CDK12主要生理功能与其在肿瘤发生中作用的研究进展

周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase, CDK)是细胞周期和基因转录的关键调节因子,其调控异常是促进肿瘤发生的重要因素。CDK12是一种与转录相关的周期蛋白依赖性激酶,可使RNA聚合酶Ⅱ碳端氨基酸(carboxy terminal domain of RNA polymeraseⅡ, RNA pol II CTD)中的丝氨酸磷酸化,并参与多种细胞生理过程,如DNA损伤反应、细胞增殖和分化以及m RNA剪接和转录前m RNA加工等。此外, CDK12编码基因的突变将导致多种细胞过程调控异常,基因不稳定性增加,这都可能促进肿瘤的发生发展。本文将重点讨论细胞中CDK12调节转录调控、RNA剪接、细胞成熟和分化、DNA损伤修复(DNA damage repair, DDR)的机制以及其基因突变对于正常细胞的影响,旨在阐明CDK12的主要生理功能及其在肿瘤发生发展中的作用,为临床各类肿瘤的靶向药物研究提供帮助。     

慢性肺源性心脏病患者血清白细胞介素-6、降钙素原、D-二聚体、N端B型脑钠肽前体与心功能分级和预后的关系研究

摘要 目的：探讨慢性肺源性心脏病（CCP）患者血清白细胞介素-6（IL-6）、降钙素原（PCT）、D-二聚体（D-D）、N端B型脑钠肽前体（NT-proBNP）与心功能分级和预后的关系。方法：选取2020年1月～2021年5月合肥市第一人民医院全科医学科及呼吸与危重症科收治的170例CCP患者（CCP组）,其中纽约心脏协会（NYHA）心功能分级Ⅱ级49例、Ⅲ级66例、Ⅳ级55例,根据1年后存活状况分为死亡组26例和存活组144例,另选取同期54名体检健康者（对照组）。收集CCP患者临床资料,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-6、PCT、D-D、NT-proBNP水平。通过多因素Logistic回归分析CCP患者预后不良的影响因素,受试者工作特征（ROC）曲线分析血清IL-6、PCT、D-D、NT-proBNP水平对CCP患者预后不良的预测价值。结果：与对照组比较,CCP组血清IL-6、PCT、D-D、NT-proBNP水平升高（P＜0.05）。Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级CCP患者血清IL-6、PCT、D-D、NT-proBNP水平依次升高（P＜0.05）。单因素分析显示,死亡组NYHA心功能分级Ⅳ级、肺动脉收缩压、Tie指数和血清IL-6、PCT、D-D、NT-proBNP水平高于存活组,第1秒用力呼气容积（FEV₁）占预计值％、FEV₁/用力肺活量（FVC）、三尖瓣环收缩期位移低于存活组（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示,NYHA心功能分级Ⅳ级和肺动脉收缩压、IL-6、PCT、D-D、NT-proBNP升高为CCP患者预后不良的独立危险因素,FEV1占预计值％升高为独立保护因素（P＜0.05）。ROC曲线分析显示,血清IL-6、PCT、D-D、NT-proBNP水平单独与联合预测CCP患者预后不良的曲线下面积分别为0.789、0.789、0.792、0.801、0.954,灵敏度分别为93.33％、66.67％、66.67％、86.67％、86.67％,特异度分别为46.67％、82.67％、85.33％、66.67％、94.67％。血清IL-6、PCT、D-D、NT-proBNP水平联合预测CCP患者预后不良的AUC大于单项预测（P＜0.05）。结论：CCP患者血清IL-6、PCT、D-D、NT-proBNP水平升高可增加心功能严重程度并导致预后不良,可作为CCP患者预后不良的辅助预测指标,且四项指标联合检测具有更好的预测效能。     

中国鲎精子发生的研究:Ⅱ.精子形成

应用电技术研究中国鲎精子形成过程和特点,早期精子细胞核圆,染色质呈网状分布,胞质中有许多线粒体和高尔基液泡,精子形成期间,出现合胞体现象,核分裂而胞质不分裂,细胞通过胞质桥相联系,随后出现隔板,逐渐将细胞核分开。细胞随访核向后移动而呈现极化现象。核的顶部出现一个高尔基－线粒体区,顶体由高在液泡演变而。精子形成期间,核中央位置形成贯穿整个的中央通道,并在核中形成植入窝,中心粒位于其中,成熟精子胞质极     

Perspectives on the origin of microfilaments,microtubules, the relevant chaperonin system and cytoskeletal motors--a commentary on the spirochaete origin of flagella

The origin of cytoskeleton and the origin of relevant intracelluar transportation system are big problemsfor understanding the emergence of eukaryotic cells. The present article snmmarized relevant information of evidences and molecular traces on the origin of actin, tubulin, the chaperonin system for folding them,myosins, kinesins, axonemal dyneins and cytoplasmic dyneins. On this basis the authors proposed a seriesof works, which should be done in the future, and indicated the ways for reaching the targets.These targets are mainly: 1) the reconstruction of evolutionary path from MreB protein of archaeal ancestor ofeukaryotic cells to typical actin; 2) the finding of the MreB or MreB-related proteins in crenarchaea andusing them to examine J. A. Lake‘‘s hypothesis on the origin of eukaryote from “eocytes“ (crenarchaea);3) the examinations of the existence and distribution of cytoskeleton made of MreB-related protein withincoccoid archaea, especially in amoeboid archaeon Thermoplasm acidophilnm; 4) using Thermoplasma asa model of archaeal ancestor of eukaryotic cells; 5) the searching for the homolog of ancestral dynein inpresent-day living archaea. During the writing of this article, Margulis‘‘ famous spirochaete hypothesis onthe origin of flagella and cilia was unexpectedly involved and analyzed from aspects of tubulin.% dyneinsand spirochaetes. Actually, spirochaete cannot be reasonably ass,med as the ectosymbiotic ancestor of eukaryotic flagella and cilia, since their swing depends upon large amount of bacterial flagella beneath theflexible outer wall, but not depends upon their intracelluar tubules and the assumed dyneins. In this case,if they had “evolved“ into cilia and lost their bacterial fiagella, they would immediately become immobile!In fact, tubulin and dynein-like proteins have not been found in any spirochaete.     

一种用于蛋白质C端序列测定的脯氨酸乙内酰硫脲(TH-Pro)新制备方法

采用Ｌ－型脯氨酸（Ｌ－Ｐｒｏ）作为原料,三甲基硅烷异硫氰酸酯（ＴＭＳ－ＩＴＣ）作为偶联试剂制备脯氨酸乙内酰硫脲（ＴＨ－Ｐｒｏ）．产物经反相ＨＰＬＣ分离纯化,并通过氨基酸组成分析,紫外光谱扫描,质谱和核磁共振等方法鉴定．反应产率高达９６％．     

钩端螺旋体的几种检测方法

钩端螺旋体的几种检测方法万成松张文炳曹虹（第一军医大学微生物学教研室,广州５１０５１５）钩端螺旋体（简称钩体,Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ）是一类细长、弯曲、两端呈钩状的螺旋体,钩体种类很多,分类学上归细菌范畴,可分致病性和非致病性两大类。钩体病是由致病性钩...     

蛋白质及多肽的C端分析

本文采用（异）硫氰酸化学法,以乙酸酐为活化试剂,四丁铵硫氰酸为偶联试剂,溴甲基萘为烷化试剂,将蛋白质或多肽的Ｃ端依次转化并裂解为ＡＴＨ－氨基酸,在２５４ｎｍ进行检测。分析了若干种天然的、基因工程表达的蛋白质或多肽,测定了不同长度的Ｃ端序列,并确证了Ｃ端的修饰及突变情况。为蛋白质和多肽的完整性、均一性,基因工程产品及合成多肽的质控提供了重要的Ｃ端信息。目前,可在１￣２ｎｍｏｌ水平上测定了３￣５个Ｃ端     

cAPK催化亚基的C端融合表达,纯化及其NMT底物活性作用

将小鼠ｃＡＭＰ依赖蛋白激酶催化亚基α（ｍＣα）基因从３＇端截去９６ｂｐ后与Ｈｉｓ－ｔａｇ融合,构建Ｃ端融合Ｈｉｓ６的表达质粒ｐＺＰｍＣα４Ｈ。该质粒在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中得到了高效表达,目的蛋白ｍＣα４Ｈ的表达量与ｍＣα相近。该蛋白在３７℃表达时主要以包含体形式存在,而２２℃表达时则大部分可溶。利用固定化金属离子（Ｎｉ＾２＋）配体亲和层析,分别从破菌上清涂和包含体中纯化ｍＣα４Ｈ,结果表明     

人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的克隆及在毕赤酵母中的表达

采用加长引物5＇端的方法克隆了hGM-CSF的编码基因,克隆过程中对该基因的局部做了密码子优化。然后克隆进毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K,电击转化毕赤酵母。PCR、SDS-PAGE与Western blotting证实hGM-CSF已整合进酵母基因组,摇瓶水平粗蛋白表达量达389mg/L,动物实验证实蛋白产物活性正常,SDS-PAGE与N-糖苷酶F去糖基化分析发现hGM-CSF被糖基化。     

犏牛FSHβ基因的5'端侧翼区的序列测定和比较研究

目的：为探求犏牛FSHβ基因的5＇端侧翼区的序列特征,揭示该基因的变异和对家畜产仔率的意义,方法：根据奶牛FSHβ基因的5＇端侧翼区的基因序列设 计引物,应用PCR方法扩增并克隆了犏牛FSHβ基因的5＇端侧翼区的序列,扩增序列 长度为2022bp,包括5＇端上游调控序列、第一外显子和部分第一内含子,并与奶牛 该区段序列进行了比较研究.结果：序列分析结果表明：犏牛FSHβ基因的5＇端侧翼 区与文献报道的奶牛该基因的同源性为98.37%.结论：这为研究杂交一代犏牛雄性 雄性不育,为开展牦牛功能基因组计划和分子育种提供了一定的科学的理论依据.