鱼体内锌,镉和核酸的变化及其相互关系研究

锌和钢对鱼体的生长发育产生重大影响。锌参与RNA和蛋白质的合成,并参与胰岛素的贮藏。鲤的缺锌症表现为生长减慢,食欲降低和死亡率增高。钢被认为是动物体非必需的元素,不仅降低RNA和蛋白质的合成速度,而且可能破坏核糖核蛋白体［‘］。迄今为止关于草鱼Ctenopharyngodonidellus（C．＆V．）在生长过程中Zn、Ch和核酸的含量变化及其与生长之间的关系,被了解的程度还相当有限。作者采集水库中天然生长的草鱼,测定不同体长的草鱼肌肉中Zn、Cd和核酸的含量,通过回归分析探讨草鱼在不同生长阶段中Zn、Cd和核酸的含量变化特点,并…     

三链核酸稳定性和生物学功能的研究进展

近10年来三链核酸的研究发展迅猛,已经成为分子生物学和基因工程的一个前沿领域.综述了最近在三链核酸稳定性和生物学功能方面的研究进展.较为详细地讨论了影响三链稳定性的各种内源和外源因素如：寡聚脱氧核苷酸(ODN)的长短 、序列、碱基修饰、骨架结构以及温度、酸度、离子强度 、配基等,同时对三链核酸的生物学功能进行了初步的总结,这些功能包括：控制基因转录,保护靶序列防止酶切,充当分子剪刀进行特定位点切割等.     

流行性出血热尸检组织中热休克蛋白70mRNA的定位及分布

应用核酸原位分子杂交技术研究了国内不同地区３０例流行性出血热患者尸检组织中病毒ＲＮＡ及ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ细胞内定位,同时观察了汉坦病毒感染的ＶｅｒｏＥ６细胞中ＨＳＰ７０的表达情况。结果表明,热休克蛋白７０ｍＲＮＡ在多数组织中均可检测到,分布与病毒ＲＮＡ一致,并且与组织的病理损害有关;体外实验的结果也表明在出血热病毒感染的细胞中有ＨＳＰ７０的高表达。提示热休克蛋白与汉坦病毒的致病以及流行性出血热的发病机理有关。     

马立克氏病病毒强毒GA株基因组BamH Ⅰ-L片段的序列分析

马立克氏病病毒（Ｍａｒｅｋ’ｓｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ,ＭＤＶ）是一种能诱导鸡淋巴组织增生或淋巴肿瘤的细胞结合性疱疹病毒,由此而引起的马立克氏病（Ｍａｒｅｋ’ｓｄｉｓｅａｓｅ,ＭＤ）也是迄今为止唯一可以利用疫苗进行有效控制的肿瘤性疾病。鉴于此,作为研...     

用核酸免疫技术制备抗丙肝病毒C区单克隆抗体

用丙肝病毒Ｃ＋Ｅ１区真核表达质粒ｐｃＤＮＡ－ＨＣＶ／Ｃ＋Ｅ１按４００ｕｇ／只剂量免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,１４周后同一剂量再加强免疫一次。加强免疫后２周,在５０％ＰＥＧ１４５０介导下将脾细胞与ＳＰ２／０小鼠骨髓瘤细胞（５１）融合。实验结果融合率达５４．３％（３１３／５７６）。阳性率为５．４％（１７”３１３）。克隆化后得到６株稳定分泌抗丙肝病毒Ｃ区单克隆抗体杂交瘤细胞株。这６株杂交瘤均产生ＩｇＭ抗体,接种ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠后产生腹水的效价为１６４－１３２０（ＥＬＩＳＡ）。     

基因扩增产物的固相杂交-酶联显色方法的建立

建立基于基因扩增技术的简便、快速的病毒核酸定量检测方法．将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的病毒基因产物,与通过共价键结合在微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,然后通过辣根过氧化物酶标记的抗生物素进行酶联显色,读取光密度值．应用本方法对血清中乙型、丙型肝炎病毒核酸定量检测,灵敏度分别可达１－５拷贝／反应．此方法简便、快速、特异性好、敏感性高、半定量指标客观,可广泛应用于肝炎病毒感染的临床诊断和疗效评价．     

小麦丛矮病毒M蛋白基因的序列测定,表达和鉴定

从小麦丛矮病毒（ＷＲＳＶ）基因文库含磷蛋白ＮＳ基因的质粒中,经亚克隆、测序,得到ＮＳ蛋白基因的下游序列,其中含有一读框４５３ｎｔ、编码一分子量约１７ｋＤ蛋白。用ＰＣＲ方法获得该读框全长片段并克隆到表达载体ｐＧＥＸ－３Ｘ,在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）菌株中以ＩＰＴＧ诱导表达,产物由谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）亲和层析柱纯化后,用蛋白质印迹分析鉴定,结果表明,该读框为编码病毒基质蛋白Ｍ的基因。     

微小根毛霉致病株的原生质体形成条件

建立了重要医学真菌──肺微小根毛霉的原生质体生成系统。采用溶细胞酶以及蜗牛酶与纤维素酶联合作用的方式获得了大量原生质体,处于指数生长期、生长旺盛的幼龄菌丝对破壁酶比生长缓慢或老龄菌丝更敏感;作为渗透压稳定剂,无机盐类要好于有机物;原生质体的较适生成温度为31℃。     

微小根毛霉致病株的原生体形成条件

建立了重要医学真菌－－－肺微小根毛霉的原生质本生成系统。采用溶细胞以及蜗牛酶与纤维素酶联合作用了方式获得了大量原生质体,处于指数生长期、生长旺盛的幼龄菌丝对破壁酶比生长缓慢或老龄菌丝更敏感;作为涌透压稳定剂,无机盐类要好于有机物;原生质体的较适生成温度为３１℃     

结直肠癌组织miR-137-3p、miR-410-3p表达水平与上皮间充质转化和预后的关系分析

摘要 目的：探讨结直肠癌（CRC）组织微小RNA-137-3p（miR-137-3p）、微小RNA-410-3p（miR-410-3p）的表达与上皮间充质转化（EMT）和预后的关系。方法：选取2017年2月至2019年2月本院收治的115例接受CRC根治术治疗的患者，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测癌组织及癌旁组织中miR-137-3p、miR-410-3p表达、EMT标志物E-钙粘蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）的mRNA表达并进行相关性分析，分析癌组织中miR-137-3p、miR-410-3p表达与CRC临床病理特征的关系。术后随访3年，采用Kaplan-Meier法分析miR-137-3p、miR-410-3p高表达和低表达患者的预后情况。结果：癌组织中miR-137-3p表达及E-cadherin mRNA表达水平低于癌旁组织，miR-410-3p表达及Vimentin mRNA表达水平高于癌旁组织（P＜0.05）。癌组织中miR-137-3p表达与E-cadherin mRNA表达水平、miR-410-3p表达与Vimentin mRNA表达水平分别呈正相关（P＜0.05），癌组织中miR-137-3p表达与Vimentin mRNA表达水平、miR-410-3p表达与E-cadherin mRNA表达水平分别呈负相关（P＜0.05）。miR-137-3p、miR-410-3p表达与TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移有关（P＜0.05）。Kaplan-Meier生存曲线分析显示，miR-137-3p低表达、miR-410-3p高表达患者3年累积生存率下降（P＜0.05）。结论：CRC组织中miR-137-3p表达下调、miR-410-3p表达上调，miR-137-3p、miR-410-3p表达水平与EMT密切相关，且miR-137-3p高表达、miR-410-3p低表达患者的预后更好。