血清LRG1、GRP78与急诊脓毒症患者继发急性肺损伤的关系研究

摘要 目的：探讨血清富亮氨酸α-2糖蛋白1（LRG1）、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）与急诊脓毒症患者继发急性肺损伤（ALI）的关系。方法：选取2021年1月～2022年10月在我院急诊重症监护室（EICU）接受治疗的155例脓毒症患者为观察组,根据是否继发ALI分为ALI组43例和非ALI组112例,另选取同期我院100名体检健康者为对照组。采用酶联免疫吸附试剂盒检测血清LRG1、GRP78水平。通过单因素及多因素Logistic回归分析脓毒症患者继发ALI的影响因素。受试者工作特征（ROC）曲线分析血清LRG1、GRP78水平对脓毒症患者继发ALI的预测价值。结果：与对照组比较,观察组血清LRG1、GRP78水平升高（P＜0.05）。单因素分析显示,急诊脓毒症患者继发ALI与脓毒症分级、EICU时间、机械通气、脓毒症相关器官衰竭评估（SOFA）评分、血乳酸、LRG1、GRP78有关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示,脓毒性休克、EICU时间延长和SOFO评分、血乳酸、LRG1、GRP78升高为急诊脓毒症患者继发ALI的独立危险因素（P＜0.05）。ROC曲线分析显示,血清LRG1、GRP78水平单独和联合预测急诊脓毒症患者继发ALI的曲线下面积（AUC）分别为0.790、0.782、0.884,二者联合预测的AUC最大。结论：急诊脓毒症患者血清LRG1、GRP78水平升高与继发ALI密切相关,血清LRG1、GRP78水平联合预测急诊脓毒症患者继发ALI的价值较高。     

不同压力智能型人工肛门封堵装置封堵效果试验

目的:比较不同压力智能型人工肛门封堵装置的效果。方法:选用8-10月龄西藏小型猪进行动物试验。先进行结肠造口动物模型制备,再设计为3个不同气囊压力组分别接受试验。观察动物一般情况、造口泄露率、造口处肠壁粘膜组织中性粒细胞和淋巴细胞及肠管局部血流灌注量,并对应进行各影响因素的综合分析。结果:33.33 mmHg的压力组较之于其它两组,一般情况较差,体重下降明显(p=0.004);造口泄漏率最低,但造口处肠壁粘膜组织中性粒细胞和淋巴细胞显著上升(p=0.000);肠管局部血流灌注量显著下降(p=0.000),提示压力太大易致使造口处血运变差及并发感染。结论:压力过大时对周围组织及肠管压迫严重,容易引起缺血、坏死、感染等并发症。压力过小时又易发生泄漏,无法达到封堵目的。以气囊压力约18 mmHg较为适宜。     

禁食诱导脂肪因子在肠道菌群所致肥胖中的作用机制

肥胖是严重影响国民生活质量的重大问题,其伴随的各种并发症严重影响了人民的身心健康。众多研究揭示了肠道菌群在肥胖发展过程中起重要作用,而禁食诱导脂肪因子(fasting-induced adipose factor,FIAF)在肠道菌群所致肥胖中发挥着重要的作用,参与了脂代谢、慢性低度炎症和代谢性内毒素血症、AMPK、缺氧等多个代谢途径。然而,目前尚未有研究阐明肠道菌群通过FIAF介导肥胖的完整机制。本文在总结大量前人研究的基础上,就FIAF在肠道菌群所致肥胖的发病机制进行综述,以期为肥胖的预防、治疗提供理论依据。     

基于CRISPR/Cas9-SAM系统CHD5基因过表达慢病毒载体的构建及对膀胱癌T24细胞增殖,迁移和侵袭能力的影响 *

目的 利用CRISPR/Cas9-SAM系统构建CHD5基因过表达慢病毒载体,并分析其对膀胱癌细胞T24增殖,迁移和侵袭能力的影响.方法: 针对CHD5基因设计3个sgRNA(sgRNA-1,sgRNA-2,sgRNA-3),将sgRNA连入LV-sgRNA-MS2-P65-HSF1-Neo载体,经293T细胞包装后获得高滴度慢病毒颗粒.病毒以MOI=10感染膀胱癌细胞T24.RT-qPCR和Western blot分别检测感染病毒后T24细胞CHD5 mRNA和蛋白表达水平,CCK8实验,流式分析,划痕实验和Transwell实验检测CHD5过表达对T24细胞增殖,凋亡,迁移和侵袭能力的影响.结果: 成功构建CHD5过表达慢病毒载体.慢病毒感染T24细胞后,RT-qPCR和Western blot证实,T24细胞CHD5的mRNA和蛋白表达水平显著高于空白组和阴性对照组(P<0.05),并且sgRNA-3-MS2-P65-HSF1序列的作用最为显著.CCK8及流式分析结果显示,过表达CHD5抑制T24细胞增殖,促进凋亡,与对照组相比,均有统计学意义(P<0.001).划痕和Transwell实验结果表明,过表达CHD5可抑制T24细胞迁移和侵袭能力(P<0.01).结论: 成功构建CHD5过表达慢病毒.过表达CHD5能促进膀胱癌细胞T24凋亡,抑制其增殖,迁移和侵袭能力.     

尤瑞克林联合尿激酶超早期治疗改善脑梗死患者预后

目的：观察尤瑞克林联合尿激酶超早期治疗对改善脑梗死患者预后的疗效,探讨其临床适用性。方法：选择从2009年3月至2012年8月于我院住院治疗的48例超早期急性脑梗死患者,随机分为实验组25例和对照组23例,对照组患者使用尿激酶进行溶栓治疗,实验组在此基础上加用尤瑞克林联合治疗。观察两组患者治疗后神经功能的恢复情况,治疗有效率及预后稳定性情况。结果：两组患者治疗后NIHSS评分均较治疗前改善（P〈0．05）;与对照组比较,实验组治疗后NIHSS较治疗前下降更多（P〈0．05）;实验组治疗有效率高于对照组（X2=-4．69,P〈0．05）;实验组患者服药后的治疗安全性与对照组的相当,差异无明显统计学意义（X2=0．33,P〉0．05）。结论：尤瑞克林联合尿激酶超早期治疗较单用尿激酶疗效好,安全性好。     

盐酸洛拉曲克脂质体的制备及其质量考察

目的：制备盐酸洛拉曲克脂质体并考察其理化特性。方法：采用薄膜挤压-硫酸铵梯度法制备盐酸洛拉曲克脂质体,透射电镜及激光粒度分析仪分别观察和检测其粒径大小及分布,通过紫外分光光度法测定包封率及评估体外释药试验。结果：制备的盐酸洛拉曲克脂质体包封率达83.6%±2.37%,粒径103.5±26nm且分布均匀。24h体外释放实验结果提示约有66.5%的盐酸洛拉曲克从脂质体释放出来。结论：新制备的盐酸洛拉曲克脂质体粒径大小均匀,包封率尚有提高空间,具有体外缓慢释药的特性。     

Peroxiredoxin Ⅱ在退变椎间盘髓核中的表达及其临床意义

目的:检测PeroxiredoxinⅡ在腰椎间盘髓核组织中的表达,分析其在椎间盘退变中的临床意义。方法:用蛋白免疫印迹(Western blot)的方法检测PeroxiredoxinⅡ在正常、突出及脱出腰椎间盘髓核中的表达情况。结果:PeroxiredoxinⅡ在退变椎间盘髓核中表达丰富,而在正常椎间盘髓核中表达微弱,两者比较差异显著(P<0.05),在突出和脱出椎间盘髓核中表达无显著性差异(P>0.05)。结论:PeroxiredoxinⅡ在正常及退变腰椎间盘髓核组织中差异表达。     

43例术后疑似急性肺栓塞分析

目的:探讨影响术后急性肺栓塞(Acute Pulmonary Embolism,APE)的发生和预后的相关因素,以提高对术后肺栓塞的认识和诊疗水平。方法:收集2009.01-2014.12期间南方医院术后疑似急性肺栓塞患者的临床资料,总结其临床特征,分析其诱发因素、临床表现、治疗和预后,探讨其发病的高危因素。结果:共收集术后疑似肺栓塞43例,平均年龄56.09±14.08岁(17~80岁),明确诊断为肺栓塞15例(34.9%),共死亡20例(死亡率46.5%)。其临床表现和体征均具有非特异性,呼吸困难、心悸和晕厥是主要的临床表现。不仅可以发生于下肢、胸腹部(包括妇产科)、颅内等大手术后,也可能发生在介入栓塞术后。相关危险因素很多,包括性别、年龄、恶性肿瘤、全身麻醉、手术时间长等。具有高危因素的患者并具有可疑肺栓塞的临床表现时,结合D-二聚体、动脉血气分析、心电图、胸部X线、超声心动图、下肢彩超可检查协助APE的诊断,而胸部增强CT作为检查手段有利于明确诊断。结论:肺栓塞是手术后致命的并发症之一,早期诊断、早期治疗,能降低术后肺栓塞患者的死亡率。     

常见肝炎病毒感染性疾病相关miRNA功能研究进展

病毒感染引发的疾病一直威胁着人类健康。Mi RNA是真核生物表达的一类重要的小分子RNA,可特异性的调节基因与蛋白的表达。mi RNA的研究为病毒性疾病的发生发展提供了新思路,为目前热点研究领域。随着mi RNA的研究深入,一些病毒感染中相关mi RNA的功能也被相继报道,如有些mi RNA具有抑制病毒感染宿主细胞的功能,有些mi RNA则可促进病毒在宿主细胞中的复制,有些mi RNA却参与病毒相关疾病的发生,还有些mi RNA则可作为病毒感染性疾病的特异性生物标志物。本文主要以两种常见肝炎病毒:HBV、HCV为例来系统阐述mi RNA在病毒感染中的相关功能。     

肺炎克雷伯菌质粒p1512-KPC的测序及比较基因组学分析

【目的】对多重耐药的肺炎克雷伯菌1512中的质粒p1512-KPC进行测序及比较基因组学的分析。【方法】利用16S rRNA基因测序进行菌种鉴定,根据7对管家基因(gapA、infB、mdh、pgi、phoE、rpoB和tonB)对菌株进行多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)。利用PCR进行耐药基因的筛查,通过接合转移实验及电转化实验将质粒转入受体菌大肠杆菌EC600。采用改良Carba NP法检测细菌碳青霉烯酶的活性以及类型,使用VITEK2Compact全自动细菌鉴定及药敏分析仪检测菌株最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)。最后通过高通量测序技术结合生物信息分析手段明确菌株1512及质粒p1512-KPC的耐药基因谱,并通过比较基因组方法对质粒p1512-KPC的基本结构、耐药基因遗传环境及移动元件等结构基因组学特征进行分析。【结果】菌株1512为产A类碳青霉烯酶的多重耐药肺炎克雷伯菌,MLST分型结果显示该菌为ST11型。经PCR筛查,菌株1512包含bla_(KPC-2)、dfrA1和sul1耐药基因,其中bla_(KPC-2)基因位于不可结合转移但电转成功的质粒p1512-KPC上。测序结果显示,质粒p1512-KPC长度为117.69 kb,同时包含IncFII型复制子和属于Rep_3家族但类型未知的复制子repB,并携带耐药基因bla_(KPC-2)、bla_(CTX-M-65)、bla_(TEM-1)及rmtB。其中bla_(KPC-2)、bla_(CTX-M-65)及bla_(TEM-1)分别存在于截短的Tn6296、Tn6367及截短的Tn2的基因环境中。【结论】携带bla_(KPC-2)、bla_(CTX-M-65)、bla_(TEM-1)及rmtB基因的质粒p1512-KPC介导了肺炎克雷伯菌1512对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类、单环β-内酰胺类及氨基糖苷类抗生素耐药,并能引起相应耐药基因的水平传播。此外,本研究还对IncFII型复制子和Rep_3家族复制子repB共存的质粒进行了比较基因组分析,为该类型质粒的多样性和进化提供了更深入的理解。