人胰腺癌组织中PFKFB3表达及其与MVD相关性的研究

目的:检测人胰腺癌组织6磷酸果糖激酶2/果糖双磷酸酶2同工酶3(PFKFB3)的表达及微血管密度(MVD),并探讨二者临床意义和相关性。方法:采用免疫组化SP法检测41例胰腺癌组织和11例癌旁组织石蜡块中PFKFB3的表达情况,并对CD34标记阳性的血管进行微血管密度计数,分析PFKFB3、MVD与胰腺癌临床病理特征的相关性及二者之间的相关性。结果:胰腺癌组织和癌旁组织中PFKFB3的阳性表达率分别为63.41%和9.09%,胰腺癌组织显著高于癌旁组织(P0.01);PFKFB3呈阳性和阴性表达的胰腺癌组织MVD值分别为(49.12±12.04)、(35.40±8.12),两者比较差异有统计学意义(P0.01)。PFKFB3表达与胰腺癌的分化程度显著相关(P=0.035),MVD与胰腺癌TNM分期及淋巴结转移显著相关(P0.05)。Spearman等级相关分析显示:胰腺癌PFKFB3表达与MVD值呈显著正相关(r=0.551,P0.01)。结论:胰腺癌组织中PFKFB3呈高表达,可能通过促进血管生成,在胰腺癌的发生发展、转移过程中发挥重要作用,并可能作为胰腺癌预防、治疗和预后评估的参考指标。     

AIBP基因表达下调促进心肌微血管内皮细胞血管新生

目的:探讨阻断载脂蛋白A-I结合蛋白(AIBP)的表达后对心肌微血管内皮细胞(CMECs)血管新生的作用。方法:消化法分离SD大鼠CMECs,通过慢病毒介导的siRNA转染CMECs下调AIBP基因表达,并设立空白对照组及阴性转染组。RT-PCR法检测AIBP基因的表达;CCK-8比色法检测细胞增殖;Transwell小室评价细胞迁移能力;成管实验评价血管新生能力。结果:RT-PCR结果显示,与空白对照组及阴性转染组相比,转染组CMECs中AIBP表达显著降低(P0.01);CCK-8结果显示,与空白对照组及阴性转染组相比,转染组CMECs增值水平显著增高(P0.01);Transwell法结果显示,与空白对照组及阴性转染组相比,转染组CMECs迁移能力显著增高(P0.01);成管实验显示,与空白对照组及阴性转染组相比,转染组CMECs成管能力显著增高(P0.01)。结论:抑制AIBP表达可以明显促进CMECs增殖,促进其迁移和成管。     

小鼠脑微血管内皮细胞与新生隐球菌GXM作用后基因表达谱分析

目的探索新生隐球菌GXM能否影响脑微血管内皮细胞基因的表达,为进一步研究隐球菌嗜中枢性的分子机制提供线索。方法使用Roche Nimble Gen 12×135K小鼠基因表达谱芯片,筛选小鼠脑微血管内皮细胞系b End.3与不同浓度新生隐球菌GXM作用后差异表达的基因;结合基因本体论(Gene Ontology),使用top GO进行差异基因GO分析,结合GO语义挖掘与隐球菌侵袭中枢神经系统能力相关的差异表达基因的信息;采用荧光实时定量PCR对重要基因PIK3C2G和ADAMDEC1的表达水平变化加以验证。结果 b End.3细胞与新生隐球菌GXM作用前后基因表达对比发现,实验组GXM(90μg/m)组总共有402个基因表达上调,296个基因表达下调,GXM(180μg/m)组总共有421个基因表达上调,564个基因表达下调,细胞膜、细胞骨架、磷酸肌醇-3-激酶活化、1-磷酸肌醇-3-激酶活化、细胞紧密连接等生物过程差异表达基因较为富集;对PIK3C2G基因和ADAMDEC1基因表达水平变化进行荧光定量PCR验证,结果与芯片结果一致,基因表达水平不同程度上升,且与GXM浓度正相关。结论新生隐球菌GXM能够影响脑微血管内皮细胞基因表达,PIK3C2G基因、ADAMDEC1基因表达上调可能和隐球菌穿越血脑屏障有关。     

中药活性成分改善缺血缺氧所致脑微血管内皮 屏障功能损伤的研究进展

缺血性脑卒中发生时,基质金属蛋白酶等效应分子以及炎症反应、氧化应激等会破坏血脑屏障,增加缺血区有害产物进入脑组织, 产生脑水肿,引起继发性脑损伤。所以,保护与维持脑微血管内皮屏障功能的完整性,是脑卒中防治的重要策略之一。从调节效应分子 和相关信号通路的角度出发,综述中药活性成分对模拟缺血性脑卒中的体内外脑微血管内皮屏障功能损伤模型的改善作用研究进展,以 期为进一步阐释中药活性成分防治缺血性脑卒中的作用机制以及新药创制提供参考和依据。     

毒力岛基因ibeT有助于大肠杆菌抵抗人脑微血管内皮细胞溶酶体的降解

大肠杆菌是导致新生儿细菌性脑膜炎最常见的革兰氏阴性致病菌．为探讨毒力岛基因ibeT在大肠杆菌K1株致病过程中的作用,构建了ibeT基因缺失的大肠杆菌K1株,细菌在细胞内存活试验结果显示,ibeT基因缺失抑制了大肠杆菌K1株在人脑微血管内皮细胞中的生长．利用激光共聚焦扫描显微镜观察到,在细菌侵袭进入人脑微血管内皮细胞后,与野生型相比,ibeT基因缺失突变株较多地滞留在溶酶体内;透射电镜结果进一步显示,ibeT基因缺失使大肠杆菌K1株逃逸ECV(含有大肠杆菌的囊泡)的能力发生了下降,继而使其在细胞浆内的复制减少．利用体外模拟的弱酸性环境,检测大肠杆菌菌体胞内的缓冲容量,发现ibeT基因缺失突变株菌体胞内的缓冲能力较野生型低．这些结果提示,在大肠杆菌K1株侵袭进入人脑微血管内皮细胞后,ibeT基因有利于大肠杆菌降解ECV膜,避免与溶酶体融合,进而促使大肠杆菌逃逸进入细胞浆并进行复制．     

中国虎纹蛙脾微血管铸型的扫描电镜观察术

以扫描电镜的方法对中国虎纹蛙脾微血管铸型进行了观察,发现脾实质的白髓和红髓之间界限不甚清晰,脾血窦形态大小不一,相续连接成网,窦壁上有少数裂孔.脾微循环为闭锁和开放性循环共存的类型,且大部分为开放性循环.脾实质断面上有动静脉吻合的存在.     

胃癌组织中Survivin、P53蛋白表达和微血管密度测定及意义

目的探讨Survivin,P53蛋白在胃癌组织中的表达及其与血管生成的关系。方法用免疫组化方法对65例胃癌组织Survivin,P53,CD34的表达进行检测。结果胃癌组织中Survivin蛋白阳性表达率为70.77%（46/65）,P53蛋白阳性表达率为64.62%（42/65）。Survivin表达与分化程度和淋巴结转移有关（P〈0.05）,而与临床分期无关（P〉0.05）;P53的阳性表达与分化程度、临床分期和淋巴结转移有关（P〈0.05）。Survivin表达与P53的表达密切相关（r=0.413,P〈0.01）。Survivin阳性表达组织中的MVD值为103.04±15.06,阴性组为81.89±12.15,二者有显著差异（P〈0.01）。P53阳性表达胃癌组织中的MVD值为105.83±15.06,阴性组为81±12.71,二者有显著差异（P〈0.01）。结论Survivin和P53突变对凋亡的抑制的协同作用及其促进血管生成的作用在胃癌的发生发展中起关键作用。     

Prognostic significance of VEGF-C expression in correlation with COX-2, lymphatic microvessel density,and clinicopathologic characteristics in human non-small cell lung cancer

Lung cancer is one of the most lethal cancers in China because of high incidence and high mortality. Cyclooxygenase-2 （COX-2） and vessel endothelial growth factor C （VEGF-C） were found to play an important role in lymphangiogenesis of malignant tumors. In this study, we investigated whether lymphatic microvessel density （LMVD） is related to the prognosis in non-small cell lung cancer （NSCLC） patients, and the expressions of COX-2 and VEGF-C so as to determine the possible role of COX-2 and VEGF-C in NSCLC lymphangiogenesis. Sixty-five formalin-fixed paraffin embedded tissue samples of NSCLC were evaluated for COX-2 and VEGF-C by immunohistochemical staining. To assess tumor lymphangiogenesis, LMVD was determined by immunohistochemical staining of VEGFR-3 polyclonal antibody. The relationship among COX-2 and VEGF-C expression, LMVD, and clinicopathologic parameters was analyzed. Among the 65 samples, high LMVD was significantly associated with lymph node metastasis and poor survival. Multivariate survival analysis showed that LMVD value and lymph node metastasis were independent prognostic factors. The expression level of COX-2 and VEGF-C was significantly higher than those of the adjacent tissues. COX-2 and VEGF-C expressions in NSCLC significantly correlated with lymph node metastasis, but not with patient gender, age, tumor size, or tumor, nodes, metastasis classification stage. The mean LMVD value of COX-2- or VEGF-C-positive tumors was higher than that of COX-2- or VEGF-C-negative tumors. A significant correlation was found between the expressions of COX-2 and VEGF-C. This study suggests that LMVD may be one of the important prognostic factors for NSCLC patients. VEGF-C might play an important role in the COX-2 lymphangiogenic pathway. COX-2 and VEGF-C may play an important role in tumor progression by stimulating lymphangiogenesis. The inhibition of lymphangiogenesis, COX-2, or VEGF-C activity may have an important therapeutic benefit in the control of NSCLC.     

PRL-3在乳腺癌中的表达及意义

目的研究蛋白酪氨酸磷酸酶PRL-3在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌血管形成和临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测72例乳腺癌石蜡包埋组织,WesternBlot方法检测15例新鲜乳腺癌组织及5例癌旁乳腺组织中PRL-3的表达情况,并应用χ2检验和t检验等方法分析PRL-3在乳腺癌组织中表达的意义及其与临床病理特征之间的关系。结果免疫组化结果显示PRL-3表达定位于乳腺癌组织和癌旁乳腺组织的细胞质,间质无着色。癌组织与癌旁乳腺组织的阳性率为分别为69·4%和35%,癌组织中PRL-3的表达明显高于癌旁组织,具有统计学意义(P=0·005)。统计分析显示,PRL-3的表达与临床分期(P=0·001)、淋巴结转移(P=0·008)呈明显正相关,R值分别为0·360和0·299;而与患者的年龄、性别、家族史、肿瘤大小、ER、PR和C-erBb-2阳性率无明显关系。WesternBlot结果亦证实PRL-3在乳腺癌中的表达较癌旁乳腺组织明显增高(P=0·044),且有淋巴结转移组表达高于无淋巴结转移组(P=0·040)。72例乳腺癌中,PRL-3蛋白阳性组MVD的均值高于PRL-3阴性组,两者之间差异显著(P=0·001)。结论PRL-3的表达水平在一定程度上提示乳腺癌的转移潜能,并可能通过促进肿瘤血管形成来促进乳腺癌的生长和转移。     

金葡菌α-溶血素致大鼠急性肺损伤时肺水通道蛋白AQP1表达的变化

目的观察金葡菌α-溶血素(α-Toxin)致急性肺损伤时大鼠肺部AQP1表达的变化。方法将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为盐水对照组,α-Toxin 6h组,α-Toxin 10h组及α-Toxin 24h组,每组各6只。对照组给予腹腔内注入生理盐水;实验组则注入α-Toxin(5μg/100g),分别于6h、10h及24h采集标本。结果金葡菌α-Toxin可诱导大鼠急性肺损伤,肺组织出现不同程度的水肿、充血,动脉血氧下降,且损伤程度与毒素作用时间明显相关。免疫组化结果显示AQP1主要分布在肺微血管内皮,肺泡毛细血管内皮AQP1密度明显低于小血管内皮及细支气管旁毛细血管内皮(P0.05)。注入α-Toxin后6h肺AQP1表达显著下降,10h下降达高峰,24h后AQP1表达有部分恢复(P0.05)。结论α-Toxin可致大鼠肺损伤,并可同时下调肺AQP1表达,提示AQP1可能参与了金葡菌致急性肺损伤时肺内的异常液体转运。