刚度可调丝素蛋白-胶原复合水凝胶影响人乳腺上皮细胞生长与表型 |
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引用本文: | 张一宁,焦慧,郭丽娜,马馨雨,盖高成,张津滔,阳文青,王秀丽.刚度可调丝素蛋白-胶原复合水凝胶影响人乳腺上皮细胞生长与表型[J].生理学报,2022(3):381-391. |
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作者姓名: | 张一宁 焦慧 郭丽娜 马馨雨 盖高成 张津滔 阳文青 王秀丽 |
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作者单位: | 大连医科大学基础医学院 |
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基金项目: | supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 31771068); |
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摘 要: | 细胞外基质(extracellular matrix, ECM)的刚度特性与乳腺组织的生理及病理状态密切相关。本研究旨在探讨刚度可调的丝素蛋白-胶原复合水凝胶培养基质对正常乳腺上皮细胞生长与表型的影响及其作用机制。利用辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)-H2O2酶促交联反应制备刚度可调的丝素蛋白-胶原复合水凝胶,用旋转流变仪检测其弹性模量。接种人乳腺上皮细胞(MCF-10A细胞)至不同刚度(19.10~4 932.36 Pa)复合水凝胶并维持三维(three dimensional, 3D)培养,用CCK-8试剂盒检测MCF-10A细胞增殖能力,并利用whole-mount洋红染色和苏木素-伊红(HE)染色评价细胞的形态与分布。结果显示,随着基质刚度增加,MAC-10A细胞增殖能力减弱,并且其形成的腺泡样上皮结构逐渐减少、分支样结构增多。同时,基质刚度的增加显著阻遏MCF-10A细胞生理极性的建立。实时定量PCR结果显示,伴随培养基质刚度的增加,ECM重塑相关基因mmp-2、mmp-3、mmp-9表达水平显著上调,而上皮-间质转化(epitheli...
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关 键 词: | 基质刚度 三维培养 微环境 上皮-间质转化 |
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