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32.
小鼠孤雌胚胎干细胞的建立及其向运动神经元分化的初探 总被引:1,自引:0,他引:1
文章采用小鼠的孤雌囊胚建立胚胎干细胞系,探究其向运动神经元分化的可能,为临床治疗以及研究基因组印记与神经分化的的关系提供理论基础。结果表明:卵母细胞孤雌激活率达到93.26%,成功建立了8个孤雌胚胎干细胞系,建系率达到23.53%。克隆表达多潜能标记Oct4及细胞表面标记SSEA-1,有高水平的碱性磷酸酶活性,在细胞第10代和第30代时核型分析检测显示为正常的40条染色体。体内、外均分化出三胚层来源的细胞。联合应用全反式维甲酸(RA)、音猬因子(Shh)及细胞外基质,小鼠孤雌胚胎干细胞可被诱导表达运动神经元的标志性标记HB9、Olig2。 相似文献
33.
维甲酸X受体α(Retinoid X receptor-α,RXR-α)属于核受体家族,在调节基因转录及信号转导方面发挥着重要的作用。为了深入研究RXR-α的生物学作用,文章利用RT-PCR技术扩增了人RXR-α基因,并将其克隆入原核表达载体pQE-30Xa,转化大肠杆菌M15[PREP4],异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE可见与预期大小相符的蛋白条带,Western blotting证实该条带为重组人RXR-α蛋白,并用Ni2-NTA柱进行亲和层析纯化。免疫共沉淀结果显示其具有与TRβ1结合的能力。电泳迁移率改变实验(EMSA)显示RXR-α与TRβ1形成的杂二聚体具有与DNA结合的能力。结果显示,文章已成功建立了重组人RXR-α的大肠杆菌表达系统,表达产物具有很好的生物学活性。 相似文献
34.
维生素A的活性代谢物维甲酸在哺乳动物精子发生过程中发挥着重要的调节作用,但其具体调节机制并不十分清楚。该文拟对睾丸内维甲酸的运输、代谢、信号系统以及维甲酸调控精子发生的研究进展进行简单总结。 相似文献
35.
对RA、HHT和WB_(652)诱导HL-60细胞过程中,细胞浆和膜溶脱部分的蛋白质酪氨酸磷酸化水平变化进行了对比研究,结果发现,在胞浆部分主要有四种含有P-Tyr的蛋白,而且80kD蛋白酪氨酸磷酸化水平随着诱导发生变化。诱导前后内源性蛋白上P-Tyr百分含量也发生了改变。 相似文献
36.
脂溶性的维甲酸可通过固醇类激素作用途径启动HOX族及LIM族调节基因,进而影响脊椎动物胚胎的形态发生、再生组织的分化。本文通过不同浓度系列表明,维甲酸对早期鱼胚发育的影响程度依赖于其作用浓度与作用时间,10^-6 ̄10^-7M的浓度范围为作用敏感区。维甲酸对中枢神经系统前后轴上的影响尤其显著,主要表现为小头畸形、无眼或无心脏。作者首次用Brdu-Anti-Bndu标记处于S期的细胞核表明,RA作用 相似文献
37.
全反式维甲酸对HL—60细胞中N—乙酰氨基葡萄糖转移… 总被引:1,自引:0,他引:1
本文全反式视典酸(ATRA)和对HHL-60细胞中乙酰氨基麦Ⅲ,Ⅳ(GnT-Ⅲ,Ⅳ)的调控作用,结果发现0.1μmol/L的ATRA即可使GnT-Ⅲ和Ⅳ的活力明显降低至50%左右,但ATRA浓度增至1.0或10μmol/L时,酶活力不再显著下降。在未经ATRA处理的对照细胞中,培养不同的时间两酶活力均有较大的变动,未经同步化和同步人的细胞分别在24h及至48h达到高峰。ATRA处理后,示经同步化细 相似文献
38.
从蛋白质可及性分析的角度研究了ERABP与RA的相互作用模式,在原子水平和残基水平上计算了四个与维甲酸结合蛋白(ERABP)有关的分子的可及性,这四个分子是EPA(无配体结晶生成的ERABP),EPB—RA(ERAB和配体雏甲酸RA,并对其进行分析比较。分析结果表明,RA在结合蛋白中采取β-芷香酮环向里,羧基端向外的构象形式;围绕结合部位有24个残基;在结合配体RA时,在结合配体RA时,结合蛋白将发生构象变化,变化的结果是结合部位空穴的暴露程度增大。 相似文献
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40.
采用RT-PCR、油红O染色法、油红O染色提取法和分光光度计法,探讨不同浓度9-顺式维甲酸(9-cisRA)(0-10$mol/L)对体外原代培养猪前体脂肪细胞分化的影响及其可能机制。结果表明,9-cisRA在脂肪细胞分化中因浓度不同而发挥不同作用。低浓度9-cisRA(0-10nmol/L)促进前体脂肪细胞分化,并上调RXRα、PPARγmRNA表达,增加前体脂肪细胞分化标志酶3-磷酸甘油脱氢酶(glyc-erol-3-phosphate dehydrogenase,GPDH)的活性;高浓度9-cisRA(100nmol/L-10$mol/L)则抑制前体脂肪细胞分化,并下调RXRα、PPARγmRNA表达,减少GPDH的活性。结果提示9-cisRA在猪前体脂肪细胞分化中,可能通过调控RXRα和PPARγ基因表达变化来发挥其促进或抑制作用。 相似文献