保加利亚乳杆菌原生质体的制备与回复研究

目的:通过对保加利亚乳杆菌的原生质体的制备和回复的方法学探讨,为乳杆菌的基因操作和其相关研究提供技术思路和实验条件.方法:用酶浓度分别为1 μg/ml、4 μg/ml、10μg/ml Mutanolysin(变溶菌素)对保加利亚乳杆菌进行处理,脱去细胞壁以探讨其原生质体形成与时间和酶浓度的关系;并选用较为适宜的酶浓度制备其原生质体,在自制的双层再生培养基上观察其原生质体在普通培养、CO2培养、厌氧培养时的回复生长情况.结果:保加利亚乳杆菌对Mutanolysin较敏感,酶浓度为1 μg/ml时只需40min大部分菌体形成原生质体.经1μg/ml Mutanolysin处理后制得的保加利亚乳杆菌原生质体倾入自制的双层再生培养基中,置于CO2和厌氧环境条件下培养能很好的回复生长.结论:本文的研究为乳杆菌的基因工程方面的研究提供了相关的技术条件和实验基础.     

肠毒素大肠杆菌定居因子CS6蛋白的纯化和抗体制备

将大肠杆菌E519／66A在CFA固体培养基上培养,收菌后经热水浴脱蛋白、硫酸铵分级盐析、超速离心及S-200柱纯化,获得了相对分子量约14600的高纯度CS6蛋白。用其免疫家兔,然后颈动脉采血。ELSIA法检测血清,测得效价为1：32000。Westem印迹证实CS6抗原蛋白可特异性结合抗CS6多克隆抗血清。本研究建立了分离纯化肠毒素大肠杆菌定居因子CS6抗原蛋白的有效方法;获得了高纯度的野生型定居因子抗原CS6蛋白及相应的多克隆抗血清。对于进一步研究肠毒素大肠杆菌腹泻疫苗具有重要意义。     

TRAP蛋白的抗体制备和初步应用

金黄色葡萄球菌分泌的RAP蛋白通过其靶分子TRAP蛋白的磷酸化来激活RNAⅢ的转录。用TRAP蛋白免疫家兔得到效价为1：128000的多抗血清。纯化后的抗体可以特异识别不同菌株的TRAP蛋白,并抑制TRAP蛋白磷酸化,降低金黄色葡萄球菌外毒素的分泌。     

制备高纯度、高产率总RNA的简易方法1)

异硫氰酸呱和氯化物为最有效的蛋白质变 性剂w10 Cox首先用肌盐氯化物提取RNA['10 Chirgwin用强变性齐U和异硫氰酸呱从富含RNuse 的组织细饱中提取完整RNA [410 Han等 人证明异硫氰酸肌在低温下提取RNA是有效 的，并省去了超速离心['1o Feramisco提出了结 合呱盐与热酚来分离RNA的方法［[61。本文报 道的是一种新的、快速有效的、结合了异硫氰酸 狐、氯仿和酚提取RNA 的方法。它不同于 Feramisc。的肌剖：热酚法的地方是采用了一次 性抽捉，在4小时内制备出高纯度、高产率而未 降解的RNA，由于省略了肌盐一Cscl超速离心 步骤，此方法既适合于从大样本（30g）组织也 适合从微量样本（3mg组织或106个细胞）中分 离RNA     

中国科学院昆明动物研究所鱼类模式标本名录

对文献资料收集和标本整理结果显示,截至2013年初,中国科学院昆明动物研究所鱼类模式标本有178种、2131号,隶属于4目11科。其中种类最多的是鲤科,有71种、1103号;其次为条鳅科52种、556号。标本主要采自云南、四川、贵州、广西、湖南、重庆、甘肃和新疆等地。为方便科学研究和学术交流,该文列出馆藏模式标本名录。     

一种简便制作小型鱼类形态标本的方法

本文介绍一种简便制作小型鱼类形态标本的方法.包括以下步骤:1.制作前准备;2.剥离皮肤;3.支撑架制作与放置;4.缝合;5.配制填充材料;6.填充;7.装义眼与整理姿态;8.干燥,上色,生境制作与固定.与其他制作小型鱼类形态标本的方法相比,新方法中先缝合再填充的步骤,难度小,容易控制填充物的量,做出的标本形态更逼真.