p62蛋白的分子功能及其在疾病中的研究进展

螯合体1(SQSTM1/p62)是一种选择性自噬接头蛋白,在清除待降解蛋白、维持细胞内蛋白质稳态中发挥重要的调控作用。p62蛋白具有多个功能结构域,介导与多种蛋白质发生相互作用进而精确调节特定的信号通路,从而将p62蛋白与氧化防御系统、炎症反应和营养感知等重要生命过程联系起来。研究表明p62的突变或者表达异常与多种疾病的发生发展过程密切相关,包括神经退行性疾病、肿瘤、感染性疾病、遗传性疾病以及慢性疾病等。本文综述了p62蛋白的结构特征、分子功能,并系统介绍其在蛋白质稳态和信号通路调控中的多种功能,总结了p62在疾病发生发展中的复杂性与多面性,以期为p62蛋白的功能与相关疾病研究提供参考。     

常见毛囊细胞角蛋白在毛囊周期中的表达研究

目的探讨常见毛囊细胞角蛋白在毛囊周期中的表达特征。 方法取毛囊发育期、生长期启动、生长期、退化期和静止期的小鼠皮肤,石蜡切片后通过免疫荧光的方法,检测细胞角蛋白Krt5、Krt6、Krt10、Krt14、Krt15和Krt19的表达情况。 结果Krt5在静止期和生长期启动表达于所有毛囊上皮细胞,在其他时期表达不一致;Krt6表达于所有时期的外根鞘细胞和内根鞘细胞;Krt10表达于生长期和退化期的毛母质和内根鞘细胞,在其他时期表达不一致;Krt14在生长期和退化期表达于所有毛囊上皮细胞,在其他时期表达不一致;Krt15和Krt19表达于毛囊发育期、生长期启动和静止期的毛囊隆突区细胞,在生长期和退化期表达不一致。 结论角蛋白作为毛囊结构或毛囊干细胞标记物仅适用于特定的毛囊周期。研究者在使用毛囊角蛋白作为标记物时,应首先明确其在毛囊周期中的表达情况。     

大鼠动情周期中雌激素水平与纹状体听觉诱发电位P50关系的研究

目的：了解雌鼠动情周期中雌激素水平的波动对黑质-纹状体系统多巴胺（DA）神经元功能活动和纹状体听觉诱发电位PS0AEPP50的影响。方法：连续测定清醒、安静状态下雌鼠动情周期各个时期的纹状体AEP P50。结果：在动情周期中．AEP P50的T／c比值在动情期（EStrus）最高,动情间期（Destrus）最低,四个时期的T／C值没有显著性差异（P〉0.05）。结论：雌鼠动情周期中雌激素生理水平的低幅波动并不能造成四个时期AEP P50显著性不同。     

健康人群肿瘤坏死因子-α基因多态性的分析

了解汉族健康人群中TNF-A基因多态性的分布,研究TNF-α表达与相关疾病之间的联系。采用PCR-限制性长度片段多态分析法检测140名重庆地区汉族健康人群的TNF—A-308,TNF—A-857位点基因多态性,计算其基因型和等位基因频率,结果显示TNF-A-308G／G、G／A、4朋基因型的频率分别为89％、11％、1％,其等位基因的发生频率以G等位基因最常见（93％）,其次为A等位基因（7％）。TNF—A-857C／C、C／T、形,基因型的频率分别为68％、36％、8％,其等位基因发生频率以C等位基因最常见（81％）,其次为T等位基因（19％）。由结果可以得出重庆地区汉族健康人群TNF—A-308位点存在G／A多态性,TNF-A-857位点存在C／T多态性。     

双歧杆菌脂磷壁酸与5-氟尿嘧啶联用的抗肿瘤研究

目的探讨双歧杆菌脂磷壁酸与5-氟尿嘧啶（5-Fu）联用对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及免疫功能的影响。方法双歧杆菌脂磷壁酸单独或联合5-Fu处理H22荷瘤Balb／c小鼠,定期测量肿瘤大小,观察小鼠一般状况;计算抑瘤率、血红细胞数和白细胞数,取脾和胸腺计算脏器指数;HE染色分析肿瘤组织变化;MTT法检测小鼠脾T淋巴细胞增殖转化功能以及ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ含量。结果双歧杆菌脂磷壁酸及5-Fu单独应用均可抑制肿瘤生长,但单独5-Fu处理组小鼠一般状况差,毒性反应重;双歧杆菌脂磷壁酸与5-Fu联合应用,与单独5-Fu处理组比较,不仅抑瘤率明显提高（P〈0．01）,且荷瘤小鼠一般状况改善,白细胞数升高,脏器指数增加,小鼠脾T淋巴细胞增殖能力强,脾淋巴细胞分泌IFN-γ,水平提高;光镜观察HE染色瘤体组织,双歧杆菌脂磷壁酸处理组可见大量炎症细胞浸润。结论双歧杆菌脂磷壁酸联合5-FU能增强化疗的抑瘤作用,并能扭转化疗引起的免疫低下现象,起到增效减毒作用。     

幽门螺杆菌重组HpaA蛋白包涵体的切胶纯化分析

目的 探讨切胶纯化的最佳条件及纯化重组HpaA蛋白包涵体的可行性.方法 克隆并表达pQE30-hpaA-DH5α工程菌,获得重组HpaA蛋白包涵体,使用切胶纯化法进行纯化,得到可溶性的重组HpaA蛋白.SDS-PAGE电泳后使用不同浓度、不同pH的醋酸钠溶液以及不同的染色时间染色电泳蛋白条带,分析切胶纯化的最佳条件.Western blot鉴定重组HpaA蛋白的抗原性.将重组蛋白免疫BALB/c小鼠,双向免疫扩散法检测血清抗HpaA抗体,鉴定重组蛋白的免疫原性.结果 4 mol/L醋酸钠溶液、pH 13.0、作用1 h为切胶纯化的最佳条件.经切胶纯化法获得的重组HpaA蛋白体积为6 ml,浓度为0.2942 mg/ml,蛋白量为1.7652 mg,得率为77.1%,Western blot显示该蛋白具有良好的抗原性.小鼠免疫血清能与重组HpaA蛋白反应,双扩效价大于等于1∶ 16,具有良好的免疫原性.结论 切胶能够纯化重组HpaA蛋白包涵体,获得高纯度的可溶性重组HpaA蛋白,该蛋白具有良好的抗原性和免疫原性,可用于进一步的科学研究.     

类根瘤对烟草叶片中叶绿体及其淀粉粒含量的影响

目的：探讨类根瘤对烟草叶片中的叶绿体及其淀粉粒含量的影响。方法：无菌培养烟草再生植株,其中一部分经过一定浓度的2,4－D与豇豆根瘤菌512快生型突变株菌液诱导处理,另外一部分为对照。运用常规电镜技术制作叶片厚切片,通过显微观察,对两组烟草叶片细胞中的叶绿体及其淀粉粒含量进行对比分析。结果：结瘤植株叶片细胞内的叶绿体含量虽然与对照之间无明显差异,但叶片栅栏组织和海绵组织细胞内淀粉粒的含量却均较对照减少,其中前者减少更为明显（P＜0.05)。结论：结瘤烟草叶片内光合产物的大量同化可能与类根瘤的形成有关。     

介绍线粒体组织切片的一种制作法

制作线粒体方法有20余种,但各有其技术特长。本文着重介绍一种线粒体组织切片的染色技术。我们在研制过程中参考了一些国内外专门资料,经实践创新了一种有效的方法,引用起来操作简便容易掌握;现将系列步骤简介如下。 (一)方法 1.取材 取材必须新鲜,动物必须健康(小白鼠体重约20—25克,大白鼠最好为幼鼠),一般为小肠、肝、肾、胰腺,其中以小肠最为典型。     

益生菌防治过敏性疾病的进展和展望

过敏是一种病理性的免疫反应。随着全球患病率逐年上升,它已成为困扰人类健康的常见疾病。目前针对过敏性疾病的疗法大都收效甚微。研究证实,益生菌可以刺激免疫细胞的免疫调节特性,维持免疫内环境平衡,调节胃肠道生态系统,是潜在的防治过敏性疾病的有效疗法。改变抗原提呈细胞的功能或调节Th1/Th2平衡是益生菌抗过敏的基本作用机制。目前益生菌防治过敏性疾病已经成为国内外研究的热点,未来有望利用益生菌实现过敏性疾病的个性化与精准化治疗。本文就益生菌防治过敏性疾病的最新进展以及该领域前沿作一综述,期望有助于我国益生菌治疗和预防过敏性疾病的普及和研究。     

人母乳中分泌型免疫球蛋白A的抗体特异性分析

目的探讨人母乳中分泌型免疫球蛋白A（sIgA）的抗体特异性,了解母体所哺育的新生儿及婴儿对病原微生物的抵抗力,为预防新生儿及婴儿感染性疾病提供实验依据。方法制备轮状病毒、肠致病性大肠埃希菌。采用间接ELISA法检测81份配对初乳和成熟乳中针对轮状病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、幽门螺杆菌、空肠弯曲菌、肠致病性大肠埃希菌和沙门菌“O”9种病原微生物的特异性sIgA。Wester—blot鉴定9份初乳中抗肠致病性大肠埃希菌的特异性sIgA。结果81份初乳中均检出抗上述9种病原微生物的特异性sIgA,其阳性率按秩序分别为34．5％、6．2％、3．7％、18．5％、23．5％、8．6％、9。8％、11．1％和14．8％。81份成熟乳中仅检出抗轮状病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、空肠弯曲菌、肠致病性大肠埃希菌和沙门菌O的sIgA,其阳性率分别为19．8％、7．4％、6．2％、2．5％、2．5％和3．7％。未检出抗柯萨奇病毒、埃可病毒和幽门螺杆菌的特异性sIgA。初乳中抗轮状病毒sIgA阳性率高于成熟乳（P〈0．05）,抗腺病毒和呼吸道合胞病毒sIgA的阳性率高于成熟乳（P〈0．05,P〈0．01）。Wester—blot鉴定9份初乳中含有3种对肠致病性大肠埃希菌的特异性sIgA。结论在母乳中含有抗多种病毒和细菌的特异性sIgA,其阳性率低于30％。初乳中特异性sIgA水平高于成熟乳。如何提高乳汁中的特异性sIgA水平,增强新生儿及婴儿的抗感染力,是儿童保健值得探讨的问题。