Thermococcus sp.B1001环糊精酶的重组表达及在麦芽七糖制备中的应用

成功构建pET-24a-tscd质粒,实现Thermococcus sp.Strain B1001来源的环糊精酶(TsCDase)在Es-cherichia coli BL21(DE3)中表达.通过热处理和镍柱分离对重组TsCDase进行纯化.酶学性质研究表明,重组TsCDase的比活为1 208.04 U/mg,最适温度为90℃、最适pH值为5.5.重组酶TsCDase在85℃、90℃、95℃条件下的半衰期分别为180、120、30min.酶转化研究表明,以80 g/L β-环糊精为底物,当酶转化温度为90℃、反应pH值为5.5～6.0,加酶量为25 U/g,反应时间为4 h时,麦芽七糖产率为81.19％和85.95％,七糖占产物麦芽寡糖的比例为95.24％和92.92％.本研究结果为工业化制备麦芽七糖奠定良好基础.     

蚂蝗七的离体快速繁殖

1植物名称蚂蝗七(Chirita fimbrisepala Hand.- Mazz.)。2材料类别花梗和带苞片的花蕾。3培养条件(1)愈伤组织诱导和不定芽分化培养基;MS 6-BA 0.1mg·L~(-1)(单位下同) NAA 0.1;(2)继代增殖培养基:MS 6-BA 0.05 NAA 0.1;(3)壮苗生根培养基:1/2MS 1.0%蔗糖 0.3%活性炭。培养基(1)和(2)均加入3.0%蔗糖和0.6%琼脂,pH 6.2,培养温度(25±3)℃;在愈伤组织     

濒危植物七子花的开花与结实特性

对濒危植物七子花(Heptacodium miconioides)的开花和结实特性进行了研究.结果显示:(1)生境的光照和土壤条件好有利于花枝多开花,而海拔低(或气温高)则有利于花序开多轮花,并使花期延长.(2)七子花的结实率不高(平均只有34.10%),主要原因是大多数早开的花没有获取资源的空间优势,结实率很低.(3)种子的大小也与花序类型及开花位置有关,其中Ⅰ型花序产生的最大,Ⅲ型花序上轮花产生的最小.(4)去基轮花可以提高花序的开花数量,但不能改善其结实状况。因此,提高七子花果期的生殖投资可能是解除其濒危状态的关键.     

七星瓢虫成虫石油醚提取物的化学成分及抑菌活性

【目的】确定七星瓢虫Coccinella septempunctata成虫石油醚提取物的化学成分及其抑菌活性。【方法】用甲醇室温提取, 石油醚、 乙酸乙酯和正丁醇梯度萃取, 利用气相色谱-质谱连用仪（Gas Chromatograph-Mass Spectrometer, GC-MS）对七星瓢虫成虫石油醚提取物成分进行分析, 通过硅胶、 凝胶Sephadex LH-20、 ODS-C₁₈柱层析法对正丁醇提取部分的成分进行分离, 采用质谱和核磁共振等手段鉴定结构。采用纸片扩散法对七星瓢虫成虫石油醚提取物的抑菌活性进行测试。【结果】经GC-MS联用技术从石油醚相中鉴定出14个化合物, 从正丁醇相中分离鉴定了7个化合物。石油醚提取物对肠道沙门氏菌Salmonella enterica有抑制作用, 在浓度为100和50 mg/mL时, 抑菌率分别为52.78%和27.05%, 在该浓度下对绿脓杆菌Pseudomonas aeruginosa、 玉米大斑病菌Exserohilum turcicum和水稻纹枯病菌Rhizoctonia solani没有表现出明显的抑制作用。【结论】七星瓢虫C. septempunctata成虫石油醚提取物对肠道沙门氏菌具有抑制作用。     

丁苯酞对七氟醚诱导神经细胞损伤的保护作用

目的探讨丁苯酞（BNP）对七氟醚诱导神经细胞损伤的影响及其可能的机制。 方法取胎鼠海马组织,分离培养神经细胞,分为对照组（正常神经细胞）、七氟醚组（3%七氟醚通气）、低剂量BNP组（1 μmol/L的BNP处理6 h+3%七氟醚通气）、中剂量BNP组（5 μmol/?L的BNP处理6 h + 3%七氟醚通气）以及高剂量BNP组（10 μmol/L的BNP处理6?h + 3%七氟醚通气）,采用MTT法检测细胞生存率,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用Western bolt法检测各组细胞Bcl-2、Bax以及Caspase-3蛋白表达情况,生存率、凋亡率比较采用t检验或方差分析。 结果24、48和72 h,七氟醚同期处理各组细胞生存率较对照组明显降低[对照组（88.31±8.20）%,（80.42±9.04）%,（75.63±7.84）%;七氟醚组（71.53±6.95）%,（61.35±7.38）%,（45.40±5.42）%,t = 3.491、3.654、7.092,P均< 0.001;低剂量BNP组（72.41±8.42）%,（67.22±6.46）%,（50.11±5.71）%,t = 3.025、2.657、17.411,P?= 0.016、0.027、0.000;中剂量BNP组（76.68±5.95）%,（72.53±5.10）%,（54.58±6.73）%,t = 2.567、2.030、4.556,P = 0.028、0.034、0.000;高剂量BNP组（79.32±6.44）%,（75.68±5.47）%,（60.09±4.28）%;t = 2.183、2.048、3.890,P = 0.023、0.036、0.000],而BNP各处理组细胞生存率明显高于单纯七氟醚处理组[七氟醚组（71.53±6.95）%,（61.35±7.38）%,（45.40±5.42）%,低剂量BNP组（72.41±8.42）%,（67.22±6.46）%,（50.11±5.71）%,t = 1.180、2.038、2.317,P?= 0.216、0.030、0.019;中剂量BNP组（76.68±5.95）%,（72.53±5.10）%,（54.58±6.73）%,t?= 2.180、2.787、2.376,P = 0.028、0.017、0.020;高剂量BNP组（79.32±6.44）%,（75.68±5.47）%,（60.09±4.28）%,t = 2.206、3.488、4.756,P = 0.022、0.000、0.000],且随着BNP浓度的升高,细胞生存率明显升高[低剂量BNP组（72.41±8.42）%,（67.22±6.46）%,（50.11±5.71）%;中剂量BNP组（76.68±5.95）%,（72.53±5.10）%,（54.58±6.73）%;高剂量BNP组（79.32±6.44）%,（75.68±5.47）%,（60.09±4.28）%;F = 2.182、2.491、2.384,P = 0.020、0.024、0.022]。采用流式细胞技术检测各组神经细胞凋亡情况,采用七氟醚通气处理的各组神经细胞凋亡率均显著高于对照组[七氟醚组（67.49±7.92）%,低剂量BNP组（60.72±8.33）%,中剂量BNP组（44.95±7.21）%,高剂量BNP组（31.86±6.50）%,对照组（19.42±4.58）%,F = 6.583,P < 0.001],而采用BNP处理的各组神经系统凋亡率明显低于七氟醚组（P < 0.05）,且随着BNP剂量的增加,凋亡率明显降低（P < 0.05）。七氟醚通气各组细胞Bcl-2表达较对照组降低,而BNP处理各组细胞Bcl-2表达较七氟醚组有所升高,且随着BNP剂量增加Bcl-2表达增加;七氟醚通气各组细胞Bax以及Caspase-3蛋白表达较对照组增加,而BNP处理各组细胞Bax以及Caspase-3蛋白表达较七氟醚组有所降低,且随着BNP浓度的升高Bax以及Caspase-3蛋白表达降低。 结论七氟醚可诱导神经细胞凋亡,从而对神经系统造成损伤,而BNP则可有效抑制七氟醚诱导的神经细胞凋亡,对神经系统损伤具有保护作用,其可能的机制与促进Bcl-2蛋白表达,抑制Bax、Caspase-3蛋白表达有关。     

濒危植物七子花的生殖构件特征

对濒危植物七子花(Heptacodium miconioides)的花枝构成及不同类型花序的结实状况进行了研究。结果显示：(1)在黄经洞(种群B),花枝的营养生长旺盛,单枝的花序数和花数多,平均为23．5个和278朵;在狮子岩坑(种群A)．开多轮花的花序比例高．但花枝的花序数较少,单枝的开花数最少。(2)七子花的结实率很低．可育胚珠的平均结实率均在40％左右,且结实率与花序的开花数量呈显著的负相关关系。(3)花序类型对种子重量也有一定的影响,其中种群A的Ⅰ型花序所结果实的种子最大,但这些种子的胚也未发育完全。因此,七子花成为濒危物种的关键并不是结实的数量,而是结实的质量。     

光温对3种醉鱼草属植物种子萌发的影响

密蒙花、七里香和大序醉鱼草3种醉鱼草的种子细小,千粒重仅12～58 mg,但形态有差异,可以进行种类区分.种子充分吸水后,在20～25℃条件下于5～10 d内就能迅速萌发,15 d时发芽率达到75%以上.光照强度21.6～32.4μmol·m-2·s-1和光照时间12～16 h·d-1均可显著提高七里香种子的发芽率,但光照抑制密蒙花种子萌发,而对大序醉鱼草种子萌发没有明显影响.种子苗移栽后3～5 d,真叶转绿,90%的幼苗可形成健壮植株.     

七筋菇种群的克隆多样性及其与生境因子的相关性分析

利用ISSR（Inter-Simple Sequence Repeat）分子标记检测了七筋菇种群的克隆多样性,同时对克隆多样性指数与生境因子进行了相关性分析．结果表明,种群和种水平上每个基因型含有的个体数（克隆分株）分别为1．12和1．149,16个种群均为多克隆种群．检测到的基因型100％为局部分布,群体间的克隆分化较大．七筋菇种群的克隆多样性很高,Simpson指数平均为0．975．基株分布为游击型的克隆构型．由基株数据计算的种群遗传多样性与由分株计算的结果一致,进一步确认了不同七筋菇种群间存在着遗传分化．种群中不时的幼苗更新及自交不亲和,可能是维持七筋菇种群内基因型多样性的重要原因．相关性分析表明,Simpson指数与样地土壤中的酸碱度pH值呈显著的正相关（P〈0．05）,与其他环境因子的相关性不显著．     

基于叶绿体DNA序列分析东亚七筋姑的遗传进化

通过对东亚七筋姑(Clintoniaudensis Trautv.etMey.)19个居群的cpDNA基因间隔区(cpDNA intergenic regions)rpl20-rps12和trnL-F进行序列分析,结果表明,当空位(Gap)作缺失处理时,trnL-F全序列排序后的长度为754个位点,G C含量为35.2%～35.8%,rpl20-rps12序列排序后长度为814bp,G C含量为34.1%～34.3%.聚类结果显示四倍体居群没有单独聚为一支,其多倍体可能是同源多倍体,起源方式属于异地多起源.     

海南七差地区植被数量分类

在对海南黎族七差地区野外植被调查基础上,得到物种数据和环境信息,并应用PC-ORD软件对样地数据进行分类排序.根据<中国植被>分类原则,并结合<广东植被>等相关资料,对分类结果作适度调整后,建立了七差地区植被分类系统.该地区植被可归入3个植被型组、8个植被型、2个群系组和6个群系.6个群系分别为木棉 厚皮 鸡尖群系(Form.Bombax ceiba Lannea coromandelica Terminalia nigrovenulosa)、南亚松群系(Form.Pinus latteri)、白茅群系(Form.Imperata arundinacea)、厚皮树 鹧鸪麻 木棉群系(Form.L.coromandelica Kleinhovia hospital B.ceiba)、陆均松 线枝蒲桃 竹叶青冈群系(Form.Dacrydium pierrei Syzygium araiocladum Cycloba-lanopsis bambusaefolia)、青梅 细仔龙 高山榕 白茶群系(Form.Vatica mangavhapoi Ameslodendron chinense Ficus altissima Koilodepas hainanensis).NMDS排序第一轴反映了土壤湿度梯度,第二排序轴反映了海拔高度梯度,样地在排序轴分布与实际情况相吻合.该地区植被形成、分布及变化与其特殊的气候条件及少数民族独特的生产方式有关系.