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991.
992.
通过降维把高维系统平衡点的稳定必及根限环的构造用低维系统来判定和实现,给出了一个三种群Lotka-Volterra捕食系统具有两个小扰动极限环的例子。 相似文献
993.
利用重组Pichia pastoris生产腺苷甲硫氨酸 总被引:1,自引:0,他引:1
为改造甲醇利用型酵母Pichia pastoris来生产腺苷甲硫氨酸(SAM,S-adenosylL-methionine),我们将一个带有SAM合成酶基因的胞内表达质粒转化入Pichia pastoris菌株GS115,经过G418抗性筛选得到一株有两个基因拷贝的转化子。该菌在含有甲醇和甲硫氨酸的培养基中生长5d后,其细胞内的SAM的产量比原始菌株提高了30余倍。对该菌生产SAM的培养基中的碳源与氮源进行了优化,结果显示碳源的控制对该菌SAM产量的影响很大。在试管水平,该菌在含有0.75%的L-methionine并且碳源和有机氮源经过一定程度优化的培养基中,生长6d后SAM产量达到1.58g/L。 相似文献
994.
995.
通过碳源、氮源的单因子实验和正交实验,确定了吸水链霉菌NND-52-C菌株产阿扎霉素B最佳的液体发酵培养基组分(%,质量分数)甘油4.5,玉米粉3,黄豆粉1,蛋白胨1,NaNO30.5,NaCl 0.2,CaCO3 0.3,MgSO4·7H2 O0.05,FeSO4 0.05,PH 7.5;阿扎霉素B最佳的发酵条件发酵前期温度30℃,起始pH 7.5;发酵后期温度28℃,pH6.8;接种量10%,装液量30 mL/250mL摇瓶,发酵时间5 d,最终阿扎霉素B的产量达到l 434 mg/L,比原配方以及原发酵条件提高了76%. 相似文献
996.
997.
HIV—1外膜蛋白在甲醇型醇母Pichia pastoris中的表达与鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
为建立用甲醇型酵母Pichia pastoris表达HIV-2Rod gp105的新途径,用PCR方法获得HIV-2Rod gp105基因,并将其克隆到P.Pastoris分泌型表达载体pHILS1中,测序正确后将重组质粒pHILS1-gp105电转化GS115。用PCR法筛选阳性P.Pastoris重组子,并用甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western印迹结果表明,与HIV-1不同,HIV-2的外膜蛋白gp105能在甲醇型酵母Pichia Pastori中诱导表达,产物为-90kD的糖蛋白,具有良好的抗原特异性。 相似文献
998.
999.
【目的】研究嗜盐古菌Haloferax volcanii WFD11菌株以不同芳香酸作为碳源的生长情况;鉴定其通过龙胆酸途径代谢芳香酸过程中的开环酶龙胆酸1,2-双加氧酶的基因,并对其进行生化水平的研究;初步揭示古菌和细菌代谢芳香酸的可能差异。【方法】分别以4 mmol/L的6种不同芳香酸为唯一碳源培养菌株WFD11,利用全自动生长曲线分析仪测定菌株生长情况并绘制生长曲线;利用高效液相色谱检测菌株WFD11代谢3-羟基苯甲酸的中间产物;对菌株WFD11的基因组进行生物信息学分析,寻找潜在的龙胆酸1,2-双加氧酶编码基因,并在Haloferax volcanii H1424中异源表达;通过快速纯化系统(采用Ni2+-NTA亲和层析柱)纯化异源表达的蛋白,以龙胆酸为底物通过紫外分光光度计检测粗酶液和纯化后的龙胆酸1,2-双加氧酶和相关酶学特性;通过实时定量PCR观察hag A的表达类型。【结果】菌株WFD11能以4 mmol/L的3-羟基苯甲酸和3-羟基苯丙酸为唯一碳源和能源生长;高效液相色谱检测证明菌株WFD11通过龙胆酸代谢3-羟基苯甲酸(3HBA);克隆和异源表达了龙胆酸1,2-双加氧酶基因hag A;Hag A粗酶液和纯化蛋白均具龙胆酸1,2-双加氧酶的活性,催化龙胆酸开环生成顺丁二酸单酰丙酮酸;Hag A的龙胆酸1,2-双加氧酶比活力为0.024 8 U/mg,且其活性不依赖于Fe2+;荧光定量PCR实验结果证明hag A是组成型表达。【结论】嗜盐古菌H.volcanii WFD11可能是通过龙胆酸途径代谢芳香酸类物质,为进一步研究古菌和细菌代谢芳香酸的可能差异打下了基础。 相似文献
1000.