坛紫菜中别藻蓝蛋白的纯化及洗脱组分光谱研究

以福建省平潭县坛紫菜(Porphyra haitanensis)为材料,采用硫酸铵分级分离和柱层析法纯化别藻蓝蛋白(APC),并对纯化的条件进行了详细的探讨。研究结果表明:采用30%~35%饱和硫酸铵沉淀、Tris-HC l(pH=8.0)作为洗脱缓冲液、DEAE-Sephadex-A-50作为层析介质,所获得的APC的纯度和回收率分别为3.50和70.2%;SDS-PAGE表明APC有α和β两个亚基,分子量分别为18.9 kD和17.7 kD。因此该方法对于从坛紫菜中快速纯化APC是适合的。采用光谱分析研究柱洗脱组分,结果表明:坛紫菜中含有分子结构为(αβ)6γ的“双峰型”R-PE,含有结构为(αβ)3的R-PC,含有结构为(αβ)3的APC-Ⅱ。     

层析法去除重组人血清白蛋白干扰素a2b融合蛋白的内毒素

用柱层析方法在生产重组人血清白蛋白干扰素α2b融合蛋白过程中去除产品中的内毒素。所用柱层析组合为Blue-sepharose亲和柱层析、SOURCE 15 ISO疏水柱层析、Q Sepharose F.F.离子交换柱层析、Sephadex G25 Coarse凝胶过滤柱。采用鲎试剂法检测柱层析各阶段得到蛋白中的内毒素含量; 并用RP-HPLC方法测定柱层析各阶段得到蛋白的纯度与浓度, 求出每毫克蛋白的内毒素含量。结果为每步柱层析过程式均有去除内毒素的作用, 最终所得蛋白的内毒素含量降为1 EU/mg, 去除率达到99.9%。因而生产重组人血清白蛋白干扰素a2b融合蛋白所用分离纯化柱层析技术在纯化蛋白的同时能有效的去除产品中内毒素, 所得产品内毒素的含量远低于药典对注射剂的内毒素含量要求。     

石蝉草的脂溶性成分

为研究石蝉草(Peperomia dindygulensis Miq.)的脂溶性化学成允,通过溶剂萃取、硅胶柱色谱、重结晶分离纯化,从石蝉草乙醇提取物的氯仿萃取部位分离得到7个化合物,经光谱学数据鉴定为:peperomin A(1),peperomin D(2),surinone C(3),proetorione C(4),cepharanone B(5),正十八酸(6),豆甾醇(7).化合物5为首次从该属植物中分离得到,除化合物1和2,其余所有成分均为首次从该植物中分离得到.     

八角茴香中莽草酸提取和纯化工艺的研究

本文对八角茴香中莽草酸的提取和纯化工艺进行优化研究.结果表明,莽草酸的最佳提取工艺条件为:常规水浸提,温度80℃,固液比1:15,提取时间100 min,莽草酸的提取量达到0.1795 g.最佳纯化工艺:莽草酸浸膏搅拌硅胶,柱层析,乙酸乙酯洗脱,莽草酸洗脱量达到0.1742 g,真空浓缩至干,甲醇和水混合结晶,得含量98%的纯品莽草酸.     

Beta proteobacterium sp.T1菌株产壳聚糖酶的分离纯化

目的:分离纯化Beta proteobacterium sp.T1菌株所产的壳聚糖酶.方法:采用(NH4)2SO4(20%～70%)分级盐析、阴离子交换树脂DEAE Cellulose 52柱层析、SephadexG-100柱层析技术进行分离纯化,采用SDS-PAGE鉴定酶的纯度、分子量.结果:经DEAE Cellulose 52柱层析,壳聚糖酶纯化了13.19倍;经Sephadex G-100柱层析,壳聚糖酶纯化了26.32倍.结论:纯化后的酶经SDS-PAGE鉴定已达到电泳纯,分子量29.5kDa.     

树脂吸附法分离瓜果腐霉毒素中的除草活性物质

本试验以对禾本科杂草具有除草活性的瓜果腐霉菌株PAM1为试验材料,研究了X-5、AB-8,H-103和S-8等4种大孔吸附树脂对其除草活性物质的吸附性能,结果表明X-5树脂能够较好地吸附该除草活性物质.选用50%乙醇、95%乙醇、乙酸乙酯和丙酮4种溶剂为供试洗脱溶剂,采用2种洗脱方案,对其最佳洗脱溶剂进行了选择,生长抑制作用和种子萌发试验结果表明,以方案1洗脱为最佳.     

吸附柱层析法制备纯化茶多酚中EGCG单体

以茶多酚为原料,采用吸附树脂柱层析法制备表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)单体。考察树脂对儿茶素的吸附容量、吸附率、解吸率及吸附选择因数,选择LX-8树脂初步纯化后采用HP-20树脂二次纯化。经LX-8两步柱层析,1.5 BV/h流速洗脱,25%乙醇洗脱组分上柱后经40%乙醇洗脱5 BV可得到纯度为73.06%的EGCG产品。以20 mg/mL浓度的LX-8柱40%乙醇产品上HP-20柱,1.5 BV/h洗脱,5%乙醇洗3 BV,15%乙醇洗6 BV,80%乙醇洗3 BV后,可制得纯度为93.16%,总收率为49.50%的EGCG产品。     

法夫酵母 JMU-MVP14菌体中类胡萝卜素成分分析

结合薄层色谱、柱色谱、以及高效液相色谱对虾青素高产菌株-法夫酵母JMU-MVP14中的类胡萝卜素成分进行初步研究。研究结果表明,硅胶柱层析和氧化镁柱层析相结合的方法对法夫酵母JMU-MVP14菌体中的类胡萝卜素成分有很好的分离效果。经过柱层析分离纯化后,各组分中类胡萝卜素的种类单一,有利于进一步通过各种波谱技术对其进行定性。此方法弥补了单纯依靠高效液相色谱（ODS 柱）对法夫酵母 JMU-MVP14菌体中类胡萝卜素分离效果不佳,可供选择的商业化类胡萝卜素标准品少,液相保留时间漂移等因素给法夫酵母JMU-MVP14菌体中类胡萝卜素定性带来的不足。     

不同泪道硅胶引流管留置时间对慢性泪囊炎患者视力、生活质量及复发率的影响

目的:探讨不同泪道硅胶引流管留置时间对慢性泪囊炎患者的生活质量、视力及复发率的影响。方法:回顾性选取2018年1月2019年12月期间于我院就诊的慢性泪囊炎患者91例(128眼),根据术后泪道硅胶引流管留置时间分为A、B两组,其中A组泪道硅胶引流管留置时间6周,44例(61眼),B组泪道硅胶引流管留置时间12周,47例(67眼)。对比两组疗效、视力、并发症发生率、主诉溢泪发生率、生活质量及复发率。结果:A组拔管当天的总有效率高于B组(P<0.05),两组拔管后3个月总有效率对比无明显差异(P>0.05)。拔管后6个月两组社会功能、躯体疼痛、精神健康、生理功能、精力、情感职能、生理职能、总体健康维度评分均较术前升高(P<0.05),但两组组间对比未见统计学差异(P>0.05)。两组患者术前、拔管后3个月视力组间及组内比较均未见统计学差异(P>0.05)。两组患者主诉溢泪发生率比较未见统计学差异(P>0.05)。A组并发症发生率、复发率低于B组(P<0.05)。结论:泪道硅胶引流管留置时间的长短对慢性泪囊炎患者疗效、视力、生活质量、主诉溢泪发生率无明显影响,但留置6周者并发症发生率、复发率低于留置12周者,提示临床应视患者具体情况尽量缩短泪道硅胶引流管留置时间。