2型糖尿病模型小鼠造模时间的选择

目的:分析不同时期的2型糖尿病小鼠血生化指标及心肌和肾脏的病理变化情况,为选择2型糖尿病模型小鼠造模时间提供依据。方法:32只健康雄性ICR小鼠高脂饲料喂养6周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ,30mg/kg),连续5d,制备糖尿病模型。9d后测空腹血糖(FBG),高于11.1mmol/L视为糖尿病模型。分别于成模后第4、6、8周处死一组小鼠。另取8只雄性ICR小鼠作为对照组,常规饲料喂养,于糖尿病组小鼠成模后第8周处死。分析小鼠生化及病理情况:①心脏、肾脏脏器系数计算;②血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)含量测定;③HE染色观察心肌和肾脏组织病变的整体情况;Masson染色观察心肌组织纤维化情况;PAS染色观察肾脏组织病理变化。结果:与对照组小鼠进行比较,第4、6、8周的糖尿病小鼠心脏器系数升高,血清LDH、CK升高,病理组织学见心肌细胞肥大,纤维化;肾脏脏器系数升高,肾功能肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)显著升高,病理组织学见肾小球肥大,肾小管基底膜增厚,管腔萎缩。结论:第6周糖尿病小鼠相关生化病理指标改变相对明显且饲养时间相对较短,故2型糖尿病模型小鼠造模后第6周是进行药物干预和病理、生理、生化等研究的最佳时间。     

高产中性蛋白酶菌株的筛选、优化及中试放大

为筛选分离得到具有高产中性蛋白酶能力的菌株,同时研究菌株的发酵条件,在牛粪、猪粪堆肥时期采集样品,在以干酪素为唯一碳源的固体培养基上筛选分离得到19株产蛋白酶菌株。选取其中1株产酶效果最好的菌株PC2,其水解圈D/d值为4.25,酶活为10.74 U·mL^-1。结合形态学、生理生化以及16S rDNA分子生物学鉴定结果,认定其为枯草芽孢杆菌,革兰氏阳性菌。进一步对其进行摇瓶和中试放大条件优化,LB培养基37 ℃活化24 h,干酪素发酵培养基30 ℃发酵48 h,转速为180 r·min^-1。中试放大具体参数：50 L种子罐180~240 r·min^-1,通气量20~30 L·min^-1。500 L发酵罐：添加1%小麦蛋白粉,100~180 r·min^-1,通气量10~25 L·min^-1。发酵结束活菌含量44.58亿·mL^-1,酶活29.48 U·mL^-1,是初始值的2.745倍。研究结果可为探究含中性蛋白酶菌株的微生物菌剂奠定理论基础,并指导工业化菌剂的生产。     

Polymorphic microsatellites in largemouth bronze gudgeon (Coreius guichenoti) developed from repeat‐enriched libraries and cross‐species amplifications

Largemouth bronze gudgeon (Coreius guichenoti) is a medium‐sized fish endemic from the upper Yangtze River of China and its survival is threatened by the construction of the Three Gorges Dam. This study reports 20 new polymorphic microsatellites from a repeat‐enriched genomic library with a mean number allele of 5.2, and observed and expected heterozygosities ranging from 0.035 to 1, and from 0.13 to 0.917, respectively. In a cross‐species amplification test, nine of the 37 tested loci were found to be also polymorphic in a congeneric species, brass gudgeon (C. heterodon). In addition, other four loci from common carp (Cyprinus carpio) were also polymorphic in C. guichenoti. Out of these 24 polymorphic microsatellites, only three loci significantly deviated from Hardy–Weinberg equilibrium in the sampled population (P < 0.0025), and all pairwise tests for linkage disequilibrium among loci were nonsignificant after applying sequential Bonferroni correction (P > 0.0026). These novel microsatellites provide sufficient levels of polymorphism for studies on population genetics and conservation in C. guichenoti and its related species.     

ITS序列结合培养特征鉴定梨树腐烂病菌

对采自中国4个省份的9个梨树腐烂病菌分离株和7个苹果树腐烂病菌分离株的ITS序列进行了测定和分析,并结合GenBank的有性型Valsa ceratosperma、V.ambiens和V.mali的ITS序列构建了系统发育树。结果表明梨和苹果树的各分离株在ITS核苷酸序列上分化较小(p-distance=1.55%),均在V.ceratosperma聚类组,但二者又分别处于两个独立小分支。其与V.ambiens和V.mali处在不同的聚类组中,且亲缘关系较远,表明供试梨树腐烂病菌并非V.ambiens。培养性状和生物学特点的研究结果还发现,梨树腐烂病菌各分离株无论在菌落颜色、产孢特点、还是37℃高温的生长情况都和苹果腐烂病菌有一定差别。前者菌落始在PDA终为乳白色,而后者菌落初为白色后期变褐色;在20%ABA上,前者形成的产孢体较大而数量较少,在37℃高温下能正常生长,后者则形成的产孢体较小而数量较多,在37℃高温下不能正常生长。并未发现二者在子实体上有稳定明显的差异。因而表明梨树腐烂病菌应为V.ceratosperma,但可用培养性状和生物学特点进行区分其和苹果树腐烂病菌。     

直肠癌功能性扩大根治术

目的:探讨直肠癌保留植物神经的扩大根治术的相关问题,旨在提高生存质量。方法:分别从植物神经的解剖、生理、手术方法及效果等方面,结合我院的经验与国内外的发展现状,分析总结功能性直肠癌扩大根治手术的方法,注意事项及其疗效等。结果:136例功能性直肠癌扩大根治手术与一般根治手术相比,术后排尿,性功能等方面,有明显的改善,而没有增加术后局部复发率及降低生存率。结论:功能性扩大根治手术明显降低了男性直肠癌患者的术后排尿和性功能障碍发生率,并且没有增加局部复发率及降低生存率。合理选择手术指证下应用功能性扩大根治手术,适合于DukesA、B、C期的病人,能显著改善患者术后的生存质量。功能性扩大根治手术是治疗直肠癌最理想的术式。     

沙井地区384例支原体药敏试验结果及分析

目的:了解本地区社区感染支原体的药物敏感情况。方法:对门诊标本培养出的384例支原体进行药敏试验(微量肉汤法)。结果:Uu对交沙霉素、克拉霉素及罗红霉素敏感性高,敏感率分别为98%、94%及93%;对环丙沙星、大观霉素耐药性高,敏感率分别为8%及11%。Mh对交沙霉素敏感率为89%、对大现霉素、多西环素、美满霉素的敏感率均为78%;对罗红霉素、红霉素耐药性高,敏感率分别为0%及11%。Uu合并Mh对交沙霉素、多西环素、美满霉素敏感性高,敏感率分别为85%、73%及69%,对红霉素、克拉霉素、大观霉素的敏感性均为0%,对罗红霉素、阿奇霉素、环丙沙星的敏感率均为4%。结论:支原体的敏感性存在时空差异,且不同类型的支原体对抗菌素的敏感性是不同的,应采用实验室结果而非经验指导用药。     

用DREAM技术纠正人工合成基因中的突变

目的：介绍一种简便、有效的定点突变技术。方法：根据突变位点附近的DNA序列推导出氨基酸序列,再以此氨基酸序列进行逆翻译,这样在不改变氨基酸序列的前提下可以得到数目巨大的隐性突变体（silent mutants）,这些突变体中包含大量的限制性内切酶位点,选择合适的酶切位点设计引物用PCR技术扩增两侧DNA片段,然后以相应酶切融合这两个片段即可完成定点突变。结果：用该方法成功地在人工合成的含有缺失的可溶性组织因子基因的472位插入C,T两个碱基,校正了阅读框架,获得了预期的目的基因。结论：该方法简便、有效, 避免了多轮PCR和合成长引物导致突变的可能性,这种改进的PCR 定点诱变技术我们称之为“设计限制酶辅助突变”（Designed Restriction Enzyme Assisted Mutagenesis, DREAM）。此技术简单方便, 诱变的成功率高, 适于实验室常规应用。     

中国真猛犸象和披毛犀化石14C年代研究新进展

真猛犸象（Mammuthus primigenius）和披毛犀（Coelodonta antiquitatis）是北半球高纬度地区晚更新世动物群的主要成员,其消亡的年代和原因一直是国际学术界关注的热点科学问题。本文对黑龙江青冈县英贤村最新出土的5个真猛犸象和5个披毛犀化石进行了AMS¹⁴C年代测定,结果均大于4万年,部分化石可能已经超出了目前¹⁴C的测定范围。通过整理并对比已公开发表的中国境内两种动物化石的¹⁴C年代学数据,本文认为早期常规¹⁴C测年方法所获得的年代值需要重新考虑其准确性。埋藏地层与最新的AMS¹⁴C测年数据显示,我国真猛犸象化石年代主要集中于MIS3阶段;披毛犀在我国消亡的时间很可能晚于真猛犸象,至少延续到末次冰消期。中国猛犸象-披毛犀动物群化石仍然需要开展更多的年代学研究。     

A correlational study between serum asymmetric dimethylarginine level and impaired glucose tolerance patients associated with obesity

Asymmetric dimethylarginine (ADMA) plays a vital role in the regulation of insulin sensitivity and has been shown as a potential marker for various disease, including type 2 diabetes mellitus (DM2). However, the correlation between ADMA and impaired glucose tolerance (IGT) and obesity has not been studied. A total of 195 subjects were involved in our study. The characteristics of the subjects in the study cohort were measured and analyzed. We found that the serum ADMA and C-reactive protein levels were significantly increased in IGT and diabetic patients, whereas the levels of lipoprotein A and adiponectin were decreased, especially in diabetic patients with obesity. The serum ADMA level was positively correlated to a homeostatic model assessment for insulin resistance, and multivariate regression analysis further indicated that ADMA was an independent factor for DM patients with obesity. Our study expands the understanding of the complicated relationship between obesity, insulin resistance, IGT, and ADMA. In addition, we demonstrated that the serum ADMA level could serve as a diagnositic biomarker of the early signs for IGT patients with obesity.     

土壤中群体感应淬灭细菌的原位分离与筛选

【背景】许多革兰氏阴性细菌通常以N-酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactones,AHLs)作为群体感应主要的信号分子。【目的】从土壤中筛选和鉴定新型群体感应淬灭细菌。【方法】通过"垫圈法"从土壤中原位培养分离细菌,采用琼脂条法、报告菌平板法及β-半乳糖苷酶活性测定筛选群体感应淬灭细菌,根据16S rRNA基因序列同源性分析确定菌株系统发育地位。【结果】从不同地区土样中原位培养共分离获得细菌502株。以根癌土壤杆菌Agrobacterium tumefaciens NTL4 (pZLR4)作为报告菌,最终得到11株具有较强降解AHLs能力的细菌,包括假单胞菌5株、不动杆菌4株、变形杆菌和莱茵海默氏菌各1株。大部分细菌可完全降解N-3-羰基十二酰基高丝氨酸内酯(3OC12-HSL),部分细菌对N-(3-氧代己酰)高丝氨酸内酯(3OC6-HSL)和N-3-氧代辛酰高丝氨酸内酯(3OC8-HSL)具有一定降解活性。【结论】Proteus和Rheinheimera可降解AHLs,为今后防治依赖群体感应的植物细菌病害提供新型生防资源。