透明质酸酶研究进展

根据底物的特异性和产物的不同,透明质酸酶可分为3类,该酶为糖蛋白,不同来源的酶分子量差异较大,已知的3种不同来源的酶的一级结构也不相同,有多种活性调节因子,透明质酸酶的功能复杂,具有多种生物学活性,并在许多疾病的和生物学研究中呈现应用前景。     

戊肝病毒活性肽的选择,合成与应用

对戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）编码蛋白序列进行了亲水性分析及二级结构预测,选择亲水性强、具有β－转角与β－折叠的区段,采用多肽固相合成法合成了ＨＥＶ基因组３个开读框架（ＯＲＦ１,ＯＲＦ２和ＯＲＦ３）中可能的抗原表位,以免疫学方法进行鉴定并选出了分别来自ＨＥＶ３个ＯＲＦ的、具有重要生物活性与应用前景的３段肽（ＥＨ１７４、ＥＨ２６５、ＥＨ３６２）。在此基础上,进行了抗ＨＥＶＥＬＩＳＡ新型检测试剂盒的实验室研究及临床试用。结果表明,所研究的戊肝抗体检测试剂盒特异性高、临床符合性好、具有可重复性,在戊肝辅助诊断及流行病学调查中具有重要意义。     

旋扭山绿豆根瘤菌MXDI6菌株氢酶诱导表达

在自生异养条件下,旋扭山绿豆根瘤菌ＭＸＤＩ６菌株的氢酶诱导表达受气相、ｐＨ值、镍等因子影响：氢酶表达的最适氧浓度为４％,最适氢浓度为１５％,二氧化碳没有明显影响;氢酶表达的ｐＨ值以５．０—６．０为宜;０．５μｍｏｌ／ＬＮｉＣｌ２明显促进吸氢活性,但镍浓度大于１μｍｏｌ／Ｌ则抑制吸氢活性．     

重组PAI－1对u－PA抑制活性的研究

利用大肠杆菌表达的重组纤溶酶原激活物抑制因子－１（ｒＰＡＩ－１）具有许多与天然ＰＡＩ－１相同的性质,ｒＰＡＩ－１对ｕ－ＰＡ抑制活性研究的内容包括：几种化学物质（盐酸胍、尿素、硫氰酸钾、ＳＤＳ、氯化钠等）对ｒＰＡＩ－１的激活作用、盐酸胍激活ｒＰＡＩ－１的浓度与温度效应、显色底物法和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纤维蛋白自显影对ｒＰＡＩ－１活性的测定、活性态ｒＰＡＩ－１向潜状态的转变及其与盐浓度和ｐＨ值的关系。     

固氮酶铁钼辅基理化特性的研究

在紫外可见光谱区内,固氮酶铁钼辅基〔（Ｍｏ_２Ｆｅ_（１２）Ｓ_（１２））４－〕均无特征吸收峰,不含高柠檬酸盐。含双钼的铁硫簇〔（Ｍｏ_２Ｆｅ_（６～１２）Ｓ_（６～１２））~（１～４）－〕的电荷数、颜色与该金属簇中的亚铁量成对应关系,并都有较高的生物重组活性．     

排卵,排精前后文昌鱼体内GnRH的研究

利用放射免疫分析法测定了排卵、排精前后青岛文昌鱼体内促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）的含量变化,并通过高效液相色谱比较了雌、雄文昌鱼性腺及除性腺外体部ＧｎＲＨ的种类和含量的异同。结果表明：１）生殖过程中雌、雄文昌鱼体内ＧｎＲＨ含量的变化规律不同;雌性文昌鱼体内ＧｎＲＨ总含量在排卵时有所下降,排后１２小时政策最为明显,以后逐渐上升到排前水平;雄性文昌鱼仅在排精时有所下降,２小时后即稳定在排水平。２）文     

转译优化对EP0基因在cos7细胞中表达的影响

利用COS7细胞暂时表达系统,研究转译起始序列对EPO-cDNA表达的影响。通过DNA重组技术,构建了原EP0-cDNA表达载体pCSV-EP0(1)．其转译起始序列为5’AATTCATGG3’．同时通过定点突变技术,将起始序列改变成5’CCACCATGG3’,而构建了另一表达载体pCSv—EPO(2)。后者经序列分析证明无误后和前者均通过DEAE-dextran法转染COS7细胞,用ELlSA法定量洲量EP0表达水平．转染后48小时及72小时收集含pCSV—EP0(1)的COS7细胞上清．测定结果为1580pg／mI及954pg／mI,而含pCSV—EPO(2)的上清则为25 300pg／m1和17 450pg／ml。这表明经优化起始序列的基因表达远高于未经优化的。     

转译优化对EPO基因在COS7细胞中表达的影响

利用ＣＯＳ７细胞暂时表达系统,研究转译起始序列对ＥＰＯ－ｃＤＮＡ表达的影响。通过ＤＮＡ重组技术,构建了原ＥＰＯ－ｃＤＮＡ表达载体ｐＣＳＶ－ＥＰＯ（１）,其转译起始序列为５＇ＡＡＴＴＣＡＴＧＧ３＇。同时通过定点突变技术,将起始序列改变成５＇ＣＣＡＣＣＡＴＧＧ３＇,而构建了另一表达载体ＰＣＳＶ－ＥＰＯ（２）。后经序列分析证明无误后和前均通过ＤＥＡＥ－ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞上清,测定结果为     

渗透胁迫下蓝藻固氮的氧稳定性研究

在聚乙二醇（PEG）的影响下．蓝藻固氮活性下降,对氧的不稳定性增大。PEG浓度愈高,固氮活性及其对氧的稳定性愈小。暗处理、光合抑制剂、N2和厌氧环境加剧氧对受渗透胁迫蓝藻固氮酶活的抑制,而CO2、蔗糖、分子氢以及N2和CO2的加合则使之减轻。     

血管活性肠多肽结合核苷酸性质的研究

采用光亲和技术检测了血管活性肠多肽(VIP)与核苷酸之间的相互作用,发现VIP可以特异性结合同位素标记的GTP,还发现未标记的GTP以及其它三磷酸核苷抑制这种结合,这意味着VIP与上述三磷酸核苷之间的结合是一种典型的可逆性的结合反应.发现低浓度的GDP,GMP不但不抑制VIP与同位素标记GTP的结合反应,反而增强这种结合.联系到其它研究者关于GTP影响VIP与其受体结合反应的结果,可认为VIP能可逆性地连接一种三磷酸核苷,这种连接受反应系统中不同核苷酸比例影响,通过这种连接来调节VIP与其受体之间的反应.