氧化应激在实验性糖尿病神经病变中的作用

目的：探讨氧化应激在糖尿病神经病变发生发展中的作用。方法：用链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型。测定糖尿病不同时期坐骨神经中丙二醛（MDA）的水平、总超氧化物歧化酶（SOD）及Na＋-K＋依赖式ATP酶的活性。分析糖尿病大鼠坐骨神经中MDA水平与Na＋-K＋依赖式ATP酶活性的相关性。光镜下观察糖尿病不同时期坐骨神经的病理改变。结果：糖尿病1个月,3个月和6个月时MDA水平与对照组相比显著增高。糖尿病1个月时总SOD活性与对照组相比明显增高,3个月和6个月时活性明显降低。糖尿病3个月和6个月时Na＋-K＋依赖式ATP酶活性与对照组相比显著降低。糖尿病大鼠坐骨神经中MDA水平与Na＋-K＋依赖式ATP酶活性的相关性分析表明,两者呈显著的负相关。病理组织学观察表明,糖尿病3个月时坐骨神经出现病理改变,随着糖尿病病程的延长,病理改变加重。结论：糖尿病早期未出现神经病变时坐骨神经已存在明显的氧化应激,并且在神经病变发生后仍存在。氧化应激与坐骨神经中Na＋-K＋依赖式ATP酶的活性降低有关。因此,氧化应激在糖尿病神经病变的发生发展中起重要作用。     

睡眠剥夺对大鼠心肌损伤效应和抗氧化指标的影响

目的：探讨睡眠剥夺对大鼠心肌和抗氧化指标的影响。方法：大鼠随机分为睡眠剥夺2 d组（SD 2 d）、睡眠剥夺4 d组（SD 4 d）、睡眠剥夺6 d组（SD 6 d）、大平台对照组（TC）、正常对照组（CC）,利用＂小平台水环境法＂建立大鼠睡眠剥夺模型,利用BL-410机能实验系统描记体表心电图,采用光镜及透射电镜观察心肌形态学改变,测定心肌线粒体丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性。结果：睡眠剥夺组大鼠心率加快,心电图出现缺血性改变;心肌细胞染色质、肌浆网、线粒体、闰盘等亚细胞结构出现损伤性改变,部分心肌纤维溶解、坏死,心肌间质水肿、出血、炎性细胞浸润;心肌线粒体MDA水平升高,SOD活性随睡眠剥夺时间延长有降低趋势。结论：睡眠剥夺能够引起大鼠心肌损伤,其引起的氧化应激可能是心肌损伤的机制。     

喀斯特洞穴动物适应黑暗环境生活的适应性特征研究

本文以1龄洞穴鲤鱼和1龄地表鲤鱼为例对比研究洞穴动物的适应性特征,主要根据可量性状(外形、骨骼和内脏)及可数性状(鳍和鳞片)进行对比分析.结果 表明:从总体看洞穴鲤鱼的体形比地表鲤鱼小,生长速度缓慢,季节生长不明显,主要影响因子是洞穴内食物贫乏和水温较低(15℃左右);在可数性状中,洞穴鲤鱼的臀鳍条、围尾柄鳞和鳃耙有增多趋势,即增加了感觉细胞的附着基底;为适应洞穴水流域的狭窄通道,洞穴鲤鱼的体长相对地表鲤鱼而言有延长现象.此外,还对洞穴动物的概念及其它适应性特征作了简要的概述.     

温度对棉大卷叶螟生长发育和繁殖的影响

本文利用生命表方法评价了温度对棉大卷叶螟生长发育和繁殖的影响.结果表明：在17 ℃～26 ℃温度范围内,棉大卷叶螟的发育历期随温度升高而显著缩短;当温度超过32 ℃时,其发育历期延长.棉大卷叶螟的世代起点发育温度为12.08 ℃,有效积温为436.2日·度.在17 ℃～35 ℃温度范围内,棉大卷叶螟的存活率在26 ℃下最高,其他温度下的存活率随温度的升高或降低而降低.在17 ℃～35 ℃之间,棉大卷叶螟实验种群的内禀增长率、世代净增殖率、周限增长率分别在29、26和32 ℃下最大,其值分别为0.1268、415.65和1.185.世代平均历期随着温度的升高而缩短,在17 ℃下最长,为89.11 d;在35 ℃下最短,为28.68 d.     

极长链脂肪酸的合成缺陷对酵母细胞膜的稳定性和多烯类药物敏感性的影响

【背景】脂肪酸延长酶家族参与脂肪酸代谢具有真核生物的高度保守性,且与膜脂的代谢密切相关。但细胞极长链脂肪酸(Very long-chain fatty acid,VLCFA)的合成缺陷对膜的稳定性及多烯类药物的敏感性影响并不完全明晰。【目的】探究细胞VLCFA延长酶ELO1、ELO2和ELO3的作用及功能。【方法】研究脂肪酸延长酶缺陷型elo1?、elo2?和elo3?对多烯类药物两性霉素B (Amphotericin B,AmB)、制霉菌素(Nystatin,Ny)及唑类硝酸益康唑(Econazolenitrate,Eco)的响应,检测不同酵母细胞的麦角固醇,检测其对Na+的响应及胞内钠钾离子水平。【结果】发现细胞VLCFA延长酶ELO2和ELO3缺陷后对AmB高度敏感;VLCFA延长酶缺陷突变株elo2?和elo3?对其它多烯类药物Ny及唑类药物Eco也十分敏感;细胞膜不饱和脂肪酸增加也会改变膜的稳定性,实验结果表明外源油酸(Oleic acid,OLA)增加了elo2?和elo3?突变体的AmB敏感性;相对野生型BY4741和elo1?,缺陷菌株elo2?和elo3?中麦角固醇的含量有显著下降;钠钾离子平衡是维护细胞正常生理的必要条件,也是检测细胞膜稳定性的重要参数,发现VLCFA的合成缺陷菌株对高浓度的NaCl比野生型菌株更敏感,使用ICP-AES检测不同浓度AmB胁迫下细胞内钠钾离子水平,也显示VLCFA延长酶缺陷菌株中,钠水平表现出上升趋势,并且细胞内钾含量明显降低。【结论】细胞VLCFA的合成缺陷会导致细胞膜更脆弱、稳定性下降,从而提高真菌对多烯类药物的敏感性,也表明脂肪酸延长酶是潜在的抗真菌治疗靶点。     

家蚕超长链脂肪酸延长酶基因Bmelo424的克隆及功能分析

超长链脂肪酸延长酶家族基因影响生物体的多种生理功能。文中克隆了家蚕的一个该家族成员Bmelo424基因,其ORF为558 bp。该基因的蛋白序列预测有4个跨膜结构域,并有6个丝氨酸磷酸化位点、8个苏氨酸磷酸化位点和4个酪氨酸磷酸化位点,其亚细胞定位于内质网中,二级结构分析结果显示其α-螺旋和β-折叠股分别占26.7%和20%。荧光定量PCR结果显示Bmelo424基因在家蚕各组织均有表达,尤其在头部表达量最高。通过在酿酒酵母中异源表达Bmelo424基因的方法研究其对脂肪酸延伸的作用,GC-MS结果表明,携带pYES2-Bmelo424重组质粒的酿酒酵母的C16:1n-7脂肪酸含量有显著提高,而C16:0、C18:0和C18:1n-9的含量下降。温度胁迫结果显示,Bmelo424基因能够提高酿酒酵母的低温适应能力,但却降低其高温适应能力。这为探究家蚕Bmelo424基因的功能提供了参考。     

甘蓝型油菜Fad2与Fae1基因双干扰RNAi载体的构建

将来源于甘蓝型油菜XY15的Fad2与Fae1基因编码区,长度分别为349bp和426bp的两个保守序列片段连接成807bp的大片段。然后分别以正反向插入到pFGC5941干扰载体查耳酮合成酶内含子的两端,构建成RNAi载体。以期在菜籽中转录后能有效抑制Fad2与Fae1两个基因的表达。所构建的RNAi载体最终序列全长3kb,经限制性内切酶消化、PCR扩增验证和序列测定,证明目标序列与GenBank数据库中的碱基序列一致,并且为正反向插入到pFGC5941载体上。通过农杆菌介导的油菜转化,已获得油菜抗性再生植株144个。     

川楝素对斜纹夜蛾幼虫取食行为的影响

斜纹夜蛾5龄幼虫的取食活动是非连续进行的。在每两次取食活动之间存在一个取食间间隔．在每次取食活动期间,也存在一非常短暂的取食内间隔。经川楝素处理后的斜纹夜蛾5龄幼虫．其21小时内发生的取食活动和取食间间隔的次数减少．平均每次取食活动和取食间间隔持续的时间延长;可是在每次取食活动中,用于取食的时间明显减少。这是因为．取食内间隔的次数增加了．取食内间隔的时间也延长了。所有上述指标,处理虫与对照之间均存在着显著或极显著的差异。     

长效山羊促卵泡素类似物真核表达载体的构建及其在CHO细胞内的稳定表达

通过PCR重叠延伸法将人绒毛膜促性腺激素（hCG）的羧基末端延长肽（CTP）基因连接至山羊促卵泡素（FSH）15亚基的羧基末端,克隆入双表达载体pVITRO,测序证实后将表达载体转染CHO细胞,用潮霉素B筛选稳定表达的CHO细胞株。结果表明获得了长效山羊FSH基因,并得到稳定表达的CHO细胞株,表达量为0．105mU／mL,为进一步研究CTP结构与功能的关系,以及长效激素的理化特性奠定了基础。