低氧对胎盘基蜕膜间充质干细胞增殖、凋亡和血管内皮细胞生长因子表达的影响

本文旨在探讨生理低氧和无血清培养条件下人胎盘基蜕膜间充质干细胞（placental decidua basalis—mesenchymal stemcells,PDB-MSCs）的生物学特征和细胞因子的表达情况。采用密度梯度离心法培养获得PDB—MSCs,利用MTT法、流式细胞术检测PDB—MSCs在不同氧浓度（20％02和1％O2）、有无血清（10％FBS和0％FBS）条件下各个时间点（6h、12h、24h、48h、72h、96h）的增殖和凋亡情况,并采用酶联免疫吸附实验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测无血清条件下各个时间点细胞上清液中血管内皮细胞生长因子（vascularendothelial growth factor,VEGF）含量。结果显示,在特定的时间内低氧可以促进PDB—MSCs增殖（P〈0．01,n=3）,而血清对PDB—MSCs增殖的影响与氧浓度关系密切;同时,在本实验条件下,低氧、无血清分别或联合培养不会导致PDB—MSCs凋亡（P〉0．05,n=3）;在无血清条件下,24h时低氧组PDB-MSCs表达较高水平的VEGF。以上结果提示,PDB—MSCs可能成为缺血相关组织工程产品种子细胞的一个新来源。     

日本三角涡虫生殖系统组织结构的观察

涡虫在动物系统演化史上占有十分重要的地位,雌雄同体,具有很强的再生能力,因此,对其生殖系统组织结构进行深入研究具有重要的意义.本文用3种染色方法(H.E染色、Masson染色、Van Gieson染色)显示了日本三角涡虫(Dugesiajaponica)生殖系统的组织结构并对其进行了光镜观察.结果表明.该类涡虫生殖系统为雌雄同体.雌、雄性生殖系均由生殖腺和生殖管道构成,雌性生殖腺包括卵巢、卵黄腺和交配囊,生殖管道包括输卵管、交配囊柄;雄性生殖腺主要是精巢,生殖管道包括输精囊、输精管、球腔、射精管4部分.交配囊由单层柱状上皮构成,胞质强嗜碱性,胞核位于上皮基底面,游离面胞质呈现很多泡状结构;卵黄腺为单细胞腺,灯泡状,其核较小,位于柄部.因此,可以确定交配囊具有外分泌的功能;卵黄腺的数目存在周期性.     

拟南芥细胞异三聚体G蛋白的分离纯化

以拟南芥哥伦比亚Columbia(Col-0)野生型悬浮培养细胞为材料,采用超声波破碎、匀浆、离心、40%~60%饱和度硫酸铵分步沉淀、Sephadex G-25脱盐、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换、Sephadex G-200凝胶过滤,最后经过Sepharose CL-6B得到纯化的目的蛋白,蛋白收率为0.097%。纯化的蛋白质经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定显示为一条带,经Western blotting证实为G蛋白。把经Native-PAGE鉴定的蛋白质的条带回收,进行SDS-PAGE显示有3条带。一条是Gα亚基,其分子量为60kDa左右;另外2条带分子量为45kDa和35kDa,可能是β、γ亚基,初步证实拟南芥中存在异三聚体G蛋白。G蛋白提取方法的建立为在基因突变型拟南芥中G蛋白功能的研究奠定基础。     

尼泊尔杞木的化学成分研究

从尼泊尔杞木(Alus nepalensis)地上部分的95%乙醇提取物中首次分离到9个化合物,应用波谱方法或与已知品对照的手段鉴定它们为乙酰齐墩果酸(1)、齐墩果酸(2)、羽扇豆醇(3)、β-谷甾醇(4)、β-香树酯醇(5)、euseaphic acid(6)、喜树碱(7)β-胡萝卜甙(8)、绿原酸(9).尼泊尔杞木是喜树碱第十一个植物来源.喜树碱在尼泊尔杞木的干燥叶和茎中的含量分别是923和192μg/g.     

蓝浆果花冠形态特征及其与果实横径相关性的分析

对兔眼蓝浆果（Vaccinium ashei Reade）、北方高丛蓝浆果（V.corymbosum L．）和南方高丛蓝浆果（V.corymbosum hybrids）3个品种群及南方高丛蓝浆果实生系的花冠长度、花冠宽度、花冠长宽比和花冠口径大小等特征进行了测定和比较,并研究了花冠形态特征参数与果实横径的相关性。研究结果表明,蓝浆果不同品种群间和同一品种群内不同品种间的花冠形态特征参数差异较大;依据花冠形态特征参数,可将供试的兔眼蓝浆果和南方高丛蓝浆果各品种及南方高丛蓝浆果各实生系初步划分为4种类型,将供试的北方高丛蓝浆果各品种划分为3种类型。此外,只有南方高丛蓝浆果各品种及其实生系的果实横径与花冠宽度相关性显著（P〈0．05）,相关系数分别为0．639和0．324。     

外源报告基因EGFP在盐藻中实现瞬时表达

探索杜氏盐藻 (Dunaliellasalina)的转基因方法和筛选方法 .利用烟草花叶病毒启动子 (CaMV35S)、衣藻叶绿体atpA启动子与来源于水母的加强型绿色荧光蛋白报告基因 (EGFP)构建表达载体pART7GFP和pUCGFP ,转化盐藻 .EGFP在CaMV 35S启动下表达出绿色荧光蛋白 ,在荧光显微镜下看到发绿色荧光的转基因盐藻 .根据荧光数目进行统计 ,转化效率高于 5 % .衣藻来源的启动子atpA在盐藻中未能启动EGFP的表达 .用直径 1μm的金粉颗粒和 0 6 μm的金粉进行基因枪法转化 ,1μm的金粉颗粒成功将外源基因导入盐藻 ,用 0 6 μm的金粉配合多种技术参数也没有将外源基因导入盐藻 .EGFP可以用作盐藻遗传转化的报告基因使单细胞真核生物盐藻可以利用流式细胞术 (FACS)等技术进行筛选 ,从而避开平板筛选转基因盐藻的限制 ,并使转基因盐藻实现无抗生素筛选成为可能     

巨细胞病毒感染致MRC-5细胞周期及Cyclin E表达的变化

本文研究了巨细胞病毒感染人二倍体细胞MRC-5后诱导产生高水平Cyclin E,Cyclin E／cdk2激酶活性增加和导致细胞周期阻滞。应用流式细胞仪分析表明10PFU／cell的病毒量感染MRC-5细胞72h后,29％细胞位于S期,69％细胞位于G2/M期,只有2％细胞位于G1／G0期。应用双抗夹心ELISA法检测,感染病毒20h后,MRC-5细胞中Cyclin E含量比对照细胞高出8倍。感染细胞中Cyclin E／cdk2激酶活性基本上与Cyclin E含量相关联。     

BALB/c-HSF1基因剔除小鼠的引种保种与繁殖特性的观察

对引入的BALB／c-HSF1基因剔除小鼠近一年的繁殖,生长发育情况进行了系统观察。并就三种繁殖方式的繁殖鼠交配率,受胎率,分娩率,胎间隔及隔及哺乳期仔鼠成活率进行了比较,结果表明,与野生型（HSF1^ / ）动物比较,HSF1的缺乏对动物的繁殖有一定的影响,胎间隔与动物的胎次无明显的相关性,而生长曲线与BALB／c的生长曲线类似,这种现象可能与HSF1基因剔除小鼠有BALB／c-HSF1的血缘关系。     

广州地区肺炎克雷伯菌对常用抗生素耐药性调查

目的：了解广州地区肺炎克雷伯菌的耐药情况。指导临床合理用药。方法：对广州地区12家医院1998年-2001年从临床分离的869株肺炎克雷伯菌采用纸片扩散法,严格按照美国NCCLS制定的标准进行药敏试验,结果：四年来非ESBＬ的肺炎克雷伯菌对β－内酰胺类抗生素耐药率有逐步上升趋势,产ＥＳＢＬ菌株阳性率分别是43.1%,42.7%,31.6%和36.5%,耐药率最低仍是亚胺培南。结论：本地区肺炎克雷伯菌产ESBL阳性率较高,应重视ESBL的检测和药物敏感性试验。     

PCR方法在HSF1基因敲除小鼠基因型分析中的应用

目的　为HSF1基因敲除鼠探索快速、简单的基因型PCR检测方法。方法　设计两对引物扩增野生型HSF1基因和HSF1缺陷突变基因的DNA片段 ,用PCR仪梯度方案测试最佳退火温度 ,并将所得基因型结果与经典的Southernblot方法比较。结果　野生型仅在 5 6 2bp处有一条条带 ,突变纯合子仅在 377bp处有一条条带 ,杂合子则在377bp和 5 6 2bp处出现两条条带。用PCR方法获得的HSF1基因分析结果与经典的Southernblot方法获得的结果完全一致。结论　用PCR方法分析HSF1基因敲除鼠的基因型具有快速、简单、廉价和适用的特点