MBL 在结肠直肠癌中的基因分型

目的:MBL是补体激活凝集素途径的关键因素。MBL基因多态性影响MBL血清水平。结肠直肠癌患者血清MBL水平升高,低水平的MBL则预示着术后肺炎的发生,目前还不清楚此相关性是否与遗传相关。本实验分析调查了结肠直肠癌患者和健康对照者的MBL基因分型,评估基因分析和复发率、生存率之间潜在的相关性。方法:使用TaqMan基因分型分析法和实时定量PCR分析MBL基因的4个SNP、启动子区2个SNP、非编码区1个SNP;ELISA测定标本血清MBL含量。结果:所有标本中发现了8种不同的MBL单体型,它们在患者和健康者中出现频率几乎是完全一样的;YA/YA基因型与高水平的MBL相关,YO/YO与低水平的MBL水平相关,6种不同基因型CRC患者的MBL水平存在着明显不同。结论:MBL基因型与血清MBL浓度显著相关(P<0.0001);突变型B,C,D和启动子单体型Y,X对MBL含量的影响起主要作用;MBL基因型和术后感染并发症没有明显相关性(P=0.33),与复发癌和存活时间也没有明显相关性(P=0.74)。因此,从基因水平还不能解释为何结肠直肠癌患者血清MBL水平增加。对比已经检测出的血清MBL水平,其基因型还不能预测结肠直肠癌患者的疾病进程。     

凡纳滨对虾7个不同家系遗传差异的微卫星标记分析

应用7对微卫星引物对凡纳滨对虾3个世代共7个家系进行了遗传多样性分析,共检测到20个等位基因,每个位点的等位基因数为2-3个,平均为2.86个,观测杂合度(H0)、期望杂合度(H0)、多态信息含量(PIC)分别为0.47-0.90、0.50-0.66、0.37-0.58,平均为0.61、0.60、0.51,说明凡纳滨对虾具有较高的遗传杂合水平.F2代的多样性水平略高于F1代,而F3代则明显低于F1代和F2代.两两家系间的遗传分化指数FST介于0.01-0.34之间,其中C-F1和L-F1家系之间FST最小(0.01),C-F1和O-F3家系之间FST最大(0.34),表明世代间的家系遗传分化程度大于同一世代的家系.各家系间的Nei's遗传距离和FST分析结果相一致,表明凡纳滨对虾世代间具有明显的遗传分化.本试验将为开展凡纳滨对虾家系选育工作提供理论依据和技术指导,并对甲壳动物的遗传选育具有参考价值.     

实时荧光定量PCR技术在鱼类病害研究中的应用

实时荧光定量PCR技术是一种新的核酸定量技术,通过检测PCR产物中荧光信号强度达到定量的目的,与常规PCR相比,具有无污染、特异性强、检测灵敏、定量准确等特点,该技术在分子诊断、动植物检疫等方面得到了广泛的应用.目前水产养殖业处于飞速发展时期,其中鱼类的病害问题也日益突出,为了预防和控制鱼类病害,实时荧光定量PCR技术已逐渐应用于鱼类病害的研究中.该文将从实时荧光定量PCR的技术原理、主要类型以及实时荧光定量PCR技术在鱼类病害研究的应用研究作一综述.     

表达重组别藻蓝蛋白质粒在工程菌株中的遗传稳定性研究*

将含有表达重组别藻蓝蛋白基因的重组质粒pMal-2X的工程菌株P1分别在含有Amp的LB固体培养基上采用划线法连续传代至100代,其生长速度(在LB培养基中)、菌落形态和抗生素抗性等方面与原始种子库无明显差异;取第10,20,50,100代提取质粒DNA经EcoRⅠ限制性内切酶酶切检查,酶切图谱没有改变。DNA测序未见apc基因变异。原代菌株与传代第10,20,50和100代菌株经诱导培养,其rAPC表达水平、菌体蛋白的SDS-PAGE图谱及重组蛋白的免疫原性均无明显差异。以上结果表明,重组质粒pMal-     

福尔马林灭活柱状黄杆菌对草鱼免疫相关基因表达的影响

在本研究中,将福尔马林灭活的柱状黄杆菌菌苗（FKG4）经腹腔注射免疫草鱼,以注射灭菌PBS作对照,分别在免疫后1、7、15和28d,提取受免鱼和对照鱼肝脏、脾脏和头肾3种组织中的总RNA并反转录成cDNA,利用Real-time PCR方法对不同组织中C-反应蛋白（CRP）、主要组织相容性复合体I（MHC Ⅰ）、肿瘤坏死因子（TNFα）、白介素1（IL-1β）、白介素8（IL-8）、Ⅰ型干扰素（IFN Ⅰ）等6种免疫相关基因的表达进行定量分析。结果发现CRP在受免鱼肝脏中的表达于免疫后1、7d显著性高于对照鱼,而在脾脏与头肾中的表达未出现显著性差异;MHC Ⅰ在受免鱼3种组织中的表达于免疫后1、7、15d都显著性高于对照鱼;TNFα在3种组织中的表达水平都较低,但都于免疫后1、7天显著性高于对照鱼;IL-1β在3种组织中的表达于免疫后1d都显著性高于对照鱼,但只有在头肾中的表达在免疫后7d时仍保持显著性差异;IL-8在3种组织中的表达都只是于免疫后1d显著性高于对照鱼;TNFα、IL-1β及IL-8等三种炎症因子的基因表达在免疫后15d都恢复到对照鱼的水平;而IFN Ⅰ在3种组织中的表达与对照组之间未出现显著性差异。结果表明,FKG4注射免疫可以显著提高草鱼3种组织中与抗菌免疫相关的基因表达,从而增强鱼体抵抗细菌性病原的免疫力。     

自然杀伤细胞和自然杀伤T细胞在动脉粥样硬化形成中的作用

动脉粥样硬化发生发展与免疫细胞参与的免疫反应密切相关,其中自然杀伤细胞主要是通过释放IFN-γ、穿孔素和颗粒酶等方式发挥生物学作用,自然杀伤T细胞通过释放多种细胞因子影响动脉粥样硬化形成,但其具体机制未明。本文就自然杀伤细胞和自然杀伤T细胞对动脉粥样硬化的影响做一综述,为动脉粥样硬化及其相关疾病的防治研究提供新的思路。     

真菌中RNA干扰的生物学功能

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种保守的真核生物基因调控机制,它利用小的非编码RNA介导转录/转录后的基因沉默。虽然部分真菌丢失了RNAi系统,但随着对真菌RNAi机制研究的增加,越来越多的证据表明,真菌的RNAi系统不但参与维持基因组完整性,其在调节真菌生长发育、介导异染色质组装、促进着丝粒进化、调节真菌耐药性与毒力等方面也具有重要作用。本文主要对真菌中RNAi的生物学功能进行综述,以期为进一步深入研究真菌RNA干扰机制提供一定的理论与研究基础。     

定陶汉墓出土汉砖表面及其储存环境真菌病害的分析与防治

【背景】定陶王墓地M2汉墓出土了一批处于防护层的重要汉砖,目前部分汉砖表面出现了真菌病害问题。【目的】根据现场文物保护状况,选取了5块汉砖表面的微生物病害样本,检测并分析了汉砖表面的真菌病害,将分离得到的7株真菌进行抑菌试验。【方法】使用扫描电镜观察、高通量测序、纯培养和抑菌试验等方法对样本中的真菌进行分析。【结果】发现未经抑菌处理的汉砖表面真菌病害问题严重,经75%乙醇和0.5%硝酸咪康唑处理过的汉砖表面真菌病害问题减弱。汉砖上的主要真菌不同,汉砖9表面含量最多的真菌为Boeremia,汉砖13表面含量最多的为虫草科(Cordycipitaceae)。然而硝酸咪康唑和硼酸硼砂并无抑菌效果,抑菌产品K100(2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮)具有较好的抑菌效果。【结论】本研究对分析和防治汉砖表面的真菌病害及对汉砖进行科技保护具有重要意义。     

刚度可调丝素蛋白-胶原复合水凝胶影响人乳腺上皮细胞生长与表型

细胞外基质(extracellular matrix, ECM)的刚度特性与乳腺组织的生理及病理状态密切相关。本研究旨在探讨刚度可调的丝素蛋白-胶原复合水凝胶培养基质对正常乳腺上皮细胞生长与表型的影响及其作用机制。利用辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)-H2O2酶促交联反应制备刚度可调的丝素蛋白-胶原复合水凝胶,用旋转流变仪检测其弹性模量。接种人乳腺上皮细胞(MCF-10A细胞)至不同刚度(19.10～4 932.36 Pa)复合水凝胶并维持三维(three dimensional, 3D)培养,用CCK-8试剂盒检测MCF-10A细胞增殖能力,并利用whole-mount洋红染色和苏木素-伊红(HE)染色评价细胞的形态与分布。结果显示,随着基质刚度增加,MAC-10A细胞增殖能力减弱,并且其形成的腺泡样上皮结构逐渐减少、分支样结构增多。同时,基质刚度的增加显著阻遏MCF-10A细胞生理极性的建立。实时定量PCR结果显示,伴随培养基质刚度的增加,ECM重塑相关基因mmp-2、mmp-3、mmp-9表达水平显著上调,而上皮-间质转化(epitheli...