树突状细胞递呈抗原的分子机制

树突状细胞（ＤＣｓ）是重要的抗原递呈细胞,其参与免疫应答的机制十分复杂,首先要形成“三分子复合体”,加上ＤＣｓ表达的其他刺激因子和粘附分子等信号的传递才能完成。ＤＣｓ尚有一些其他功能,如表达ＩｇＥ受体或作为感觉受体等,其与其他非职业性ＡＰＣ有明显不同。     

Epstein─Barr病毒膜抗原在中国仓鼠卵巢（CHO）细胞中的表达

将切去３’端穿膜序列的ＥＢ病毒膜抗原（ＭＡ）基因,插入ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ质粒的ＳＶ４０早期启动子下游,构建了真核表达载体ｐＳＶ２－ｄｈｆｒＧＰＴＲ,使两个ＳＶ４０早期启动子分别调控ＭＡ和二氢叶酸还原酶（ｄｈｆｒ）基因。将该重组质粒转化ＣＨＯ－ｄｈｆｒ细胞,在选择培养基中筛选阳性克隆,用氨甲喋呤加压扩增,建立了表达ＥＢＶ－ＭＡ的克隆细胞系。ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析证明,所表达的蛋白的分子量大约为３４０ｋｄ和２２０ｋｄ。经过细Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ２Ｂ琼脂糖凝胶层析初步纯化的抗原与福氏佐剂混合免疫小鼠,２周后小鼠血清中出现明显的ｇｐ３４０／２２０特异性抗体,表明切去嵌膜区结构的ＥＢＶ－ＭＡ基因在ＣＨＯ细胞中的表达产物具有同天然膜抗原相似的分子量大小、糖基化程度、免疫特异性和免疫原性,可望成为ＥＢ病毒人用基因工程亚单位疫苗。     

抗原捕获聚合酶链式反应（AC－PCR）直接分型检测单纯疱疹病毒

用抗单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）型共同性ｇＣ和ｇＤ羊克隆抗体（ＭｃＡｂ）,包被即Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管,捕捉ＨＳＶ,同时加入３个引物：一个是ＨＳＶ─１／ＨＳＶ─２型共同性上游引物,另两个分别是ＨＳＶ─１和ＨＳＶ─２型特异性下游引物。借此建立了能直接分型检测ＨＳＶ的抗原捕获聚合酶链式反应（ＡＣ─ＰＣＲ）。ＨＳＶ─１的扩增产物为４７７ｂｐ,ＨＳＶ─２的为３９９ｂｐ两型病毒经ＡＣ─ＰＣＲ扩增后产生分子量不同的ＤＮＡ片段,致使ＡＣ─ＰＣＲ能直接分型检测ＨＳＶ。ＨＳＶ─１和ＨＳＶ─２扩增产物的克隆和序列分析表明,本方法特异性好。用本法检测Ｂａｌｂ／ｃ幼鼠中枢神经系统ＨＳＶ感染的脑标本,进一步证实本方法不仅敏感、特异,而且分型准确。     

抗原加工和提呈的“操纵子”

在人类及鼠的主要组织相容性复合物（MHC）II类在基因区域内,人们新发现4个位置靠近的基因涉及MHC I类分子所结合的内源性免疫原肽段的加工和提呈,LMP－2和MLP－7基因产物与细胞内构成蛋白酶复合体的某些亚基具有很大的同源性,可能与降解产生内源性免疫原肽段有关,而TAP－1及TAP－2基因编码产物形成的异二聚体蛋白复合物在内质网上构成穿膜通道,负责将加工好的内源性免疫原肽段转运入内质网,与MHC I类分子相互作用,本就这两种4个基因及其产物的结构与功能给予介绍。     

抗原捕获聚合酶链式反应（AC—PCR）直接分型检测单纯疱疹病毒

用抗单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）型共同性ｇＣ和ｇＤ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）,包被Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管,捕捉ＨＳＶ,同时加入３个引物：一个是ＨＳＶ－１／ＨＳＶ－型共同性上游引物,另两个分别是ＨＳＶ－１和ＨＳＶ－２型特异性下游引物。借此建立了能直接分型检测ＨＳＶ的抗原捕获聚合酶链式反应（ＡＣ－ＰＣＲ）。ＨＳＶ－１的扩增产物为４７７ｂｐ,ＨＳＶ－２的为３９９ｂｐ,两型病毒经ＡＣ－ＰＣＲ扩增后产生分子量不同的ＤＮ     

用人工合成的丁型肝炎病毒抗原多肽检测丁肝病毒IgM抗全及其初步应用

用人工合成的丁型肝炎病毒抗原（ＨＤＶ－Ａｇ）肽建立了检测抗ＨＤＶ－ＩｇＭ抗体的ＥＬＩＳＡ方法。本法操作简便、快速、重复性好、特异性强,与抗ＨＡＶ－ＩｇＭ＇抗ＨＢｃ－ＩｇＭ、抗ＨＢｓ－ＩｇＭ、抗ＨＣＶ－ＩｇＭ、抗ＣＭＶ－ＩｇＭ、抗ＲＶ－ＩｇＭ、类风湿因子（ＲＦ）及抗核抗体（ＡＮＡ）阳性血清均不起反应,且可被２－巯基乙醇阻断而不起反应。经初步临床应用,３１例正常人血清抗ＨＤＶ－ＩｇＭ全部阴性,２８例慢     

流行性出血热患者皮肤组织内病毒抗原及免疫复合物检测与意义

应用常规病理、免疫病理及超微病理技术,对３３例流行性出血热（ＥＨＦ）患者皮肤活检标本的病理变化及病毒抗原、免疫复合物进行观察,同时与血清病毒抗原、抗体及循环免疫复合物检出情况进行比较。在２３例ＥＨＦ患者皮肤微血管内皮细胞中检出病毒抗原,部分组织中可同时检出免疫球蛋白及Ｃ３,少数组织仅能检出病毒抗原或免疫球蛋白。配对血清小也可检出ＥＨＦ病毒抗原、抗体及循环免疫复合物。组织及血清免疫复合物形成与血清补体Ｃ３水平下降有关,组织内肥大细胞脱颗粒与血清ＩｇＥ水平升高相关,提示多种变态反应参与了流行性出血热的发病机制。     

LFA—1在胸腺细胞活化信号传导中的功能研究

在Ｃｏｎ Ａ和固相抗ＣＤ３单抗刺激系统中,应用抗ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１单抗,研究其在胸腺细胞活化中的功能作用,结果证明,培养初期加入可溶性抗ＬＦＡ－１可完全阻断Ｃｏｎ Ａ活化腺细胞增殖,对固相抗ＣＤ３单抗诱导的胸腺细胞活化也表现也相同的抑制效应,但对Ｃｏｎ Ａ刺激２４ｈ后的胸腺细胞应答以及ＩＬ－１＋ＩＬ－２诱导的胸腺细胞直殖无影响,在可溶性抗ＬＦＡ－１单抗的存在下,Ｃｏｎ Ａ诱导胸腺细胞合成ＩＬ     

乳腺癌单克隆抗体AF9抗原的特性及分布

对抗人乳腺癌单抗AF9识别的抗原特性及分布进行了研究,结果表明AF9抗原是由糖、脂及蛋白质组成的复合蛋白质,不耐热;AF9识别的抗原决定簇不存在于铁蛋白及癌胚抗原;蛋白质印迹检测表明AF9识别的抗原有4种成分,分子量分别为51 000,56 000,67 000,73 000.免疫组化ABC染色显示该抗原主要存在于乳腺癌细胞的胞浆及胞膜,在部分其它种类肿瘤组织中也可检测到,但在所检正常组织中未见到.AF9抗原可能是新的乳腺肿瘤相关抗原.     

酶联免疫吸附技术(ELISA)对大豆根瘤菌的鉴定

本文用直接ELISA法检测大豆根瘤菌USDA 110和RTt 50的纯培养菌体和根瘤。确定了该试验的最佳工作条件:酶标结合物HRP—Ab 110和HRP—Ab50的工作稀释度分别为1:3200和1:800,抗体Ab 110和Ab 50的工作稀释度分别为1:3200和1:800,抗原USDA 110和RTt 50的最适工作浓度均为6×10~7细胞/ml。该法能够特异地检测和区别慢生型和快生型大豆根瘤菌。在这两种类型的大豆根瘤菌中,同种内的少数菌株存在交叉反应,通过吸收可以消除,从而使ELISA的检测达到菌株