等离子刀扁桃体部分切除术联合腺样体射频消融术治疗儿童鼾症的 短期疗效研究

目的:探讨等离子刀扁桃体部分切除术(Tonsillotomy,TT)联合腺样体射频消融术治疗儿童鼾症的短期临床疗效。方法:选取2015年1月至2016年1月于我院接受扁桃体和腺样体手术的鼾症患儿77例机分为实验组即扁桃体部分切除术组(TT组)和对照组即扁桃体全部切除术(Tonsillectomy,TE)组(TE组)。选用儿童OSA-18生活质量调查表对儿童鼾症患者术前1个月和术后6个月进行调查随访和评估比较两组临床疗效的差异。采用VAS量表计量两组患儿术后1-7天的吞咽疼痛情况。观察两组患儿术后出血、术后扁桃体发炎情况以及扁桃体增生情况。结果:TT组和TE组患儿术后6个月OSA-18量表的总评分及5个维度的总分较术前比较均下降差异均具有统计学意义(P值均等于0.000),但两组术后OSA-18量表的总评分比较差异无统计学意义(P=0.246)。TT组术后第1天至术后第7天的吞咽疼痛VAS评分均较TE组低差异均具有统计学意义(P值均小于0.01)。两组患者术后均无患儿出血、无扁桃体反复发炎以及扁桃体组织增生。结论:等离子刀扁桃体部分切除术联合腺样体射频消融术治疗儿童鼾症短期临床疗效明确术后吞咽疼痛程度轻微、疼痛时间短,短期内无扁桃体增生及反复扁桃体发炎,可作为治疗儿童鼾症的首选术式之一。     

起搏基因体外调控骨髓间充质干细胞分化为类起搏细胞的研究

目的本研究旨在通过体外构建起搏基因质粒pIRES2-EGFP-HCN2,电穿孔转染骨髓间充质干细胞,检测其在体外的表达情况。方法对含mHCN2 cDNA的PTR载体进行转化和扩增,将所得mHCN2基因定向克隆到含有增强型绿色荧光蛋白的真核表达载体pIRES2-EGFP中,进行双酶切来鉴定克隆的正确性。将重组质粒及空白质粒用电穿孔法转染骨髓间充质干细胞,并在体外与心肌细胞共培养,观察搏动频率变化及mHCN2的表达,并检测其电生理和组织学特征。结果构建了重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2。荧光显微镜下可见转染后的骨髓间充质干细胞呈绿色荧光,细胞中mHCN2的阳性表达率为98.2%。免疫荧光显示转染起搏基因的骨髓间充质干细胞mHCN2的表达,而对照组无表达。实验组共培养的心肌细胞搏动频率较对照组干细胞共培养的明显增快(140±11次/分VS 100±13次/分,P0.05),动作电位显示实验组最大舒张期电位值小于对照组(-62±2mv VS-71±2mv,P0.05)。免疫荧光显示干细胞与心肌细胞间形成间隙连接。结论成功构建了重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2,转染后的骨髓间充质干细胞可在体外成功表达功能性mH-CN2通道,提供起搏电流,具有类起搏细胞的功能,为进一步构建生物起搏器提供依据。     

TGF-β1在自发性高血压大鼠肾损害中作用的研究

目的研究转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在自发性高血压大鼠(spontaneously hypertertensive rat,SHR)肾脏的表达及其与肾损害的关系.方法以同龄雄性正常血压(Wistar Kyoto,WKY)和自发性高血压大鼠为研究对象,分别于12周龄和24周龄时检测两种大鼠尾动脉血压、肾功能及β2微球蛋白(β2-MG),并采用免疫组织化学的方法检测TGF-β1在肾脏中的表达.结果同WKY组比较, SHR组24周时β2-MG显著增高(P<0.01);而且尾动脉血压显著性增高;而尿素氮和血肌酐的差异无显著性(P>0.01).TGF-β1在WKY组肾小管的表达无或极微量;在SHR组的肾小球有少量表达,但在肾小管的表达显著,且随高血压病程的进展, TGF-β1的表达显著性增加(P<0.01).结论 TGF-β1在自发性高血压大鼠肾小管的表达显著增加,与肾损害的各项指标呈正相关.     

具核梭杆菌对结直肠癌小鼠化疗敏感性的影响

目的研究具核梭杆菌对结直肠癌小鼠化疗敏感性的影响。方法建立结直肠癌荷瘤小鼠,分为空白对照组、5-氟尿嘧啶对照组和实验组、奥沙利铂实验组和对照组、伊立替康实验组和对照组、阿霉素实验组和对照组、丝裂霉素实验组和对照组,每组5只;各实验组荷瘤鼠灌胃给予具核梭杆菌菌液(10~9CFU),0.2 mL/d,1次/周。连续灌胃4周后,5-氟尿嘧啶实验组、阿霉素实验组、丝裂霉素实验组荷瘤鼠分别腹腔注射给予30.00 mg/(kg·d)、1.75 mg/(kg·d)、2.00 mg/(kg·d)对应药物,1次/d,连用7 d;奥沙利铂实验组、伊立替康实验组荷瘤鼠分别第1天腹腔注射给予29 mg/kg、66 mg/kg对应药物,其余6 d用生理盐水0.1 mL代替。各对照组荷瘤鼠除不灌胃具核梭杆菌菌液外,其余操作均与实验组相同。对比各实验组和对照组的瘤重和抑瘤率(IR%)。结果各组成瘤裸鼠一般情况均正常,肿瘤呈膨胀性生长,未见明显浸润或转移发生。各实验组荷瘤鼠的瘤重(g)均显著大于对照组荷瘤鼠[(1.42±0.15)vs(0.97±0.12),(1.76±0.16)vs(1.45±0.13),(1.50±0.09)vs(1.03±0.08),(1.38±0.07)vs(0.87±0.05),(1.26±0.08)vs(0.79±0.05);均P<0.05],IR%显著小于对照组荷瘤鼠[(27.55±2.83)vs(50.51±5.02),(10.20±1.78)vs(26.02±2.36),(23.47±2.76)vs(47.45±4.86),(29.59±3.02)vs(55.61±5.35),(35.71±3.47)vs(59.69±5.45);均P<0.05]。结论具核梭杆菌降低抗结直肠癌药物的敏感性。     

基于TLR4MyD88信号通路观察粪菌移植对DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎干预作用机制

摘要 目的：探讨粪菌移植（fecal microbiota transplantation,FMT）对葡聚糖硫酸钠（dextran sodium sulfate, DSS）诱导小鼠溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）干预作用及其炎症相关的分子机制。方法：30只昆明小鼠采用DSS喂养建立结肠炎小鼠模型并随机分为模型组、FMT低剂量组和FMT高剂量组,另取10只作为对照组。FMT低剂量组、FMT高剂量组自造模后第1 d开始分别给予8 g/kg、15 g/kg粪菌剂量灌肠处理,灌肠体积0.2 mL。对照组和模型组给予等体积生理盐水灌肠处理。分别在实验第1、7、14及21 d称量小鼠体重。实验结束后处死小鼠,取出结直肠,观察各组小鼠结直肠形态变化并通过HE染色观察病变程度。ELISA检测小鼠结直肠组织匀浆液上清中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin 6, IL-6）、白细胞介素-4（interleukin 4, IL-4）和白细胞介素-10（interleukin 10, IL-10）的表达变化;免疫组化法和RT-qPCR分别检测结直肠组织中核因子κB-P65亚基 (nuclear factor-κB P65, NF-κB P65)蛋白和mRNA的表达情况;Western blotting检测结直肠组织中Toll 样受体4 (Toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子 88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)的蛋白表达情况。结果：对照组相比,造模小鼠在第6 d起至第14 d体重明显减轻,差异具有统计学意义（P<0.05）;与模型组相比,FMT低、高剂量组小鼠第10 d起至第14 d体重明显减轻,FMT高剂量组小鼠体重升高更加明显,差异具有统计学意义（P<0.05）;与对照组相比,模型组小鼠结直肠组织中TNF-α、IL-6、NF-κB P65 mRNA和蛋白阳性表达、TLR4、MyD88 蛋白表达均显著升高(P<0.05),IL-4、IL-10表达显著下降（P<0.05）;FMT高剂量组IL-4、IL-10较模型组显著升高,其余指标均显著下降（P<0.05）。结论：FMT可通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路缓解炎症反应,发挥对UC的治疗作用。     

B超声引导下肋锁间隙与喙突入路连续臂丛神经阻滞对Barton骨折术后镇痛效果比较

目的:比较超声引导下肋锁间隙与喙突两种入路连续臂丛神经阻滞对Barton骨折手术患者术后的镇痛效果。方法:选择择期行Barton骨折手术患者60例,随机分为肋锁间隙入路连续臂丛神经阻滞组(A组,n=30)和喙突入路连续锁骨下臂丛神经阻滞组(B组,n=30)。两组均在超声引导下进行臂丛神经阻滞,同时留置神经阻滞导管,麻醉后2小时经神经阻滞导管连接无线电子镇痛泵。记录手术过程中神经深度、麻醉操作时间,并评估麻醉效果;记录术后第一次追加药物时间;记录麻醉后6 h、12 h、18 h、24 h、36 h、48 h静息及运动状态VAS评分;记录术后第一天和第二天镇痛泵有效按压次数及补救镇痛情况;记录患者满意度及并发症发生情况。结果:与B组相比,A组神经深度明显减浅(P<0.05),麻醉操作时间显著缩短(P<0.05),术后第一次追加药物时间延长(P<0.05),麻醉后12 h、18 h、24 h、36 h静息及运动状态VAS评分较低(P<0.05),术后第一天有效按压次数明显减少(P<0.05),患者满意度评分高(P<0.05),误穿血管发生率明显减少(P<0.05)。结论:超声引导下肋锁间隙入路与喙突入路连续锁骨下臂丛神经阻滞均可安全有效用于Barton骨折手术术后镇痛;但肋锁间隙连续臂丛神经阻滞术后镇痛效果更好,且具有神经阻滞深度浅、操作时间更短、阻滞效果更好、患者满意度更高及并发症更少等优点。     

新德里金属β-内酰胺酶-1及其突变体结构与功能研究进展

耐药菌株所分泌表达的新德里金属β-内酰胺酶-1(New Delhi Metalloβ-lactamase-1,NDM-1)是金属-β-内酰胺酶家族的成员,能够催化几乎所有β-内酰胺类抗生素的水解,其迅速传播已成为人类健康的严重威胁。我国是产该酶病原菌分离率较高的国家之一,绝大部分为革兰氏阴性菌。到目前为止,全世界已报道了由16个突变位点和1个插入位点所形成的21种不同的NDM突变体,这些突变体的核酸序列通过单个或多个碱基取代或插入而改变。本文总结了NDM-1的结构及催化水解机理,对其结构中α-螺旋、β-折叠和环区结构进行了探讨,并基于此突变位点对该酶结构的影响进行了分析。这些区域所发生的突变,直接影响其水解底物的活性。深入了解这些突变对其结构和功能方面的影响,对于在分子水平上的进化研究具有十分重要的意义。     

转化生长因子5在发育性髋关节发育不良中的作用研究进展

发育性髋关节发育不良(developmental dysplasia of the hip,DDH)是一种主要因髋臼、股骨近端和关节囊等存在结构性畸形而导致的不稳定关节病变,进而发展成为髋关节的脱位。髋关节内软骨发育不良、骨骼及肌腱的异常均可导致髋关节结构的畸形,最终造成DDH。因此,早期预防与诊断是DDH治疗的关键。研究表明,DDH具有遗传基础,其易感基因包括GDF5、HOXD9、COL2AL、PAPPA2等,其中遗传因子转化生长因子5(growth differentiation factor 5,GDF5)对软骨细胞的增殖、分化具有重要作用,是当前研究治疗DDH的热点之一。因而,了解GDF5基因对软骨发育及分化的影响,对于DDH的发病机制和治疗具有重要意义。基于此,综述了国内外近期探讨的GDF5在基因层面上对DDH的影响,以及通过关节内注射重组人GDF5等基于GDF5的DDH治疗方案,以期为DDH的临床治疗提供新的策略。     

石杉碱甲对电休克大鼠记忆、ARCmRNA及蛋白表达的影响

目的：研究石杉碱甲对电休克模型大鼠记忆和海马活性调节的细胞骨架联合基因（Activity-regulatedcytoskeletal—associatedgene,ARC）表达的影响。方法：大鼠随机分为假电休克对照组和电休克组,再随机分为生理盐水对照组（CS组、ES组）和石杉碱甲组（CH组、EH组）。第l-17天行生理盐水或石杉碱甲灌胃;第8—17天给予假电痉挛刺激或电痉挛刺激;第18天水迷宫定位航线实验;然后各组大鼠随机分成两组,一组取海马用RT．PCR检测ARCmRNA表达,Westem--blot法检测ARC蛋白表达水平,一组于48小时后行水迷宫空间位置探寻实验。结果：电休克导致大鼠显著记忆障碍,ARCmRNA、ARC蛋白表达水平较假电休克对照组显著下降;而石杉碱甲干预的电休克大鼠记忆保持较好,ARCmRNA、ARC蛋白表达水平显著高于生理盐水干预的电休克大鼠,与假电休克大鼠相比无显著性差异。结论：石杉碱甲能减轻电休克模型大鼠记忆损害,其机制可能与海马ARC的表达增加有关。     

ADO在膀胱尿路上皮癌组织中的表达和意义

目的探讨膀胱尿路上皮癌组织中腺苷(adenosine,ADO)的表达及临床意义。方法收集武汉大学人民医院病理科2000-2006年有完整临床和病理资料的膀胱尿路上皮癌存档蜡块50例和5例癌旁组织,采用免疫组织化学S-P法检测50例膀胱尿路上皮癌和5例癌旁组织中ADO的表达水平。采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告管理系统,对ADO的表达进行定量分析,并用SPSS13.0软件对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度、阳性面积率做单因素方差分析和SNK(q)检验。结果 ADO在膀胱尿路上皮癌中呈低表达,癌旁组织中呈高表达。膀胱尿路上皮癌与癌旁组织相比,差异有显著性(P<0.05)。结论 ADO在膀胱尿路上皮癌中的低表达抑制了肿瘤细胞的凋亡,导致肿瘤细胞增生,ADO在膀胱尿路上皮癌的发生、发展中起了重要的促进作用。