MicroPET观察姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑葡萄糖代谢的影响

目的利用18氟-脱氧葡萄糖microPET(18F-FDG microPET)影像学技术观察正常对照组小鼠,模型组和姜黄素治疗组APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的脑葡萄糖代谢情况。方法随机挑选6月龄正常对照组C57BL/6J小鼠3只,模型组和姜黄素治疗组APPswe/PS1dE9双转基因小鼠各3只,通过2%异氟烷吸入麻醉后,从尾静脉弹丸式注射放射性示踪剂18F-FDG每例约14.8～16.5 MBq,摄取45 min后进行10 min microPET图像采集。计算并比较各组小鼠每克脑组织(除小脑)18F-FDG的摄取率。结果姜黄素治疗组小鼠每克脑组织18F-FDG的摄取率高于正常对照组和模型组。结论姜黄素能明显提高APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑18 F-FDG的摄取及每克脑组织的摄取率,并可能通过影响脑葡萄糖代谢而发挥神经保护作用。     

人外周血Th细胞和Tc细胞内IFN-γ及IL-4表达水平与白塞病的关系

目的检测BD患者外周血Th细胞和Tc细胞内INF-γ和IL-4的表达水平,探索BD患者体内的免疫状况。方法采用流式细胞术检测BD活动期患者(n=22),BD稳定期(n=6)以及健康体检者(n=22)外周血T细胞亚群INF-γ和IL-4的表达水平。结果 BD患者活动期外周血细胞Th细胞和Tc细胞经过刺激后胞内合成IFN-γ的水平明显高于正常人水平(Th细胞:22.45%±7.33%vs.16.32±4.96%,P<0.05;Tc细胞:36.74%±13.19%vs.28.67%±11.56%,P<0.05),稳定期患者Th细胞和Tc细胞体外合成IFN-γ的能力与正常人相比无明显差异;稳定期患者Th细胞和Tc细胞胞内合成IL-4的能力相对于正常人均无明显差异:(稳定期Th细胞:3.01%±1.38%vs.2.87%±1.46%,Tc细胞:1.14%±0.28%vs.1.07%±0.32%,P>0.05)。而活动期患者Th细胞和Tc细胞胞内合成IL-4的能力相对于正常人均存在明显差异:(Th细胞:3.54%±1.62%vs.2.87%±1.46%,Tc细胞:1.82%±0.43%vs.1.07%±0.32%,P<0.05);导致Th细胞和Tc细胞有偏向Th1及Tc1的趋势(Th细胞IFN-γ/IL-4:6.34±3.24 vs.5.69±4.72,p>0.05;Tc细胞IFN-γ/IL-4:20.19±13.65 vs.26.79±14.52,P>0.05)。结论 BD患者外周血INF-γ和IL-4的表达水平明显升高,并与疾病活动期存在一定程度相关,可能对白塞病患者的诊断具有重要的临床意义。     

冠心病患者介入治疗前后血清IL-18、sCD40L和hs-CRP水平的变化及其意义

目的：探讨冠心病患者血清白介素18（Interleukin-18,IL-18）、白细胞分化抗原40配体（CD40L）、及高敏C反应蛋白（hs-CRP）水平在经皮冠状动脉介入术治疗前后的变化和意义。方法：选择经冠状动脉造影确诊的冠心病患者85例,根据病变程度分为单支病变组（n=32）、双支病变组（n=28）和多支病变组（n=25）,采用双抗体夹心ELISA法测定PCI术前术后血清IL-18、CD40L和hs-CRP水平。结果：血清IL-18水平测定结果：多支病变组高于双支病变组,双支病变组高于单支病变组;支架置入术后显著高于术前,差异均有统计学意义（P〈0.01）。血清CD40L水平测定结果：多支病变组高于双支病变组和单支病变组,差异均有统计学意义（P〈0.01）,双支病变组与单支病变组间差异无统计学意义（P〉0.05）;支架置入术后较术前显著升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。血清hs-CRP水平测定结果：多支病变组高于双支病变组,双支病变组高于单支病变组;支架置入术后显著高于术前,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论：冠心病患者血清IL-18、CD40L和hs-CRP与冠脉病变程度密切相关,介入治疗可使冠心病患者血清IL-18、CD40L和hs-CRP水平升高,监测血清中IL-18、CD40L和hs-CRP水平变化可了解治疗效果和炎症程度。     

大黄素对HT-29细胞MAPKs信号通路活化及IL-8分泌的影响

目的：研究大黄素对IFN-和LPS刺激的人结肠癌细胞株HT-29细胞的ERK、JNK和p38MARK和IL-8表达的影响。方法：人结肠癌细胞株HT-29细胞与40ng／mL的IFN．共培养12h,再加入100ng／mLLPS刺激15min,用大黄素预处理进行干预。ELISA检测HT-29细胞内的ERK、JNK和p38MARK含量和细胞上清IL-8含量。结果：IFN-1和LPS刺激后HT-29细胞的ERK、JNK和p38MARK磷酸化水平和IL．8分泌明显升高。大黄素对p38和JNK磷酸化有明显的抑制作用,而对ERK磷酸化则没有明显抑制作用;大黄素能显著降低IFN-γ＋LPS所引起的HT-29细胞IL-8的大量产生,并且呈明显的剂量依赖关系。结论：大黄素能有效抑制IFN-γ＋LPS所引起的HT．29细胞p38和ⅢK的磷酸化,并显著降低IL-8分泌。     

大黄素对HT-29 细胞MAPKs 信号通路活化及IL-8 分泌的影响

目的:研究大黄素对IFN-和LPS刺激的人结肠癌细胞株HT-29细胞的ERK、JNK和p38 MARK和IL-8表达的影响。方法:人结肠癌细胞株HT-29细胞与40 ng/mL的IFN-共培养12 h,再加入100 ng/mL LPS刺激15 min,用大黄素预处理进行干预。ELISA检测HT-29细胞内的ERK、JNK和p38 MARK含量和细胞上清IL-8含量。结果:IFN-γ和LPS刺激后HT-29细胞的ERK、JNK和p38 MARK磷酸化水平和IL-8分泌明显升高。大黄素对p38和JNK磷酸化有明显的抑制作用,而对ERK磷酸化则没有明显抑制作用;大黄素能显著降低IFN-γ+LPS所引起的HT-29细胞IL-8的大量产生,并且呈明显的剂量依赖关系。结论:大黄素能有效抑制IFN-γ+LPS所引起的HT-29细胞p38和JNK的磷酸化,并显著降低IL-8分泌。     

低氧对巨噬细胞分泌TNF-α和IL-6的影响及其机制

目的:观察低氧对巨噬细胞(Mφ)前炎症因子TNF-α和IL-6分泌的影响及其机制.方法:收集分离小鼠腹腔Mφ,建立Mφ的低氧(1% O2,5%CO2)培养模型,并用非特异性酯酶染色法进行鉴定;ELISA法检测上清液中TNF-α和IL-6的含量;RT-PCR法检测TNF-α和IL-6的转录物水平;用Western blot法检测Mφ核内NF-κB的激活量;通过在培养液中加入氢化可的松(5 mg/L),观察低氧时TNF-α和IL-6分泌量的变化.结果:TNF-α和IL-6分泌量在低氧12 h时明显增加(P＜0.01);低氧6 h时,TNF-α mRNA和IL-6 mRNA表达量明显高于对照组(P＜0.01);M中核内NF-κB的激活量在低氧2 h时明显增高(P＜0.05),低氧5 h内持续存在;而当培养液中加入氢化可的松抑制NF-κB活性后,TNF-α和IL-6的分泌水平无明显变化.结论:低氧可通过核转录因子NF-κB途径促进细胞因子TNF-α和IL-6基因的表达和分泌.     

Cloning and characterization of a new isoform of mouse interleukin-18

Interleukin-18 （IL-18） is a novel proinflammatory cytokine with potent interferon （IFN）-γ inducing activity that plays an important biological role in the enhancement of the activity of natural killer cells and cytotoxic T lymphocytes, In this study, we have identified a novel short form of IL- 18 in mouse, named IL-18s. IL-18s might be an alternative splicing variant of IL-18 and its cDNA contains a 57 bp in-frame deletion, Like IL-18, IL-18s is also widely expressed in mouse tissues, It was suggested that IL-18s might have a caspase- 1-dependent mechanism for maturation and secretion similar to that of IL- 18： when transfected in COS-7 cells, pro-IL-18s （22 kDa） could be detected, and the mature IL-18s （16 kDa） could also be detected when combined with caspase-1. We observed that recombinant mouse IL-18s did not show any IL-18-like function, and IL-18s could enhance the ability of IL-18 to increase IFN-γ production by approximately 40% in mouse splenocytes. This effect was observed primarily at relative low concentrations of IL-18, suggesting that IL- 18s might regulate the activity of IL- 18 in the physiological conditions,     

大肠杆菌F18菌毛及其亚型的PCR鉴定

F18菌毛是产肠毒素大肠杆菌 (ETEC)与产vero细胞毒素大肠杆菌 (VTEC)的重要致病因子 ,可介导细菌对小肠细胞的黏附 ,并具有F18ab和F18ac 2个抗原亚型。根据已发表的F18ab菌毛A亚单位 (FedA ab)的基因 (fedA ab)设计 3条引物 ,建立了 2种聚合酶链式反应 (PCR)扩增方法。通过对F18ab 大肠杆菌、F18ac 大肠杆菌、K88 大肠杆菌、K99 大肠杆菌、987P 大肠杆菌、F4 1 大肠杆菌的试验 ,结果表明所建立的PCR方法可特异性鉴定F18 大肠杆菌并区别其亚型F18ab与F18ac     

假单胞菌M18调控因子GacA与RsmA的相关性及对抗生物质合成代谢调控机制的分析

假单胞菌M18是一株可同时合成并分泌吩嗪-1-羧酸(Phenazine-1-carboxylic acid,PCA)和藤黄绿脓菌素(Pyoluteorin,Plt)两种抗生物质的生防菌株。为了进一步研究假单胞菌M18抗生物质合成代谢的调控方式与机制,在分别构建gacAr、smA等单基因突变株基础上,又构建了gacArsmA双基因突变株M18GR以及gacA′-l′acZ和rsmA′-′lacZ等翻译融合表达载体(pMEGA和pMERA)。通过在PPM和KMB两种培养基中发酵培养和两种抗生物质PCA和Plt的HPLC定量测定显示,双突变株M18GR的PCA和Plt的合成量不论在PPM还是在KMB培养基中都介于单突变株M18G和M18R之间。由实验结果分析推测,两种调控因子对抗生物质合成的调控作用不是发生在转录水平,很可能发生在转录后水平。由β-半乳糖苷酶的定量分析表明,在假单胞菌M18中,两种调控因子不存在自诱导机制;虽然GacA未调控RsmA的合成,但RsmA可能部分正向调控GacA的表达。     

园蛛总科网型不同的蜘蛛间分子系统发生关系的初步探讨

为初步探讨园蛛总科内网型不同的蜘蛛间分子系统发生关系,测定了9种蜘蛛核18S rRNA基因的部分序列。联合GenBank中的2种蜘蛛18S rRNA基因序列数据,用NJ法、MP法和ML法重建分子系统树,结果表明：（1）织圆网的园蛛科和肖蛸科蜘蛛在园蛛总科中不是姊妹群;（2）不织圆网的球蛛科和皿蛛科也不是单系发生,证实了皿蛛片网和球蛛网独立起源的观点;（3）皿蛛科蜘蛛的分子系统发生地位与肖蛸科较近、而与园蛛科较远,这表明皿蛛科和园蛛科问雄性触肢结构的相似性很可能是类似而不是同源相似。