西藏小型猪胚胎成纤维细胞的分离培养及性别鉴定

目的探索和建立西藏小型猪胚胎成纤维细胞体外分离培养及性别鉴定的技术方法。方法取35d的西藏小型猪胚胎分离胚胎成纤维细胞,进行体外原代培养及传代培养,观察细胞成纤维细胞的形态和生长状况。根据猪Y染色体上性别决定基因SRY设计引物进行性别鉴定,同时以β珠蛋白作为内参基因,建立PCR反应体系鉴别胚胎的性别。结果西藏小型猪胚胎成纤维体外分离后,呈贴壁生长,快速增殖。PCR性别鉴定结果表明雄性胚胎细胞可扩增出一特异性SRY基因条带,而雌性则没有。该法可快速鉴定胚胎的性别,可用于体细胞克隆动物早期性别鉴定。结论研究结果表明利用胶原酶消化法所获得的西藏小型猪胚胎成纤维细胞可在体外稳定培养并传代,利用PCR鉴定猪胎儿性别具有简单、快速、准确的特点,可应用于克隆猪研究中体细胞系的早期性别鉴定。     

长双歧杆菌NCC2705菌株应激蛋白的研究

研究长双歧杆菌NCC2705菌株发酵至稳定期时应激蛋白的表达情况。根据乳酸乳球菌IL1403菌株蛋白质参考图谱及长双歧杆菌NCC2705基因组注释中应激蛋白的分子量与等电点,确定应激蛋白在双向电泳凝胶上的相应蛋白点,并利用MALDI-TOF和/或ESI-MS/MS对相应蛋白质点进行鉴定。每个蛋白质点的肽指纹图谱均在长双歧杆菌NCC2705的蛋白质数据库用Mascot进行检索,共鉴定到44个蛋白点对应8个应激蛋白。这些蛋白为亲水性酸性蛋白,大多具有翻译后修饰现象,它们基因的CAI值除DnaJ外,其余均在0.5以上,在全细胞表达谱中为高丰度蛋白;此外,菌体具有较强的抗脂质过氧化和清除DPPH自由基的能力,而对羟自由基和超氧负离子的清除力较弱,推测鉴定到的具有逆转氧化损害作用的碱性过氧化氢还原酶(ahpC)可能是体内表达的降低氧损伤的主要酶。     

中国新疆马鹿亚种头骨形态的地理变化

新疆马鹿（Cervus elaphus）有3个亚种（塔里木亚种C．e．yarkandensis、天山亚种C．e．songarieus和阿勒泰亚种C．e．sibirieus）。本文报道新疆马鹿3个亚种头骨形态学特征描述和14项形态学指标测定。被测定的指标主要有颅全长（GLC）、颜面长（FL）、鼻骨全长（GLN）、前头长（MFL）、眼窝长（OFW）、基底全长（CBL）、口盖最大幅（GPB）、前臼齿间距离（Pm—P）、眼间最小幅（ZB）、筋突起高（CH）、关筋突起高（LH）、牙齿间隙裂高（DH）、前下颚骨高（HMP2）、后下颚骨高（HMM,）,采用主成分分析并在这3个亚种之间进行了比较。结果表明：1）阿勒泰亚种的头骨长度和高度值比塔里木亚种大,宽度值比塔里木亚种小;2）天山亚种的头骨大小一般处在塔里木亚种和阿勒泰亚种的中间,但三者之间没有显著性差异;3）阿勒泰亚种和天山亚种的头骨形态测量数据比较接近,塔里木亚种的头骨形态比较特殊（塔里木亚种的头骨短而宽,明显区别于其他两亚种的特征）。在新疆导致马鹿3个亚种头骨形态差异的主要因素有栖息地环境和气候因素的差异。阿勒泰亚种和天山亚种栖息在大陆性气候寒冷区的针叶林中,冬天气候比较寒冷;塔里木亚种栖息在大陆性气候温热区的塔里木河流域胡杨林中,气候干旱炎热。因此,阿勒泰和天山亚种在适应寒冷的气候并适应生软食物的食性过程中头骨变成长细,而塔里木亚种长期适应干旱炎热并适应生硬食物的食性使头骨变的短而宽。     

动物生物学实践教学改进的探讨

动物生物学实践教学是生命科学本科教学的重要内容,为了适应高等教育改革和宽口径人才培养模式的要求,在动物生物学实践教学中,以培养学生技能为指导思想,对其实践教学的内容和方法进行改革,旨在实践教学中充分发挥学生的主观能动性,激发学生兴趣,培养学生的综合实践能力.同时,针对动物生物学实验及实习教学中存在的问题,提出了实践教学改进方面可行的建议.     

历史生物地理学中的BPA分析法Ⅱ :二级BPA

BPA(broks parsimony analysis)是历史生物地理学研究的重要分析方法之一,包括初级BPA和二级BPA。前者主要用于寻找共同格局,后者是对网状进化格局的解释。本文详细介绍了二级BPA的分析方法,并就BPA与其它历史生物地理学／支序学派的研究方法进行了区别。     

猪丹毒丝菌C43065株表面保护性抗原AN端保护区在大肠杆菌中的表达

目的：在大肠杆菌中表达猪丹毒丝菌C43065株表面保护性抗原A（SpaA）N端保护区（SpaA-N）,并检测其抗原性。方法：利用PCR方法从猪丹毒丝菌C43065株基因组中扩增出spaA基因片段,构建pMD18-spaA重组质粒并对插入片段进行测序;以pMD18-spaA重组质粒为模板,PCR扩增得到spaA-N基因片段,构建重组表达质粒pGEX-spaA-N,经序列测定证实正确后转化大肠杆菌BL21（DE3）,再经IPTG诱导表达GST-SpaA-N融合蛋白并纯化。结果：扩增得到的spaA基因长1881bp,编码由626个氨基酸残基构成的多肽;SDS-PAGE和Western印迹检测结果表明,诱导表达获得相对分子质量约64000的GST-SpaA-N融合蛋白,该融合蛋白能与相应抗体发生特异性反应。结论：获得了在大肠杆菌中可溶性表达的GST-SpaA-N融合蛋白,为进一步研究猪丹毒丝菌免疫保护性抗原奠定了基础。     

戊巴比妥钠联用速眠新Ⅱ对西藏小型猪麻醉效果观察

目的观察联合应用速眠新Ⅱ和戊巴比妥钠对西藏小型猪的麻醉效果。方法采用速眠新Ⅱ（0.1mL/kg）肌内注射和3%戊巴比妥钠生理盐水溶液（0.2 mL/kg）静脉注射联合麻醉方法对15头行胚胎移植术的西藏小型猪进行麻醉,观察动物麻醉维持时间、镇痛效果、呼吸频率和心率变化及术后苏醒情况。结果80%（12头/15头）西藏小型猪初始量麻醉状态维持45 min以上,20%（3头/15头）西藏小型猪手术过程中追加麻醉。麻醉期间肌肉松弛效果好,动物呼吸和心率平稳。手术过程中西藏小型猪呼吸频率为（12-22）次/min,心率为（63-85）次/min,麻醉过程中未出现麻醉死亡,术后苏醒时间为30-60 min。结论速眠新和戊巴比妥钠混合麻醉效果好,且麻醉剂量较以往大幅减少,术后苏醒快。戊巴比妥钠联用速眠新复合麻醉对西藏小型猪是一种较理想的麻醉方法,且动物麻醉安全性高。     

西藏小型猪发情周期血清性激素和生化指标的变化规律

目的研究西藏小型猪发情周期内不同阶段血清性激素水平和生化指标的动态变化规律及其相关性。方法对6头雌性西藏小型猪在发情周期内的发情当天、第5天、第10天、第15天、再次发情时分别采血5 mL并分离血清,应用放射免疫法测定血清睾酮（T）、孕酮（P4）、雌二醇（E2）、促卵泡生成激素（FSH）、促黄体生成激素（LH）、泌乳素（PRL）;用自动生化仪测定血清钙（Ca）、镁（Mg）、磷（P）、碱性磷酸酶（ALP）、肌苷（Cre）、总胆固醇（CHO）、总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）。结果在发情周期不同阶段,西藏小型猪P4、CHO水平存在差异显著性;E2和Ca、Mg、CHO间,P4和CHO、TP、ALb间,PRL和P间均呈现显著性相关。结论在发情周期的不同阶段西藏小型猪的血清性激素水平和生化指标呈现规律性变化,部分指标间存在相关性。     

现代罗布人mtDNA 9bp序列缺失频率与DYS287位点多态性研究

目的:研究现代罗布人线粒体DNA 9bp序列缺失频率与Y染色体DYS287位点多态性.方法:分别采用PCR扩增直接测序法和PCR结合琼脂糖凝胶电泳检测法对不同位点的多态性进行分析.结果:在48名无关现代罗布人群个体中,线粒体DNA9bp序列缺失频率为8.3%,在34名无关现代罗布人群男性个体中DYS287全部显示为YAP-.结论:获得现代罗布人线粒体DNA 9bp序列缺失频率与Y染色体DYS287位点多态性数据,为该群体遗传关系的分析、法医学鉴定及该群体的起源提供了一定的遗传背景资料.     

欣欣向荣的中国生理学

在1949年以前,苏中两国的生理学家是彼此不够了解的。从前大多数的中国生理学家对彻底唯物主义的巴南洛夫学说是陌生的。在从帝国主义的压迫和反动的社会制度下解放出来的中国,已消灭了一切妨碍两个伟大国家的科学家互相交往的障碍。出现了广泛地互相瞭解科学研究工作、交换科学文献和在参观实验室时建立个人接触的可能性。必须指出,现在中国的生理学家很熟悉苏联生理学家的著作,并且报导他们最近的工作。著者幸运地能够有机会来瞭解薪中国生理学家的工作。首先,戏子看到了在大多数的实验室和教研室中,由於具有一般的和特殊的建筑、设备的供应以及经济方面和人员方面的保证,所以都创造了极为良好的工作条件。在这方面特别应当提到的是中国科学院