兔循环血中黄绿烙铁头蛇毒浓度与DIC出现关系研究

目的观察兔循环血中黄绿烙铁头蛇毒浓度与ＤＩＣ出现的关系。方法用抗烙铁头蛇毒的鼠多克隆抗体ＩｇＧ测定兔血中蛇毒浓度,以α２－ＰＩ、ＡＴ－Ⅲ活性和纤维蛋白原水平参数为ＤＩＣ指标。结果上述指标水平随血中蛇毒浓度的增加而降低,ＤＩＣ的发生与血中蛇毒浓度呈负相关系,高剂量的蛇毒可诱发ＤＩＣ。结论ＤＩＣ的发生取决于兔循环血中蛇毒的浓度。     

庚型肝炎病毒NS5区蛋白鼠单克隆抗体的制备

庚型病毒性肝炎是近年来世界上才确认的一种新型肝炎［１～３］。庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）呈世界性分布,经血液传播为主,也可母婴传播。ＨＧＶ容易形成持续性感染,类似ＨＩＶ和ＨＣＶ。据粗略估计,我国大约有１００万～１０００万ＨＧＶ携带者。因此,ＨＧＶ已成为继乙...     

基因扩增产物的固相杂交-酶联显色方法的建立

建立基于基因扩增技术的简便、快速的病毒核酸定量检测方法．将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的病毒基因产物,与通过共价键结合在微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,然后通过辣根过氧化物酶标记的抗生物素进行酶联显色,读取光密度值．应用本方法对血清中乙型、丙型肝炎病毒核酸定量检测,灵敏度分别可达１－５拷贝／反应．此方法简便、快速、特异性好、敏感性高、半定量指标客观,可广泛应用于肝炎病毒感染的临床诊断和疗效评价．     

枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊预防艾滋病相关性腹泻的临床研究

目的:观察枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊对艾滋病(AIDS)相关性腹泻的防治作用。方法:选择2013年7月至2014年5月在我科门诊进行高效抗逆转录病毒(HAART)治疗的AIDS患者80例,随机分成对照组40例和观察组40例。对照组给予单用HAART治疗,观察组在对照组的基础上联合使用枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊,两组疗程均为24周。治疗结束后观察两组的HAART疗效、AIDS相关性腹泻的发生率,以及大便培养真菌感染情况。结果:观察组和对照组HAART治疗有效率分别为75%和70%,两组比较差异无统计学意义(P0.05)。对照组腹泻发生率明显高于观察组,比较差异有统计学意义(P0.05),且对照组大便培养真菌感染率明显高于观察组,比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊能有效预防AIDS相关性腹泻的发生,并减少继发肠道真菌感染的发生。     

血清脂联素水平对老年维持性血液透析患者心脑血管事件发生风险及预后的影响

目的:探讨老年维持性血液透析(MHD)患者血清脂联素(adiponectin,ADPN)水平与其心脑血管事件发生风险及其预后的关系。方法:采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测76例老年MHD患者血清ADPN水平,以5 mg/L为界,以5 mg/L为低ADPN组,≥5 mg/L为高ADPN组。随访观察两组心脑血管事件的发生情况及预后。采用Cox回归分析血清ADPN水平和心脑血管事件对老年MHD患者的预后影响。结果:76例老年MHD患者的血清ADPN水平为(11.10±10.68)mg/L,其中低ADPN组患者有33例,高ADPN组患者有43例。与低ADPN组相比,高ADPN组患者的心脑血管事件发生率明显下降,而生存时间明显延长(P0.05)。Cox回归分析显示低ADPN水平和发生心脑血管事件是老年MHD患者生存时间的危险因素(P0.05)。结论:血清ADPN水平可作为老年MHD患者心脑血管事件的预测指标,并与患者的预后相关,有较好的临床应用价值。     

幽门螺杆菌根除失败后两种四联方案根除率的疗效对比

目的:对比两种不同的四联疗法对幽门螺杆菌根除失败后的根除率,选择可以有效弥补传统三联疗法的幽门螺杆菌根除失败措施的四联疗法。方法:选择2010年8月到2012年8月期间在我院住院治疗的幽门螺杆菌根除失败后患者90例作为研究对象。随机分为实验组和对照组,实验组的患者采取序贯疗法,对照组的患者采取标准四联疗法。对比两组的根除率以及临床疗效。结果:实验组患者的根除率为86.7%,对照组患者根除率为51.0%;实验组患者的临床总有效率为95.6%,对照组的临床有效率为77.8%;实验组的不良反应的总发生率为4.4%,对照组不良反应总发生率为20.0%。两组比较差异明显,P均0.05,具有统计学意义。结论:序贯疗法对幽门螺杆菌根除失败后的根除率以及疗效高于标准四联疗法。     

GnRH-a对大鼠海马和皮质部位parvalbumin表达的影响

目的:研究促性腺激素释放激素类似物(gonadotropin releasing hormone analogue,GnRH-a)对大鼠海马、皮质部位小白蛋白(parvalbumin,PV)表达的影响.方法:采用酶联免疫吸附试验测定血清激素水平,免疫组织化学和图像分析观察大鼠海马、皮质部位PV的表达.结果:①GnRH-a组大鼠血清雌二醇(estradiol,E2)、LH及FSH水平较正常对照组下降,差异有统计学意义(P<0.05);与OVX组比较LH、FSH较低,差异有统计学意义(P<0.05),但E2差异不显著.②正常情况下,大鼠海马、皮质部位可观察到PV神经元及纤维分布.③GnRH-a组PV细胞数及灰度值低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),与去卵巢组大鼠组相似;GnRH-a+E2联合用药后,PV细胞数及灰度值与正常对照组相似.结论:GnRH-a降低大鼠海马、皮质部位神经元中PV的表达,从而影响神经元的功能,这可能与其用药后神经精神副反应有一定关系.     

Polymorphisms in PPARD, PPARG and APM1 associated with four types of Traditional Chinese Medicine constitutions

Based on the theory of constitution of Traditional Chinese Medicine (TCM), the human population is divided into nine constitutions including one balanced constitution (Normality) and eight unbalanced constitutions (Yang-deficiency, Yin-deficiency, Phlegm-wetness, Qi-deficiency, Wetness-heat, Blood stasis, Depressed constitution, and Inherited special constitution). Different constitutions have specific metabolic features and different susceptibility to certain diseases. However, whether a genetic basis accounts for such constitution classification is yet to be determined. Here we performed a genetic study to assess the association between genetic variations of metabolic genes including PPARD, PPARG and APM1 and the constitutions. A total of 233 individuals of the Han population in China were classified into four groups, Normality, Yang-deficiency, Yin-deficiency and Phlegm-wetness with whom 23 single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the three genes were genotyped using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method. Biased distribution of PPARD rs2267669 and rs2076167, APM1 rs7627128 and rs1063539 in Yang-deficiency, PPARG Pro12Ala in Yin-deficiency and PPARD rs2076167, APM1 rs266729 and rs7627128 in Phlegm-wetness were observed. The frequencies of Haplotype13 (Hap13) of PPARG in Yin-deficiency, Hap25 of APM1 in Yang-deficiency and Hap2 of PPARD and Hap14 of PPARG in Phlegm-wetness, were significantly different from those in Normality, suggesting those might be group-associated haplotypes. These results suggested that single SNP and haplotypes of PPARD, PPARG and APM1 may underlie the genetic basis of the constitutions classified in TCM.     

可溶性肿瘤坏死因子受体II-脂联素球部融合蛋白的真核表达及生物学活性检测

本研究设计和构建了一种人肿瘤坏死因子受体II胞外区与人脂联素球部的融合基因sTNFRII-gAD,且相应的融合蛋白在哺乳动物细胞BHK-21S的无血清培养体系中实现了表达,并对该融合蛋白进行了初步鉴定。首先,用RT-PCR方法从人的外周血淋巴细胞总RNA中扩增人肿瘤坏死因子II型受体胞外区基因片段,与脂联素球部基因片段融合,克隆至pAAV2neo表达载体中,构建成pAAV2neo-sTNFRII-gAD。随后,用pAAV2neo-sTNFRII-gAD转染BHK-21S细胞获得G418抗性细胞BHK-21S/pAAV2neo-sTNFRII-gAD;然后,将原来含有血清的培养液换成无血清的化学成分限定的培养液,细胞从贴壁培养方式转换成悬浮培养方式;最后,收集BHK-21S/pAAV2neo-sTNFRII-gAD无血清悬浮培养24h后的培养上清,进行sTNFRII-gAD融合蛋白的鉴定分析。酶切鉴定和测序结果显示,所构建的pAAV2neo-sTNFRII-gAD质粒结构正确,sTNFRII-gAD序列与预期一致;分别用抗人肿瘤坏死因子受体II和抗人脂联素球部的单克隆抗体检测pAAV2neo-sTNFRII-gAD瞬时转染的BHK-21S细胞,免疫荧光呈现阳性;免疫印迹分析在pAAV2neo-sTNFRII-gAD稳定转染的BHK-21S细胞上清中检测到sTNFRII-gAD融合蛋白的表达,并以单体、三聚体和三聚体以上的多聚体形式存在。活性测定结果表明,sTNFRII-gAD融合蛋白具有显著抑制TNFα杀伤L929细胞的活性。因此,本研究为下一步大量制备sTNFRII-gAD融合蛋白用于体内外功能研究提供了良好基础。     

酵母表面展示-酶联免疫吸附测定法的建立

以表面展示人源蛋白酶体α亚基6蛋白的重组酵母细胞,结合酶联吸附免疫原理检测技术,以表面展示有人源蛋白酶体α亚基6(proteasome subunit alpha6,PSα6)的重组酵母细胞及其对应的单克隆抗体3D7D12D为研究对象,建立酵母酶联免疫吸附(yeast-ELISA)检测技术,应用于检测小鼠单克隆抗体及单抗效价.应用该方法最佳酵母浓度为0.50A600;测得单抗效价为1∶5×105,与常规ELISA效价接近;交叉试验和阻断试验表明该方法特异性强;同时该方法可用于检测抗血清.结果表明,yeast-ELISA可直接应用于检测单抗,测得效价与常规抗原包被间接ELISA具有良好一致性,特异性好,无交叉反应性.