人类PKNOX1基因一种新剪接型全长cDNA的克隆与表达分析

为了寻找新的Down’s综合征相关基因,利用生物信息学分析与实验技术相结合的方法,从定位于Down’s综合征关键区内(21q22．3)的EST(GenBank登录号H77399)出发,从人类睾丸组织cDNA文库内克隆到含同源盒结构域转录因子PKNOX1的一种新剪接型全长cDNA,命名为PKNOX1B,GenBank登陆号AYl42115。PKNOX1B基因跨越58．4kb,全长cDNA约2．8kb,有11个外显子和10个内含子,编码405个氨基酸残基的酸性蛋白质,分子量为44．628kDa,等电点6．28。PKNOX1B与PKNOX1的前9个外显子及9个内含子完全相同,由于PKNOX1B在第10与11外显子之间发生了差异剪接,以致其在3’端cDNA序列被截短约2kb,所编码的蛋白质在C端较PKNOX1短30个氨基酸残基。但PKNOX1B保留了与PKNOX1完全相同的同源盒结构域,因而它可能与其他含同源盒结构域基因家族成员一样参与了发育的遗传调控。RT-PCR结果显示PKNOX1B除骨髓组织外在人体组织广泛表达。在睾丸组织中PKNOX1可见5kb,2．9kb,2kb 3种转录本,而在其他组织中仅发现2个较大的转录本,2kb的转录本在睾丸组织呈现特异性的表达,它有可能参与了精子的发生过程。     

中国东北样带（NECT）：十年集成与未来挑战

作为“国际地圈-生物圈计划(IGBP)”的15条陆地样带之一,中国东北样带(Northeast China Transect,NECT)在IGBP核心项目“全球变化与陆地生态系统(GCTE)”中已经建立10年之久。该样带位于中纬度温带半干旱地区,跨越北纬42~46,东经110~132,其主要全球变化驱动因素为降水,次要驱动因素为土地利用强度。在过去的10年里,中国东北样带的研究进展表现在以下几个方面:生态数据库发展、气候及其变异性、植物对环境的生态生理响应、植被和景观变化、生物多样性格局及其变化、植物功能型和植物性状及气候梯度分析、生产力和碳动态、花粉-植被相互关系、痕量气体放散、土地利用和土地覆盖变化以及生物地理和生物地球化学模拟。为达到更高水平的集成研究,中国东北样带今后需要:统一框架下的坚实的基础数据集、进一步的野外实验和观测、从斑块、景观到生物群区尺度的植被结构、过程和功能的集成模拟、样带内和与其他IGBP样带研究结果的相互比较、多学科交叉研究、国内和国际协作以及完整的科学计划和实施对策。     

天山乌鲁木齐河源区3．6ka BP以来的植被变化和环境变迁：以大西沟剖面为例

天山乌鲁木齐河源区大西沟剖面孢粉鉴定结果表明：在3．6～3．2ka BP,该区气候较今温暖湿润;在3.2～2．0ka BP,气候变为寒冷干燥,这一时期乌鲁木齐河源地区曾出现一次冰进;在2．0～1．4ka BP,气候又转为暖湿;在1．4～0．5ka BP,出现了3．6ka BP以来气候最适宜的时期。整个剖面自下而上都有一定量的淡水水生植物出现,这反映了该剖面3ka BP以来一直处于淡水沼泽的环境中。通过对云杉属生态习性、传播特性等综合分析,认为剖面中的云杉丰值可能与林线上移、山谷风搬运以及冰川退缩等有一定的相关性。通过对孢粉样品中炭屑浓度统计以及磁化率测试结果的综合研究,提出在0．5ka BP左右,该地区可能出现过多次火灾;炭屑的峰值可能与人类活动有关。     

两湖平原六个湖泊水生植物多样性的比较研究

为了揭示人为干扰对淡水湖泊水生植物多样性的影响 ,本文采用断面法 ,应用全球定位系统 (GPS)技术与地理信息系统 (GIS)技术 ,比较研究了所受干扰强度各不相同的两湖平原的白莲湖、海口湖 (轻度干扰 )、长湖、西凉湖 (较强度干扰 )、大通湖与武山湖 (重度干扰 )水生植物多样性的现状及其 2 0年来的变化 ,并探讨了人为干扰强度与植物多样性丰富程度及丧失程度间的关系。主要结论是 (1) 2 0 0 1年白莲湖、海口湖、长湖、西凉湖、大通湖与武山湖各分布有水生植物 6 9、 6 7、 98、 77、 5 6和 38种 ,6个湖泊各有水生植物群丛类型 14、 14、 14、 13、 6和 0个 ,植被覆盖率分别为 10 0 %、 96 18%、 6 5 32 %、 6 1 18%、10 6 0 %和 0 % ,全湖平均单位面积生物量分别是 2 2 31g m2 、 2 718g m2 、 1816g m2 、 14 71g m2 、2 5 6g m2 和 0g m2 。 (2 ) 2 0年来 ,6个湖泊各有 1、 1、 6、 7、 9和 2 9种水生植物消失 ,消失的水生植物群丛类型数目分别是 1、 1、 4、 4、 5和 6个 ,水生植被覆盖率分别下降了0 %、 3 82 %、 32 85 %、 37 80 %、 5 9 4 0 %和 91 0 0 %。 (3)多样性丰富程度的现状是白莲湖、海口湖 >长湖、西凉湖 >大通湖、武山湖 ,丰富程度与所受干扰强度成负相关关系 ;多样性丧失程度与所     

猪链球菌2型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其识别表位分析

用纯化的硫氧还蛋白-IMPDH融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经4次有限稀释法克隆,成功获得1A8、1F2、2D2和2D12共4株能稳定传代并分泌抗IMPDH的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株.4株腹水型单克隆抗体间接ELISA效价分别为100x211、100x211、100x210和100x28,经Western-blot分析表明,4株单抗与硫氧还蛋白-IMPDH融合蛋白均具有特异性反应,并且通过4种IMPDH全基因分片段缺失表达的融合蛋白,分析了4株单抗所识别抗原决定簇的差异性,发现1A8、1F2,2D2识别表位的编码基因集中在IMPDH基因片段的627 bp～790 bp之间,2D12识别表位的编码基因则集中在IMPDH基因片段的411 bp～790 bp之间.猪链球菌2型中IMPDH单克隆抗体的获得及相应表位分析为研究IMPDH蛋白的生物学活性及免疫学活性奠定了基础.     

用b-紫罗兰酮筛选虾青素高产菌株

用β-紫罗兰酮作为筛选剂选择性分离海洋红酵母虾青素高产突变菌株。实验结果表明, 在β-紫罗兰酮存在的情况下, 由于类胡萝卜素合成受到抑制, 海洋红酵母的生物量和虾青素合成量都减少; 当平板培养基中β-紫罗兰酮浓度达到370 mg/L时, 海洋红酵母的致死率为92.3%; 在这种平板培养基上涂布经甲基磺酸乙酯诱变的海洋红酵母, 随机筛选200个菌落, 结果表明生物量、虾青素体积产率和细胞产率均有所提高的正突变株占18%, 生物量、虾青素体积产率和细胞产率的单项指标有所提高的正突变株分别占22.5%、45%和46%。该实验结果表明在分离培养基中添加β-紫罗兰酮可选择性地分离海洋红酵母虾青素高产菌株, 提高虾青素高产突变株的筛选效率。     

Induction of broad CD4+ and CD8+ T-cell responses and cross-neutralizing antibodies against hepatitis C virus by vaccination with Th1-adjuvanted polypeptides followed by defective alphaviral particles expressing envelope glycoproteins gpE1 and gpE2 and nonstructural proteins 3, 4, and 5

Broad, multispecific CD4⁺ and CD8⁺ T-cell responses to the hepatitis C virus (HCV), as well as virus-cross-neutralizing antibodies, are associated with recovery from acute infection and may also be associated in chronic HCV patients with a favorable response to antiviral treatment. In order to recapitulate all of these responses in an ideal vaccine regimen, we have explored the use of recombinant HCV polypeptides combined with various Th1-type adjuvants and replication-defective alphaviral particles encoding HCV proteins in various prime/boost modalities in BALB/c mice. Defective chimeric alphaviral particles derived from the Sindbis and Venezuelan equine encephalitis viruses encoding either the HCV envelope glycoprotein gpE1/gpE2 heterodimer (E1E2) or nonstructural proteins 3, 4, and 5 (NS345) elicited strong CD8⁺ T-cell responses but low CD4⁺ T helper responses to these HCV gene products. In contrast, recombinant E1E2 glycoproteins adjuvanted with MF59 containing a CpG oligonucleotide elicited strong CD4⁺ T helper responses but no CD8⁺ T-cell responses. A recombinant NS345 polyprotein also stimulated strong CD4⁺ T helper responses but no CD8⁺ T-cell responses when adjuvanted with Iscomatrix containing CpG. Optimal elicitation of broad CD4⁺ and CD8⁺ T-cell responses to E1E2 and NS345 was obtained by first priming with Th1-adjuvanted proteins and then boosting with chimeric, defective alphaviruses expressing these HCV genes. In addition, this prime/boost regimen resulted in the induction of anti-E1E2 antibodies capable of cross-neutralizing heterologous HCV isolates in vitro. This vaccine formulation and regimen may therefore be optimal in humans for protection against this highly heterogeneous global pathogen.     

多不饱和脂肪酸对钾通道的调控作用及机理

多不饱和脂肪酸具有包括离子通道在内的众多作用靶点,通过作用于这些靶点,可以有效保护免疫系统、神经系统和心血管系统的功能,在一定程度上保护人体健康。电压门控钾离子通道家族K_V7通道和大电导钙离子激活的钾离子通道(BK_Ca)广泛表达于机体的各类组织中,具有重要的生理或病理功能。本综述围绕K_V7和BK_Ca通道,根据对已有报道的汇总,多不饱和脂肪酸可以增大K_V7和BK_Ca通道的电流幅值,其中对K_V7通道电流的影响主要是改变其电压依赖特性和最大电导值,而对BK_Ca通道电流的影响主要是改变其孔道区域关闭态的构象。此外,多不饱和脂肪酸对K_V7和BK_Ca通道功能的调节也会受到共表达的辅助亚基影响,但相关机制有待进一步阐明。深入理解多不饱和脂肪酸对K_V7和BK_Ca通道调节作用效果和分子机制,有助于全面理解K_V7和BK     

黔中喀斯特木本植物功能性状变异及其适应策略

性状变异反映了植物的生活史对策。该研究以贵州普定县天龙山10种木本植物为对象, 通过分析枝叶和根系9个功能性状的种间与种内变异, 揭示植物对喀斯特生境的适应策略。结果表明: (1) 9个性状变异程度不同, 细根组织密度的种间和种内变异系数最大, 分别达96.47%和51.44%, 小枝干物质含量的种间与种内变异最小, 分别为11.67%和6.83%。(2)种间水平的细根组织密度在不同物种中没有显著的差异, 比根长、叶厚度、叶面积、比叶面积、叶干物质含量、叶组织密度、小枝干物质含量和小枝组织密度均表现出显著的差异。在种内, 比叶面积差异显著, 其他性状差异不显著。(3)绝大多数叶和枝性状间显著相关, 比根长与比叶面积显著负相关, 其他根系性状与枝叶性状相关性不显著。总之, 与同纬度非喀斯特地区植物相比, 普定喀斯特地区植物具有较小的叶面积和比根长度, 较大的叶干物质含量、叶组织密度等一系列有利于减小蒸腾和储存养分的功能性状组合, 这可能是其适应干旱贫瘠的喀斯特环境的主要生态策略。     

CREB4基因的表达谱分析和功能初步研究

cAMP反应元件结合蛋白(cAMPresponseelement-bindingproteins,CREB)是一个哺乳动物转录因子家族,通过cAMP反应元件(cAMPresponseelement,CRE)介导cAMP和钙离子依赖性基因表达。CREB4是CREB转录家族的新成员。人肿瘤MTCpanel结果显示,CREB4在人肺癌LX-1、结肠腺癌CX-1、前列腺癌PC-3、结肠癌G1-112和胰腺癌G1-103中有表达。构建表达CREB4-LexA和CREB215~395aa-LexA的pLexA融合质粒分别转化含p8opLacZ报告质粒的酵母EGY48菌株,诱导表达后发现CREB4蛋白为转录激活因子,N端决定其转录激活活性。亚细胞定位结果显示,全长CREB4蛋白定位于细胞质,而缺失C端假定转膜结构域的CREB41~275aa蛋白突变体则转移至细胞核内。表达谱结果显示CREB4蛋白可能在人多种肿瘤组织的基因表达调控中起作用,其C端假定的转膜结构域与其转录激活功能密切相关。