功能,构建了正常人肾上腺cDNA文库,并利用大规模表达序列标签（ESTs）测序和生物信息学技术,研究显示参与基因/蛋白表达的基因类型表达最多,其次为能量代谢类.肾上腺中表达丰度最高的3个基因均为参与类固醇合成的酶类和蛋白.一些重要的基因首次显示在肾上腺表达,包括神经激素和神经肽,如促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）,黑色素浓激素（MCH）,urocortin,可卡因和安非他明调节肽（CART）和垂体腺苷酸环化酶激活肽（PACAP）;许多重要介质的受体,如细胞因子、神经肽及神经递质受体;参与胆固醇代谢的基因,如LDL受体、HDL结合蛋白和胆固醇合成酶.研究结果表明在肾上腺表达丰度最高的基因与该器官的功能特异性有关,除类固醇激素外,许多神经肽、细胞因子在肾上腺产生,肾上腺与体内其他重要的系统间存在广泛的应答,而且在人肾上腺局部可能存在一个CRH-ACTH-皮质醇调节网络.     

冷暴露长爪沙鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴对产热的调节

为探讨下丘脑 -垂体 -肾上腺轴在野生小哺乳动物产热中的调节作用 ,对正常及肾上腺去除的长爪沙鼠进行了冷暴露研究。正常雄性长爪沙鼠在急性冷暴露 ( 4± 1℃ ,1天 )条件下 ,下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素的合成和释放没有显著变化 ,肾上腺皮质酮含量增加 4 5 8% ,差异显著 ,血清皮质酮水平有增加趋势 ;慢性冷暴露 ( 4± 1℃ ,3周 )后 ,肾上腺皮质酮含量增加到对照的 2 14倍 ,血清皮质酮含量维持较高水平。肾上腺去除的长爪沙鼠冷暴露 3周后 ,褐色脂肪组织 (BAT)产热 (细胞色素C氧化酶活力、线粒体GTP结合数量 )增加 ,下丘脑促甲状腺激素释放激素的合成和释放、血清三碘甲腺原氨酸水平以及血清去甲肾上腺素的浓度均有增加的趋势。表明冷暴露条件下长爪沙鼠肾上腺皮质酮的合成和释放增加 ,从而抑制BAT的产热 ,皮质酮对BAT产热的抑制部分是通过抑制下丘脑 -垂体 -甲状腺轴激素的合成和分泌以及抑制交感神经系统的活动而实现的。     

肾上腺糖皮质激素样品的采集及测定方法

肾上腺糖皮质激素是肾上腺皮质分泌的一类类固醇激素 ,对动物的生长发育起重要作用。任何一种非特异性刺激都会引起动物的应激反应 ,从而使糖皮质激素释放比正常状态下高 2～ 3倍。由于肾上腺糖皮质激素分布于有机体全身各处 ,取样容易 ,测定方便 ,所以体内肾上腺糖皮质激素的含量已成为动物肾上腺功能和应激反应研究中广泛采用的指标。常见的糖皮质激素有 4种 :皮质醇 (氢化可的松 )、11-脱氢皮质醇 (可的松 )、皮质酮和 11-脱氢皮质酮。皮质醇是灵长类、豚鼠和鱼类的主要糖皮质激素。皮质酮是大鼠、小鼠、兔、鸟类和蛇分泌的主要糖皮质激…     

哺乳动物冷应激的主要神经内分泌反应

为便于了解哺乳动物冷应激生理变化的调节机理,介绍了冷应激的主要神经内分泌反应。控制冷应激反应的主要中枢位于下丘脑。冷应激激活交感神经系统,激活下丘脑－垂体－甲状腺轴和下丘脑－垂体－肾上腺轴激素的合成和分泌,引起肾上腺髓质儿茶酚胺分泌增加;同时抑制促生长激素轴、促性腺轴、催乳激素轴的激素分泌。神经肽Y、瘦素、褪黑激素等多种神经肽和激素参与冷应激反应。     

人肾上腺髓质素原N端20肽受体——MrgX2的分离鉴定

肾上腺髓质素原N端20肽[proadrenomedullin N-terminal 20 peptide,PAMP（1～20）/PAMP-20]及其类似物PAMPl2（二者均来源于肾上腺髓质素前体肽prepro-adrenomedullin,prepro-ADM）,是具有舒张血管、降低血压效应的内源性多肽,其降压效应通过抑制交感神经末梢和肾上腺嗜铬细胞分泌儿茶酚胺而实现。     

食物单宁酸对根田鼠(Microtus oeconomus)钠平衡的作用

验证了单宁酸能引起植食性哺乳动物钠平衡的假设.在两种食物蛋白质水平条件下,测定了摄食含0%,3%和6%单宁酸食物的根田鼠的钠平衡和肾上腺肾小球的大小.结果表明,食物单宁酸能显著影响根田鼠的钠平衡,钠的丢失主要通过尿液.同时,单宁酸能显著影响试验个体的肾上腺肾小球的体积.初步研究显示,植食性哺乳动物对摄入的植物次生化合物的解毒引起机体钠平衡失调,而非植物次生化合物的消化抑制作用所致.     

乙酰胆碱洗脱后所致离体兔心的正性肌力作用

目的:乙酰胆碱(ACh)灌注并迅速洗脱后所致离体兔心正性肌力作用(心肌收缩力的反跳)的规律及其机制的初步研究.方法:采用Langendorff离体心脏灌流技术,观察对照组与实验组在给予ACh并洗脱后的心肌收缩力变化.结果:10-8～10-3 mol/L浓度的ACh所致心肌收缩力的最大反跳率分别为2.20%±1.70%、6.71%±3.40%、9.18%±3.54%、14.16%±3.27%、4.37%±5.86%、1.03%±6.86%;肾上腺素组的最大反跳率为29.25%±5.83%,普萘洛尔组最大反跳率为5.15%±4.45%,二者与对照组同浓度ACh(10-5mol/L)相比,均有显著统计学差异(P<0.05);维拉帕米组持续800 s未出现反跳现象.结论:在离体兔心,ACh洗脱后所致的正性肌力作用与心肌Ca2+通道、B受体的活性有关;ACh洗脱后与高浓度ACh时引起正性肌力作用的机制可能存在不同.     

ＣＹＰ２１基因启动子结构功能及突变研究进展

２１羟化酶基因（ＣＹＰ２１基因）缺陷可引起２１羟化酶缺乏。近年对ＣＹＰ２１基因的研究取得了一定进展,本文介绍了该基因启动子区的位置、结构、调节因子,重要功能域及突变等方面的进展,从分子水平进一步加深了对ＣＡＨ的发病机理的了解。     

肾上腺髓质素和降钙素基因相关肽受体在血管平滑肌细胞的脱敏—受体活性修饰蛋白的作用

新近研究发现,肾上腺髓质素（adrenomedullin,ADM)和降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide,CGRP)均能与降钙素受体样受体（calcitoni receptor-like receptor,CRLR)结合,其配体特异性由受体活性修饰蛋白（receptor activity-modifying protein RAMP)调控,本工作在离体培养的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（vsacular smooth muscle cells,VSMCs)上观察ADM和CGRP受体脱敏现象,以探讨CRLR／RAMP假说在心血管组织方面的意义,用无血清培养基（serum-free medium,SFM)和含有10^-8mol/L ADM,CGRP和肾上腺髓素质前体原N－末端20肽（proadrenomedullin N-terminal 20 peptide PAMP）的SFM培养,再用10^-8mol/L ADM或 CGRP和磷酸二酯酶的抑制剂异丙基次黄苷（isobutyryl methyxanthine,IBMX)与VSMCs进行第二次孵育,然后收集细胞,测定VSMCs cAMP含量。10^-8mol/LADM,CGRP和PAMP单独与VSMCs孵育,VSMCs cAMP含量分别较SFM组高191％（P＜0．01）,385％（P＜0．01）和67％（P＜0．05）,预先用10^-8mol/L ADM ak CGRP与VSMCs孵育可降低随后的CGRP刺激VSMCs产生cAMP,分别较单次CGRP育少44％（P＜0．05）和48％（P＜0．01）,预先用100nmol/L蛋白激酶A（PKA）抑制剂H－89处理VSMCs,可完全阻断ADM和CGRP预处理诱导的第二次CGRP刺激的VSMCs cAMP含量减少,表明VSMCs对CGRP的脱敏过程是通过PKA途径实现的,预先用ADM,CGRP处理VSMCs后,用ADM第二次孵育,细胞内cAMP含量与单次ADM孵育无明显改变,PKA抑制H－89与VSMCs孵育,无论对欠ADM刺激或对ADM和CGRP处理的第二次刺激的cAMP生成均无影响,用PAMP处理VSMCs后,ADM和CGRP的第二次刺激的VSMCs cAMP水平无明显改变（P＞0．05）。结果提示,在离体培养的大鼠VSMCs,ADM epc wsg i euk txgtdmj CGRP受体对预先用ADM和CGRP处理后的激动剂的第二次刺激都脱敏,表明ADM和CGRP的脱敏现象不一致。     

一种实用的碳纤电极制作方法

碳纤电极记录可用于对单个神经及内分泌细胞分泌过程进行电化学检测,其中技术关键之一是碳纤电极的制作。本文所介绍的碳纤的制作方法,简化了以往的工艺过程,使成功率与一致性得到了提高,同时检测灵敏度与噪声等指标满足了实验要求。用这样制作的碳纤电极在大鼠肾上腺嗜铬细胞上研究１－甲基－４－苯基毗啶对于单胺能神经细胞递质胞吐过程的影响,发现ＭＰＰ＾＋对于胞吐没有直接的影响并且不增加高Ｋ＾＋刺激所诱发的胞吐量。从