来自穿膜肽的新肽的抗菌活性及抑菌机制

[目的]研究基于穿膜肽和抗菌肽构效关系改造获得的新肽P7的抗菌活性及其对大肠杆菌(E.coli)的抑菌机制.[方法]微量稀释法和溶血实验分析P7的抑菌活性及其对正常细胞的细胞毒性;采用膜荧光探针、流式细胞术和扫描电镜分析P7对E.coli膜通透性、膜完整性的影响和细胞超微结构变化;通过激光共聚焦分析P7在E.coli细胞中的定位;凝胶阻滞实验测定P7与E.coli基因组DNA结合能力.[结果]P7比母肽显示更强的抑菌活性,最低抑菌浓度范围为4-32 μmol/L,且在作用浓度范围内具有较弱的溶血活性.P7可以增加E.coli外膜和内膜的通透性,使E.coli细胞膜的完整性和细胞表面结构受损.同时P7可以穿过E.coli细胞膜在细胞质聚集并与基因组DNA结合.[结论]P7通过增加E.coli内外膜通透性,穿过细胞膜与胞内DNA结合发挥抑菌活性.     

达托霉素生物合成研究进展

达托霉素是由玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)生产的一种环脂肽类抗生素, 具有强大的抗革兰氏阳性致病细菌的作用, 是继“抗生素最后一道防线”万古霉素后的新型抗生素。本文主要对达托霉素的结构、作用机制、合成基因簇及合成机制等当前的研究成果进行综述, 并且总结了利用组合生物学对达托霉素进行结构改造的策略, 以此来研究结构与活性之间的关系, 并寻找更广谱高效的抗生素。最后, 本文总结了提高达托霉素产量的策略, 为工业上降低达托霉素生产成本提供理论参考。     

双酶法酶解豌豆蛋白制备高抗氧化多肽的研究

以水解度及DPPH自由基清除能力为指标优选出1398中性蛋白酶和胰蛋白酶分步酶解豌豆分离蛋白,所得豌豆蛋白水解产物(pea protein hydrolysate,PPH)中相对分子量小于2 KDa的多肽占77.07％,对DPPH的半清除浓度(IC50)为3.01 mg/mL;PPH经Sephadex G-25凝胶层析和两次RESOURCETM 3RPC反相层析纯化获得高抗氧化活性峰,经反相层析鉴定为层析纯,当浓度在0.2 mg/mL时,对DPPH的清除率达到62.03％,与同浓度下的谷胱甘肽对DPPH的清除率相近(66.82％).     

C型尿钠肽在动物繁殖过程中的作用研究进展

C型尿钠肽(CNP)为尿钠肽家族成员之一,作为自分泌及旁分泌因子不仅具有维持心血管系统功能稳态、调控细胞增殖及促进骨骼生长等功能,并且在动物繁殖过程方面具有重要的作用。近年研究揭示CNP是小鼠体内减数分裂抑制物质,而且CNP能够促进卵泡发育,增加促性腺激素刺激后的排卵数量。基于此,CNP在用作生理性的减数分裂抑制剂增强卵母体外发育及提高家畜的超排效率方面具有重要的应用前景。因此,综述CNP结构、作用机制、在动物繁殖过程的作用及应用前景。     

苍白杆菌产生脂肽的结构解析

从油藏产出液中筛选分离得到1株代谢产生脂肽的细菌,经分子生物学鉴定为苍白杆菌(Ochrobactrum sp.)。通过气质联用(GC-MS)、电喷雾质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)的方法分析了脂肽的化学组成和结构。结果表明,脂肽的脂肪酸部分包含iso C13、anteiso C13、iso C14、n C14、iso C15、anteiso C15、iso C16和nC16β-羟基脂肪酸,而脂肽的氨基酸部分都是由缬氨酸、亮氨酸、天门氨酸和谷氨酸组成。且含iso C13、anteisoC13、iso C14、n C14、iso C15和anteiso C15的脂肽的氨基酸序列都是N-Glu-Leu-Leu-Val-Asp-Leu-Leu-C。     

非核糖体肽合成酶的末端硫酯酶与多肽环化

非核糖体肽合成酶（nonribosomal peptide synthetases,NRPSs）能以多载体巯基化模板机制合成各种结构复杂、种类繁多的次生代谢非核糖体环肽.根据环肽末端环化的方式,可分为两大类：大环内酯型和内酰胺型.负责非核糖体环肽最终环化的硫酯酶（thioesterase,TE）属于α/β水解酶超家族.该家族包括：脂酶、蛋白酶、酯酶等,其共有特征是含有保守的催化三元件（Ser-His-Asp）,起到终止反应和释放产物的功能. TE具有区域定向性（regiospecific）、化学定向性（chemospecific）及立体定向性（stereospecific）的特点,在非核糖体肽（nonribosomal peptide,NRP）的合成反应中具有决定性作用,直接影响到最终环肽的生成. 同时,TE由于其特有的环化和水解的双重活性,在体外的线性多肽环化中越来越受到众多学者的关注. 综合国内外相关文献,本文着重从TE介导下的产物释放机制和影响因素两个方面综述非核糖体末端硫酯酶的研究进展及其应用.     

胶原蛋白肽增强小鼠免疫力的实验研究

目的 探讨用生物酶提取的胶原蛋白肽增强小鼠免疫力的作用及相关机制.方法 80只清洁级昆明小鼠被随机分成正常对照组、胶原蛋白肽低剂量组[3 g/(kg·bw)]、中剂量组[7.5 g/(kg·bw)]和高剂量组[12 g/(kg·bw)],每日给药2次,连续2周.检测免疫器官重量、抗体生成细胞数(Jerne改良玻片法)、半数溶血值(HC50)的测定及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验.结果 高剂量组可提高脾脏指数、胸腺指数、半数溶血值及吞噬细胞吞噬率和吞噬指数、可增加抗体生成细胞数;中剂量组可提高胸腺指数、增加抗体生成细胞数、提高小鼠半数溶血值及吞噬细胞吞噬率和吞噬指数;低剂量组可增加抗体生成细胞数、提高吞噬细胞的吞噬率和吞噬指数.结论 三种剂量胶原蛋白肽对正常小鼠的细胞免疫、体液免疫均有显著的增强作用,高剂量组效果最强.     

中国大鲵营养成分和功能因子研究进展

主要介绍了中国大鲵各种营养成分和功能因子的营养和保健功能,中国大鲵含有蛋白质、脂类、氨基酸、微量元素等营养成分和金属硫蛋白、胶原蛋白、表皮活性变白因子和多聚糖肽等多种保健功能因子,并对中华大鲵资源的开发进行了分析,为大鲵的保护和资源利用提供参考。     

新型脂肽类辐射防护剂H6101对小鼠骨髓细胞基因表达谱的影响

目的：脂肽类化合物具有抗辐射活性,通过研究脂肽类辐射防护剂H6101给药后小鼠骨髓细胞基因表达谱的变化,揭示其可能的辐射防护机制。方法：6只ICR雄性小鼠随机分为PBS对照组和H6101给药组,每组3只,给药后1h分离骨髓细胞提取总RNA,经反转录和荧光标记后与小鼠基因表达谱芯片杂交,杂交信号经扫描仪捕获后用Genenomestudio软件进行统计分析。结果：在测定的26766个基因中,给药组与对照组之间的2倍差异表达基因为1738个,其中1041个基因表达上调,697个基因表达下调;TLR信号通路相关基因,炎性细胞因子、造血因子和细胞凋亡相关基因等的转录水平发生明显变化。结论：用基因表达谱芯片筛选出许多不同种类的与H6101辐射防护作用有关的重要基因,这为揭示脂肽分子辐射防护机制提供了研究方向。     

利用噬菌体随机肽库筛选可结合猪繁殖与呼吸综合症病毒的多肽序列

【目的】采用完整的猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)颗粒筛选噬菌体肽库,以获得能高亲和力结合并能抑制该病毒复制的特异性多肽。【方法】用纯化的病毒粒子包被ELISA板,再用M13噬菌体随机12肽库进行筛选。经过3轮淘筛,ELISA鉴定噬菌体单克隆与PRRSV的亲和力,选取与PRRSV具有高亲和力的噬菌体单克隆进行DNA测序,据此推导多肽的氨基酸序列。通过TCID50检测其抗病毒复制能力,同时人工合成FITC标记的展示肽用于PRRSV的检测。【结果】经筛选和鉴定得到17个阳性噬菌体克隆能与PRRSV呈高亲和力结合,DNA测序发现各克隆之间有部分共有基序,其中2个克隆体外能明显抑制PRRSV的复制,使TCID50由10-7.3/0.1mL分别降至10-3.2、10-3.6/0.1mL,而FITC标记该展示肽能够在5mg/L工作浓度检测PRRSV。【结论】通过噬菌体肽库能够筛选到具有抗病毒作用的阳性噬菌体克隆,为进一步开发高效PRRSV的诊断和治疗试剂奠定基础。