表达血管抑制因子的腺相关病毒载体的构建及其体内外活性

血管抑制因子(Vasostatin,VAS),为集钙蛋白N-末端180个氨基酸大小的蛋白,是一种内源性血管生成抑制因子,对多种肿瘤的生长具有很强的抑制作用.近期有研究显示,VAS可以促进神经内分泌肿瘤的恶化,提醒研究人员在开发该抗肿瘤药物时必须非常谨慎.将VAS cDNA插入腺相关病毒-2表达质粒pAAV-2,采用无辅助病毒参与的三质粒共转染法制备rAAV-VAS病毒.体外分别转染小鼠胰内皮细胞MS1和结肠癌细胞HCT-116,MTT法测定对细胞生长的影响,Western blotting方法检测VAS的表述.采用小鼠皮下移植瘤模型,验证VAS的表达对肿瘤生长、新生血管密度、以及细胞增殖的作用.结果证明构建的rAAV-VAS病毒载体,能抑制小鼠胰内皮细胞的生长,转染HCT-116后能有效表达VAS蛋白,但HCT-116的体外生长不受影响.瘤体注射rAAV-VAS后,HCT-116移植瘤在小鼠体内的生长速度明显减缓,肿瘤新生血管密度明显降低.结果显示,rAAV-VAS可以抑制HCT-116移植瘤的新生血管形成,但对其细胞增殖无明显作用.     

结肠途径治疗机辅助治疗急性黄疸性肝炎的临床研究

目的探讨结肠途径治疗机辅助治疗急性黄疸性肝炎的临床疗效.方法选择60例急性黄疸性肝炎患者,随机分成2组,分别给予常规治疗及常规治疗加肠疗,观察时间为15 d,30例健康人为正常对照组.分析2组患者治疗前后血液生化指标和肠道菌群变化,并观察临床症状和体症的改善情况.结果肠疗组患者的肝功能的恢复程度好于常规治疗组,且临床症状的改善较常规治疗组差异有显著性(P＜0.01);与正常对照组相比,肠疗组双歧杆菌、乳酸杆菌含量明显下降(P＜0.05).结论肠疗能有效改善患者临床症状及血液生化指标;肠疗治疗后肠道菌群仍轻度失调.     

3种模拟中医体征的体虚便秘大鼠模型建立及效果观察

目的：分别建立大鼠血虚、阴虚和阳虚便秘模型并比较其结肠动力、结肠水代谢、结肠黏液分泌和结肠水通道蛋白2（AQP2）的表达水平。方法：40只SD大鼠,雌雄各半,随机分为4组（n=10）：正常对照组（N）、血虚便秘组（XC）、阴虚便秘组（YC）、阳虚便秘组（YAC）。分别采用放血+洛哌丁胺、甲状腺素+洛哌丁胺、冰水刺激+洛哌丁胺建立血虚便秘、阴虚便秘、阳虚便秘大鼠模型,放血每周1次,药物每天灌胃1次,连续42 d。检测大鼠活动状态、体质量、大便性状、口肛传输时间、小肠推进率、粪便和结肠含水量等体征指标,对结肠组织进行AB-PAS染色和免疫组化染色,观察黏液分泌情况和AQP2表达水平。结果：与正常对照组比较,3种模型大鼠体重增长减慢;造模第40天自主活动量变化率由大到小依次为YC、XC和YAC;造模第30天出现固体硬质粪便,粪便评分升高顺序为XC、YC和YAC;口肛传输时间均显著延长、小肠推进率均显著降低（P < 0.05,P < 0.01）,肠动力减低顺序为YC、YAC和XC;粪便含水量均显著减少（P < 0.05,P < 0.01）,XC和YAC组大鼠结肠含水量显著减少（P < 0.05,P <0.01）,YC大鼠结肠含水量有减少趋势,结肠水代谢顺序为YC、YAC和XC;3种模型大鼠结肠黏膜层腺管和杯状细胞出现不同程度缩小,黏液分泌减少,分泌功能障碍顺序为YAC、YC和XC,且近端和远端结肠AQP2的表达均显著增加（P < 0.05,P < 0.01）,增加顺序近端结肠为YAC、YC、XC,远端结肠为YAC、XC和YC。结论：复合因素长期刺激均可建立符合中医体征的便秘大鼠模型,且各模型大鼠结肠运动、结肠水代谢、结肠黏液分泌和AQP2表达水平存在一定的差异。     

肠外置术治疗结肠损伤并发症的护理体会

目的探讨肠外置术治疗结肠损伤并发症的护理体会。方法对2015年3月~2016年11月我院收治行造瘘口腹膜外还纳术7例患者的临床资料进行回顾性分析。结果 7例患者在初始手术时均行穿孔部肠外置术或吻合口近端肠双筒造瘘术,术后患者均一期愈合,顺利康复出院。结论优质护理措施用于肠外置术患者并发症护理中,可有效提高临床治疗效果,缩短患者康复时间,提高患者生活质量,提高护理满意度,值得临床应用。     

双歧三联活菌胶囊对结肠造口术后腹泻患者肠道菌群及肠黏膜屏障功能的影响

目的探讨双歧三联活菌胶囊对结肠造口术后腹泻患者肠道菌群及肠黏膜屏障功能的影响。方法选取外科门诊就诊结肠造口术后腹泻患者82例,随机分为观察组和对照组各41例。两组患者均予以口服补液盐、止泻药等常规治疗。观察组加用双歧三联活菌胶囊温水口服,630mg/次,2次/d,连用4周。于治疗前后观察两组患者肠道菌群数量及肠黏膜屏障功能指标的变化,并比较其临床效果。结果治疗4周后,两组患者双歧杆菌、乳杆菌数量及B/E比值上升,大肠埃希菌和肠球菌数量下降(P0.05),且观察组变化幅度更大;两组患者血清D-乳酸和二胺氧化酶(DAO)水平降低(P0.05或P0.01),且观察组下降幅度更大(P0.05);在总有效率上观察组较对照组更佳(P0.05)。结论双歧三联活菌胶囊治疗结肠造口术后腹泻患者效果较佳,机制与其能调节肠道微生态平衡紊乱,重建肠道微生态平衡,并能保护与修复肠黏膜屏障,减少其通透性,改善肠道功能密切相关。     

苦荞凝集素靶向抑制结肠癌细胞HCT116增殖的机制

苦荞凝集素（tartary buckwheat lectin,TBL）是一类兼具核糖体失活蛋白N-糖苷酶活性和芦丁水解酶活性的糖蛋白,具有显著的抑制结肠癌细胞增殖的功能。先前研究表明,TBL可以下调结肠癌细胞HCT116中包括miR-135a 和miR-135b在内的一些oncomiRs的表达,并且可以抑制结肠癌细胞HCT116的增殖。因此,我们推测TBL可能通过调控oncomiRs从而抑制HCT116细胞的增殖。本研究中,我们构建了包含miR-135a 和miR-35b结合位点的腺瘤性结肠息肉病基因（adenomatous polyposis coli,APC）的3′-UTR区。双荧光素酶报告系统表明,经过TBL处理后,实验组的荧光素酶活性较对照组高,而且用miR-135a&b的反义核酸anti-miR-135a&b处理后和实验组有相似的结果。Western 印迹分析表明,TBL处理HCT116细胞24 h后,细胞中APC和p-β-catenin的表达上调,总β-catenin的表达下调,且存在剂量依赖效应,而对GSK-3β的表达无明显影响。进一步探究了TBL进入细胞的方式,我们发现,加入TBL作用2 h后,其主要存在于HCT116细胞的表面,部分进入细胞内部,在细胞表面可以同半乳糖凝集素galectin-3竞争结合细胞膜表面受体,并且存在剂量和时间依赖性。这些结果表明：TBL以HCT116细胞表面的galectin-3受体为靶点,通过内吞作用进入细胞,进而调控HCT116细胞中miR-135a&b的表达,影响Wnt信号通路而抑制结肠癌细胞的增殖。     

哺乳动物的消化策略（英文）

理解动物的营养生态位是充分理解其整个生态学的基础,对于害兽控制和物种保护也很重要,食肉动物的小肠很发达,这可能与对食物的高消化能力有关;杂食性动物有更复杂的胃肠器官,其后端有可进行发酵的盲肠,消化物的平均滞留时间（mean retention times,MRTs)更长;最长的平均滞留时间见于食草动物,其消化道内高密度的微生物种群对不同滞留区内的消化物进行发酵,但是,并不是所有的食草动物都能够最大程度地消化植物纤维,只有反刍动物、骆驼和个体较大的后肠发酵动物（hindgut fermenter)能够具有这种能力,对比而言,许多其它的食草动物,如前肠发酵的有袋类和小型的后肠发酵动物如兔子、田鼠和负鼠等,它们具备可以使植物纤维消化效率最大的消化系统,可以在食物中的纤维素含量非常高的情况下仍能处理大量的食物。这些不同的消化策略使哺乳动物具有广幅的营养生态位。     

抗黑色素瘤及结肠直肠癌的治疗性疫苗

作的总体策略是开发多价重组疫苗,这种疫苗能够在黑色素瘤或结肠直肠癌病人中激发产生广泛的免疫应答,作在中报告了初步研究的结果,将携带细胞因子基因的重组金丝雀痘病毒进行肿瘤内投递至病人之后,以期评价这种重组疫苗的作用。近来的研究主要集中在采用独特的衍生于称之为ALVAC的金丝雀痘病毒的载体系统,利用初免—加强免疫程序,观察肿瘤特异性T细胞应答。在ALVAC中,作掺入编码肿瘤相关抗原(TAAs)的基因。在评价ALVAC　CEA从候选疫苗的结肠癌临床研究中已经证实这种方案是安全的,并且能够诱导肿瘤特异性T细胞应答。     

胆囊扭转的超声诊断

目的:探讨胆囊扭转的声像图特征及临床应用价值。方法:回顾性分析7例胆囊扭转的声像图表现及临床相关资料。结果:胆囊颈部圆锥形低回声结构中间有杂乱的纤细光带,是胆囊扭转的声像图特证。结论:超声检查对胆囊扭转的术前明确诊断及病情评估具有重要的临床价值。