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应用随机RNAi文库,筛选了与胚胎干细胞自我更新和分化调控相关基因,发现了多个阳性候选基因,对其中的1个阳性候选基因肌管素1(myotubularin, MTM1)基因进行了深入研究.MTM1是属于蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPase)蛋白家族的蛋白,其基因突变导致肌管性肌病.MTM1在胚胎干细胞中的功能到目前为止还不清楚.研究证实,MTM1在小鼠胚胎干细胞系CCE和R1均有表达.应用RNA干扰及集落形成实验证明,MTM1表达抑制后,处于自我更新状况胚胎干细胞集落的比例显著增加,提示MTM1在胚胎干细胞自我更新和分化的调控中起了重要的作用. 相似文献
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采用等位酶技术,分析了葫芦苏铁5个居群的遗传多样性。分析6个酶系统,共获得了13个基因位点, 结果表明:葫芦苏铁具有较高水平的遗传变异性,多态位点百分率(P)为56.9%,等位基因平均数A=1.62,等 位基因多样性指数Ho=0.105,He=0.164,居群杂合体过量的位点为50%。居群遗传结构分析表明,大部分 遗传变异(93.6%)存在于居群内(FST=0.064),居群间分化程度甚微。根据葫芦苏铁的居群遗传结构式样并 结合相关研究,提出了就地保护所有居群,迁地保护从东一、王下和水田三个大居群取样的保护策略。 相似文献
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根据鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(Infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)丰要衣壳蚩白(Major Capsid protein,MCP)基因(mcp)序列设计引物,PCR扩增得到一长约1400bp的DNA片段,将其克隆到pGEM-T Easy Vector。氨基酸亲水性分析表明,在150—250位氨基酸之间亲水性很高,可构成主要抗原决定簇及形成跨膜区。mcp基因经PCR改造后克隆至原核表达裁体pBV220,构建表达MCP的大肠杆菌基因工程菌,该工程菌经42℃诱导,SDS—PAGE检测,在约50kDa处有一特异蛋白带,含量约为菌体总蛋白的23%。用纯化和复性后的蛋白免疫新西兰大白兔制备抗血清,Western—blotting分忻显示,重组MCP制备的抗血清能与ISKNV MCP特异结合,说明表达产物具有与ISKNV MCP相似的抗原特性。 相似文献
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贵州地方山羊品种的RAPD分析 总被引:12,自引:0,他引:12
用180条引物对黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊和黔北麻羊4个贵州地方山羊品种(种群),以及南江黄羊和波尔山羊进行RAPD分析,其中27条引物扩增出多态性图谱。这27条引物共扩增出281条带,多态带为115条,平均多态频率为40.92%(范围20%~80%);每条引物平均扩增条带为10.41条(范围4~16条);扩增带分子量在210~2800bp。贵州白山羊与贵州黑山羊之间的遗传距离指数(0.0605)最小,而波尔山羊与其他品种之间的遗传距离指数(0.1059~0.1488)最大。NJ法聚类结果显示,贵州白山羊与贵州黑山羊间的亲缘关系最近,其次为黔北麻羊,而黔东南小香羊与其他3个贵州地方品种的亲缘关系较南江黄羊还远。分析表明,黔东南小香羊在遗传上为一独立的品种;而贵州地方山羊品种间具有较近的亲缘关系,遗传变异较小,具有较高的遗传稳定性。 相似文献
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Yu XY Song YH Geng YJ Lin QX Shan ZX Lin SG Li Y 《Biochemical and biophysical research communications》2008,376(3):548-552
Glucose toxicity is an important initiator of cardiovascular disease, contributing to the development of cardiomyocyte death and diabetic complications. The present study investigated whether high glucose state could induce apoptosis of rat cardiomyocyte cell line H9C2 through microRNA regulated insulin-like growth factor (IGF-1) signaling pathway. Our data showed that H9C2 cells exposed to high glucose have increased miR-1 expression level, decreased mitochondrial membrane potential, increased cytochrome-c release, and increased apoptosis. Glucose induced mitochondrial dysfunction, cytochrome-c release and apoptosis was blocked by IGF-1. Using prediction algorithms, we identified 3′-untranslated regions of IGF-1 gene are the target of miR-1. miR-1 mimics, but not mutant miR-1, blocked the capacity of IGF-1 to prevent glucose-induced mitochondrial dysfunction, cytochrome-c release and apoptosis. In conclusion, our data demonstrate that IGF-1 inhibits glucose-induced mitochondrial dysfunction, cytochrome-c release and apoptosis and IGF-1’s effect is regulated by miR-1. 相似文献
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草鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达 总被引:5,自引:0,他引:5
为构建草鱼 (Ctenopharyngodonidellus )胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )大肠杆菌表达质粒 ,对已克隆到的草鱼IGF Ⅰ基因进行改造 .改造后的基因去除了原cDNA的信号肽和E区序列 ,并在基因的两端分别加入起始密码子和终止密码子 .将改造后的编码草鱼IGF Ⅰ成熟肽基因亚克隆到pBV 2 2 0中 ,构建成表达质粒pBVgIGF7.转化大肠杆菌 (Escherichiacoli)进行表达 .SDS PAGE显示 ,含重组表达质粒的菌株经热诱导后表达出一约 7 5kD的特异蛋白 .表达量占菌体总蛋白的2 0 0 3% ,表达产物主要以包涵体形式存在 .重组蛋白经纯化和复性后 ,采用MTT法测定其对草鱼吻端成纤维细胞PSF和草鱼卵巢细胞CO的促增殖作用 .结果表明 ,所获得的重组草鱼IGF Ⅰ具有生物活性 相似文献
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