脂肪酸酰化修饰胰岛素的纯化

目的：脂肪酸酰化修饰的胰岛素类似物是常见的获得长效胰岛素的手段,但因其反应位点的偏差易产生多种传统纯化工艺较难以分离的杂质。本文探索以聚苯乙烯类有机聚合物填料为固定相纯化脂肪酸酰化修饰的胰岛素方法。方法：经过填料对比,有机溶剂浓度和pH选择后,再经过一系列正交试验优化,HPLC方法检验纯度和含量,质谱分析定性终产品,从而确定最佳条件。结果：经过对不同厂家不同型号的聚苯乙烯类有机聚合物填料的比较,填料选定采用纳微UniPs30．300为最佳,其目的蛋白吸附量比为6．32mg／ml,洗脱率为95．27％。在一系列的梯度实验中证实采用30-50％异丙醇浓度最佳。之后的pH对比得出。pH在4．0以下才能分离得到纯度在95％以上的产品。在以上一系列的单因素实验基础上,最后经过正交实验优化证实最佳的洗脱方案为采用A相为合25mM硫酸铵的0．1M磷酸盐缓冲液,pH3．0;B相为异丙醇流动相,洗脱梯度为30-50％B的10CV洗脱,流速60cm/h。放大验证可以得到纯度大于97．5％,回收率70％以上的结果。结论：此方法具有分离效果好,成本低,易于放大的优点。     

浅议沙葱多糖的提取纯化及纯度鉴定

沙葱是蒙古草原生长的一种具有抗菌、抗病毒、增强免疫力的绿色植物,它的生长量巨大,而且具有很大的功效,是人们进行科学研究继而大力开发的野生植物,其体内含有丰富的糖分,能够增强免疫力,所以一直以来人们便致力于如任提高沙葱糖分的提取、纯化。最常见的沙葱糖分提取法师水提取法,正确的时间、温度,液料比例下就可以从沙葱中提取糖分。一般来讲,以一比二十液料比例进行配料,在九十度的温度条件下,经过六个小时的提取便可以从沙葱中提取糖分。按照正确的提取工艺进行操作,做多可以提高得糖率,最高可达到百分之二点五六。下面我们就沙葱糖分的提纯以及纯度鉴定来进行深入的探讨。     

95％乙醇提取白胡椒中胡椒碱的工艺研究

目的:优选从白胡椒中提取纯化胡椒碱的工艺.方法:采用95％乙醇对白胡椒中胡椒碱提取及纯化,利用高效液相法对制得的胡椒碱的纯度进行测定,以胡椒碱的提取率和纯度为指标,从而优选出从胡椒中提取纯化胡椒碱的工艺.结果:以100 g白胡椒为例,用95％的乙醇提取2次,每次分别提取lh,采用乙醇与胡椒的体积质量比为8∶1,6∶1,制得的胡椒碱粗品,在95％乙醇中60℃溶解,常温下冷却结晶1次得到胡椒碱的纯度90％以上.结论:本实验所选用的工艺简单,制得产品纯度高,适合大规模生产.     

SD大鼠乳鼠皮层神经元细胞原代培养模型的建立及鉴定

摘要 目的：探讨SD大鼠乳鼠皮层神经元细胞原代培养方法,并鉴定其培养效果,以期建立一种生物学功能良好的体外细胞实验模型。方法：取出生24 h的SD大鼠乳鼠,分离出大脑皮层,在胰酶消化之前先进行离心,然后将胰酶消化后多次离心得到的细胞悬液接种于L-多聚赖氨酸包被的培养皿和共聚焦皿中,以加B27的Neurobasal-A培养基进行神经元细胞的原代培养,倒置显微镜下观察培养细胞的生长状态;通过免疫荧光组化的方法采用神经元标记物MAP-2进行神经元纯度的鉴定;在导入Fluo4-AM的原代神经元细胞,观察电刺激后胞内钙离子信号的变化,以验证神经元细胞的生理状态。结果：采用此方法培养的神经元细胞紧密贴壁、分散均匀、状态良好,神经元细胞周围突起相互连接形成网络;经MAP-2免疫荧光组化技术鉴定神经元的纯度达到95%以上;胞内钙离子信号的变化提示所培养的神经元具有良好的生物学功能。结论：该方法能获得纯度较高并且生物学功能良好的原代培养的SD大鼠乳鼠皮层神经元细胞。     

尾叶桉与窿缘组树种间杂交种的生长特征

选定组配树种对桉树杂交种的特性起决定作用,但不同种间杂交种的生长表现常常不容易预测。为掌握华南地区桉树重要树种间杂交种的生长特征,促进桉树杂交育种的精准化,该文以父本为混合花粉的人工杂交种为遗传材料,以尾叶桉×巨桉为对照,进行了尾叶桉与桉树窿缘组树种(布拉斯桉、细叶桉、钝盖赤桉、昆北赤桉)的4种组配杂交种的生长特征研究。结果表明:在材积生长量上,尾叶桉与窿缘组树种杂交种低于尾叶桉×巨桉,但其内部树种间差异显著(P0.05),其中尾叶桉×昆北赤桉具有显著优势;尾叶桉与窿缘组树种杂交种的树高、胸径均显著小于尾叶桉×巨桉,但其高径比显著大于尾叶桉×巨桉(P0.05);尾叶桉与窿缘组树种杂交种具有高的和一致的保存率,且在不同组配间、家系间(组配内)均无显著差异,5年生值为84.4%～89.6%;尾叶桉与窿缘组树种杂交种的5年生材积的平均变异系数约为64%,组配间、家系间差异大,都大于尾叶桉×巨桉。尾叶桉与窿缘组树种杂交种的速生性、树形等与尾叶桉×巨桉间存在显著差异,尾叶桉与窿缘组树种杂交种的组配、家系间具有显著的生长差异,可为桉树遗传改良提供丰富的多样性。     

桑蚕品种纯度序贯抽样检验方案设计

桑蚕一代杂交种杂交率检验存在抽样方案和检验方法两方面的缺陷,无法准确、及时地检验一批蚕种的品种真实性和纯度．本文提出了使用DAN检验方法进行品种纯度检验,研究设计了适合的序贯抽样检验方案．该方案保证了目前行业标准检验方法的可靠性和精确度．使用该方案,在蚕种纯度很高的情况下,只需检验很小的样本就能通过,非常适合个体检验准确而成本相对较高的DNA检测方法．     

从动物组织提取高质量总RNA方法的改进

RNA提取技术是分子生物学研究中的重要实验技术。介绍一种高纯度、高产量的从动物组织中提取总RNA的改进的方法,该法实用性强、重复性好。提取的RNA无DNA等污染物,其产量、纯度完全能满足分子克隆和基因表达研究的需要。利用改进后的方法提取牛组织的总RNA,研究了NRDR基因在牛组织中的表达分布。     

RAPD及SRAP两种分子标记技术对苦瓜杂交种纯度的鉴定分析

以F1代苦瓜杂交种如玉11号及其亲本为材料,利用RAPD及SRAP两种分子标记技术对这3种苦瓜基因组DNA进行比较分析,以获得该杂交种及其亲本（或母本）差异目的基因片段。经过多次对该3种苦瓜叶片DNA提取,PCR扩增及其PCR产物的琼脂糖凝胶电泳分析,在供试的46个RAPD引物及121对SRAP引物中,筛选出1个RAPD引物及1对SRAP引物能区分该苦瓜杂交种及其母本种子,通过进一步验证分析,证明该两种分子标记的特异引物可作为如玉11号苦瓜杂交种子的纯度鉴定之用。     

特优系列杂交稻种子纯度的鉴定

用等电聚焦技术(IEF)对特优系列品种及其亲本种子蛋白进行了分析,2-氯乙醇不能提取F1代的亲本互补蛋白带,而用40%的2-氯乙醇与15%的巯基乙醇混合液则能有效提取F1代亲本互补带.采用此种互补谱带,可鉴定"特优524"和"特优721"品种的种子样品,其结果与田间小区种植鉴定的差异较小.     

镉在南美蟛蜞菊、蟛蜞菊及其杂交种中的迁移和分布特征

为了解植物对镉的吸收和迁移特性,用200μmol/L镉处理蟛蜞菊(Sphagneticola calendulacea)、南美蟛蜞菊(S.trilobata)及其杂交种,研究了其对镉的吸收、迁移与分布的差异.结果表明,随着镉处理时间的延长,3种植物茎和叶中的镉含量逐渐上升,叶片的镉含量逐渐与茎相当,而根部的镉含量一直是...