肺纤维化形成中整合素相关激酶的表达与上皮-间充质细胞转化

目的观察整合素相关激酶(ILK)在博莱霉素致小鼠肺纤维化中的动态表达,探讨其在肺纤维化中与上皮-间充质细胞转化(EMT)的关系。方法将32只小鼠随机分成正常对照组,博莱霉素(BLM)致肺纤维化组。后者以博莱霉素腹腔注射致肺纤维化,正常对照组仅在相同处理条件下注射生理盐水。治疗的第28天和40天处死动物取出肺组织,用苏木精-伊红(HE)和Massontrichrome染色,分别观察实验动物肺炎症和纤维化的程度,以样本碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸的量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ILK mRNA表达、免疫组化检测不同实验组小鼠ILK,并同时检测间充质细胞标记物α-平滑肌肌蛋白(α-SMA)和上皮细胞标记物上皮钙粘附素(E-Cad)的表达。结果组织学结果显示小鼠肺组织胶原含量在第28d明显增加,第40d达高峰,羟脯氨酸测定动态增高。与正常对照组比较,肺纤维化组中ILK、α-SMA蛋白表达增高(P<0.01),E-Cad的蛋白表达降低(P<0.01)。RT-PCR结果显示肺纤维化组ILKmRNA的表达显著增高(P<0.01)。ILK的表达不仅与羟脯氨酸的含量成正相关(r分别为0.867、0.886,P均小于0.05),也与α-SMA/E-Cad比值成正相关(r分别为0.830、0.844,P均小于0.05);α-SMA与E-Cad成负相关(r分别为-0.820、-0.833,P均小于0.05)。结论ILK在小鼠肺纤维化中表达与纤维化的程度呈正相关增高,表明其可能是肺纤维化形成的促进因子,且由于ILK与α-SMA/E-Cad比值成正相关,推测ILK在肺纤维化形成中的机制可能与促进EMT有关。     

重组人生长激素治疗儿童特发性矮小症的疗效及对血清Ghrelin和IGF-1水平的影响

目的:探讨重组人生长激素(rhGH)治疗儿童特发性矮小症(ISS)的疗效及对血清饥饿激素(Ghrelin)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平的影响。方法:选取2014年1月-2016年8月期间我院收治的ISS患儿114例为研究对象。按照随机数字表法分为实验组(n=57)与对照组(n=57)。其中对照组给予常规治疗,实验组在对照组基础上联合rhGH治疗,两组疗程均为12个月。比较两组患儿的临床疗效,同时观察并对比两组患儿治疗前后血清Ghrelin以及IGF-1水平。结果:治疗后两组患儿身高、生长速率均较治疗前升高,且实验组高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗后两组患儿体重、总甲状腺素、骨龄、空腹血糖水平较治疗前比较差异无统计学意义(P0.05)。治疗后两组患儿血清Ghrelin水平较治疗前降低,且实验组低于对照组,血清IGF-1水平较治疗前升高,且实验组高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。实验组不良反应发生率为5.26%,与对照组的0.00%比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:ISS患儿应用rhGH治疗效果满意,可明显改善ISS患儿体内血清IGF-1、Ghrelin水平,安全无副作用,促进患儿健康成长。     

肺部微生物组成与特发性肺纤维化生存率相关性研究

目的运用16SrRNA基因测序技术分析特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)患者支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)的微生物组成,研究肺部微生物组成与IPF预后相关性。方法选择2016年3月-2018年3月在本院诊治的IPF患者39例,作为IPF组,以体检健康成年人为对照组,40例。收集患者临床资料、生存时间,检测治疗前肺泡灌洗液中微生物组成。结果 IPF组Shannon指数明显高于对照组(P=0.024)。IPF组患者奈瑟球菌、金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌、肺炎链球菌检出率明显高于对照组(P=0.005,0.003,0.003,0.000)。39例IPF患者随访时间为2～60个月,随访结束时患者死亡20例,存活19例,生存率为48.7%,平均生存时间39.8个月,奈瑟球菌、金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌、肺炎链球菌检出与IPF患者的预后成反比。结论 IPF患者肺内微生物多样性增加,奈瑟球菌、金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌、肺炎链球菌检出与IPF患者生存率呈负相关,可能成为改善IPF的潜在靶点。     

LRRC15影响A549细胞自噬的作用研究

特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种致病原因不明、进行性、慢性不可逆的间质性肺疾病。为探讨富含亮氨酸重复蛋白15(leucine-rich repeat-containing protein 15,LRRC15)在IPF的作用及调节机制,本研究构建了博来霉素(bleomycin,BLM)诱导的小鼠肺纤维化和A549细胞损伤模型,检测了LRRC15的表达变化。转染siLRRC15后分别采用MTT、GFP-RFP-LC3双荧光标记系统和免疫印迹等方法检测了细胞活性和自噬的变化。结果表明：BLM处理后,小鼠肺组织和A549细胞中LRRC15表达显著上调;将设计和合成的siLRRC15转入A549细胞,LRRC15的表达极显著降低,可以部分恢复BLM引起的细胞损伤;BLM处理A549细胞后,LC3-II和P62蛋白呈现上升的趋势;GFP-RFP-LC3双荧光标记检测发现,BLM处理后自噬体数量明显增多;进一步用siLRRC15处理A549细胞后发现,自噬关键蛋白LC3-II、ATG5、ATG7的表达增加,P62蛋白表达下调,自噬流的强度增加...     

醋酸曲普瑞林与醋酸甲地孕酮片治疗特发性中枢性早熟临床疗效比较

目的:对比醋酸曲普瑞林与醋酸甲地孕酮片治疗特发性中枢性早熟的临床效果。方法:选取我院自2014年2月~2015年2月期间收治的特发性中枢性早熟患儿92例,采取随机数字表法分为2组,其中46例患儿接受醋酸甲地孕酮片治疗(对照组),46例患儿接受醋酸曲普瑞林治疗(观察组),治疗6个月后,观察对比两组患儿的生长指标及性激素水平变化,并统计其不良反应发生情况。结果:观察组治疗后的体重、身高、生长速率、预测身高、骨龄/实际年龄(BA/CA)等生长指标优于对照组(P0.05);两组患者治疗后的雌激素(E2)、黄体生成素(LH)及促卵泡成熟素(FSH)水平较治疗前有明显改善(P0.05),且观察组治疗后的E2、LH、FSH水平优于对照组(P0.05);两组均未见明显不良反应发。结论:相比醋酸甲地孕酮片,醋酸曲普瑞林治疗特发性中枢性早熟患儿临床效果更好,可更好延缓患儿骨龄成熟,降低其性激素水平,在临床中具有良好的应用价值。     

博来霉素诱导G57BL/6与ICR小鼠肺间质纤维化模型的比较

目的探讨C57BL/6与ICR小鼠在博来霉素(BLM)致肺纤维化过程中的种属差异。方法 8周龄雌性C57BL/6小鼠19只,ICR小鼠16只,分别经尾静脉一次性注射BLM150mg/kg,观察每组小鼠体重、生存率及肺组织病理改变。结果①C57BL/6与ICR小鼠最低体重分别发生在静脉注射处置后的7d和5d,最低体重分别为注射前的65.46%和73.21%,两组间无显著的统计学差异。②C57BL/6与ICR小鼠的生存率分别为36.84%和56.25%,两组间存在显著的统计学差异。③C57BL/6小鼠BLM注射后28d,在胸膜下及血管周围形成广泛、稳定的间质纤维化病理改变,而ICR小鼠肺组织未见明显纤维化形成。C57BL/6小鼠肺纤维化病理评分明显高于ICR小鼠(P0.001)。结论 BLM诱导的肺纤维化作用在C57BL/6与ICR小鼠间存在着明显的种属差异。C57BL/6小鼠较ICR小鼠更适于复制博来霉素诱导的肺纤维化动物模型。     

肺结核并发纤维化患者BALF和血清MMP及TIMP-1检测的临床意义

目的:探讨肺结核并发纤维化患者支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清中基质金属蛋白9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制剂l(TIMP-1)含量与肺纤维化及肺功能的关系.方法:酶联免疫(ELISA)法检测我院2009年3月至2009年9月68例肺结核并发纤维化患者(纤维化组)及30例无肺部疾病患者(对照组)的支气管肺泡灌洗液及血清中MMP-9及TIMP-1的含量,同时进行肺功能检查.结果:纤维化组患者的BALF及血清MMP-9的含量与对照组怠者相比无统计学意义,但纤维化组患者的BALF及血清TIMP-1的含量显著高于对照组(P＜0.05),且纤雏化组患者的BALF及血清MMP-9/TIMP-1比值低于对照组(P＜0.05).患者的动脉血氧分压、肺活量等肺功能指标与TIMP-1呈正相关,而与MMP-9/TIMP-1比值呈负相关(P＜0.05).结论:肺结核患者肺纤维化的发生可能与TIMP-1水平升高及MMP-9/TIMP-1比值降低相关,降低TIMP-9的水平可能是防止肺结核惠者并发肺纤维化的一种新途径.     

纤维连接蛋白能通过ILK和p-smad2诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化

目的:探讨纤维连接蛋白(Fibronectin,Fn)能否诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化及其可能机制。方法:在包被有Fn的培养皿上培养肺成纤维细胞,并在不同的时间点(6h、12h、24h、48h),在应用和不应用TGF-βR激酶抑制剂条件下,采用免疫细胞化学、western blot等技术检测相关蛋白的表达情况。结果:肺成纤维细胞在Fn上生长72h后,a-SMA的表达显著增加(p0.05),ILK在6h即出现表达,持续到12h(p0.05),p-Smad2在12h出现表达,持续到24h(p0.05),SB525334能够部分抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化过程中a-SMA的表达(p0.05)。结论:Fn能通过ILK和p-smad2诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化。     

重组人生长激素治疗特发性矮小症的临床疗效及安全性研究

目的 探讨重组人生长激素治疗特发性矮小症的临床效果及安全性. 方法 选取2018年2月～2021年2月收治的86例特发性矮小症患儿为研究对象,随机分为对照组和观察组,每组43例.对照组给予常规治疗,观察组使用重组人生长激素治疗,比较两组的治疗效果. 结果 治疗后,观察组的GV、PAH、Ht-SDSBA、Ht-SDSCA...