伤处理和乙烯对桃ACC氧化酶基因表达的影响

桃果实不耐贮运,特别是溶质水蜜桃、珐I大11＿程技术的发展使番茄果实实现延熟保鲜'－'、人f［］也试图通过乙烯合成的关键酶的］i义HNA技术来延长桃果实的贮运期。：ICC氧化酶是乙烯生物合成的关键酶之一,ACC氧化酶4peJL从番茄'、矮牵牛。。。桃卜'、苹果、'等许多植物...     

miR-939-5p对糖尿病视性网膜病变和视网膜微血管内皮细胞的调控作用

摘要 目的：探究miR-939-5p对糖尿病性视网膜病变和人视网膜微血管内皮细胞（HRMEC）的调控作用。方法：将miR-939-5p模拟物（miR-939-5p-mimic）或miR-939-5p抑制剂（miR-939-5p-inhibitor）转染到HRMEC中,并将细胞用高糖（HG组,25 mM）或低糖（LG组,5 mM）处理24 h。通过细胞计数试剂盒8（CCK-8）来检测细胞活力,EdU法检测细胞DNA的复制能力,Hoechst 33258染色检测细胞凋亡,使用双荧光素酶试剂盒E2920验证miR-939-5p与NOS2 3''-UTR之间的结合关系。对大鼠腹腔注射65 mg/kg的链脲佐菌素（STZ）诱导DR模型,通过RT-qPCR检测miR-939-5p水平,Western Blot检测诱导型一氧化氮合酶（NOS2）水平,苏木精伊红（HE）染色检查大鼠视网膜形态,免疫组织化学染色检测视网膜Claudin-5和Occludin的表达,伊文思蓝染色检测大鼠血视网膜屏障（BRB）通透性,ELISA法检测大鼠房水中白介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平。结果：与LG组的HRMEC相比,HG组的miR-939-5p显著降低,而NOS2蛋白水平显著升高（P<0.05）。荧光素酶活性测定显示,与NC-mimic组相比,miR-939-5p-mimic与pGL3-NOS2-WT共转染组的荧光素酶活性显著降低（P<0.05）。与HG+NC-mimic组相比,HG+miR-939-5p-mimic组的miR-939-5p水平和细胞活力显著升高,而NOS2蛋白水平和细胞凋亡率显著降低（P<0.05）。与DR组相比,miR-939-5p-Agomir组大鼠视网膜组织病变减轻,Claudin-5和Occludin的表达水平明显升高,伊文思蓝浓度显著降低（P<0.05）;与DR组相比,miR-939-5p-Agomir组大鼠房水中IL-1β和TNF-α的水平均显著降低（P<0.05）。结论：在高糖培养的HRMEC中和DR大鼠视网膜中,miR-939-5p为低表达模式,NOS2为高表达模式。上调miR-939-5p通过靶向抑制NOS2对DR大鼠视网膜和HRMEC提供保护作用。     

利用CRISPR/Cas9n double nick系统构建人DNAH2基因敲除的U2OS细胞株

基于CRISPR/Cas9n double nick技术构建人DNAH2(Homo sapiens dynein,axonemal,heavy chain 2)基因敲除的U2OS稳定细胞株,旨在研究DNAH2基因的生物学功能。首先设计并合成A、B两个sg RNA(Single guide RNA)以及各自的互补链,退火连接形成DNAH2 sg RNA-A、B双链,再分别与带有BbsⅠ粘性末端的p X462线性载体相连,形成p X462-DNAH2-A、p X462-DNAH2-B重组真核表达质粒。质粒共转染至U2OS细胞后,加入嘌呤霉素,以有限稀释法获得阳性单克隆细胞株,再以蛋白印迹实验检测DNAH2蛋白的表达,最后通过PCR-基因测序技术分析突变特点。结果显示A、B sg RNA双链成功插入p X462载体,U2OS-DNAH2-KO单克隆细胞株中DNAH2蛋白不表达,DNAH2基因发生移码突变,从而证实利用CRISPR/Cas9n double nick系统成功构建人DNAH2基因敲除的U2OS稳定细胞株,为研究DNAH2基因提供有利工具。     

四川南充太和鹭科鸟类群落空间生态位和种间关系

本文应用空间生态位理论,分析了四川南充太和白鹭自然保护区慈竹林内鹭类繁殖季节的群落结构,对影响鹭类混群繁殖时空分布的因素及各种群间的相互关系进行了探讨.结果 表明:南充太和白鹭自然保护区栖息有白鹭Egetta garzetta、夜鹭Nycticoraxny cticorax、牛背鹭Bubulcus ibis和池鹭Araeola bacchus 4种鹭类种群.4种鹭类具有明显的水平和垂直分布现象,白鹭、夜鹭的水平生态位宽度较大,在垂直生态位宽度上白鹭、夜鹭、牛背鹭都较大,池鹭的最小;生态位重叠值以白鹭-夜鹭间的最高,夜鹭-池鹭间的最小;4种鹭间的聚类分析结果普遍较高.     

亚磁空间生物学效应研究的实验系统

直径2 m的补偿式亚磁空间中,内置非铁磁性智能化多功能实验箱系统,箱内温控范围20~40℃,精度0.1℃,过温报警,湿度可控范围40%~80%,通风和光照任意。箱内中央空间(长×宽×高=66.0 cm ×40.0 cm ×28.3 cm)中,80%、15%和5%的位点剩余磁场分别平均为地磁场的0.5%~0.6%、1.3%~1.5%和2.7%~4.2%。箱内中央空间的高度为43.0 cm时,55%、35%和10%的位点剩余磁场分别平均为地磁场的1.9%、2.3%和3.3%。可用于多种生物学效应的观察和研究。     

锌指蛋白与心脏发育

锌指是最大的DNA结合蛋白家族,是最普遍的核酸识别元件.近年来发现锌指参与生物体的基因转录,复制及蛋白质的合成等各种基因调节和控制过程,心脏发育过程中涉及大量锌指基因.综述了心脏发育过程中起重要调控作用的锌指蛋白以及它们的作用机制.     

生防菌Bs-916 合成脂肽类化合物Bac操纵子突变株构建及功能

摘要：生防枯草芽孢杆菌Bs-916对水稻纹枯病有很好的防治效果。【目的】明确其合成脂肽类化合物操纵子Bac功能,为遗传改良提高Bs-916防效奠定基础。【方法】采用同源重组方法成功更换Bac内源启动子为组成性表达强启动子和插入失活Bac启动子,分别得到突变株BGG104和BGG105。突变株生物学活性测定结果表明：BGG104上清液相对Bs-916上清液对几种病原真菌毒力,血红细胞的溶血能力都显著提高;而BGG105则显著降低。采用6 mol/L盐酸沉淀及甲醇抽提方法从Bs-916和突变株培养液中制备脂肽     

人际关系对重刑犯心理健康影响浅探

监狱中服刑长达10年以上的重刑犯,在封闭的监改环境中,势必产生一系列的心理问题.本文用SCL-90量表对重刑犯的心理健康状况进行测量,并将重刑犯与狱友及管教干警之间的人际关系分为"一般"、"较好"和"好"三个层次.结果表明:重刑犯心理健康水平低于全国常模(p＜0.001);监狱中人际关系好的犯人心理健康水平相对较好,与干警关系主要影响重刑犯的恐惧水平.因此,改善狱友和干警的关系,能够一定程度地提重刑犯高服刑人员的心理健康水平,有助于他们再社会化的改造.     

将制作转基因斑马鱼的实验引入本科生基因工程实验课教学的探索与实践

转基因动物的制备是基因工程的核心技术与重要成果之一, 然而目前在国内高校本科生基因工程实验课中还未见开展制备转基因动物的报道。作者利用科研平台的优势, 将转基因斑马鱼的制作引入本科生基因工程实验课教学, 并对其教学模式进行了探索与实践, 取得了较好的成效, 具有较好的推广价值。     

巴西橡胶树鲨烯合酶基因的克隆与序列分析

鲨烯合酶(SQS )是植物甾醇和三萜化合物生物合成途径中的关键酶。以巴西橡胶树为试验材料,提取胶乳总 RNA,利用 RT-PCR 以及 RACE 的方法克隆橡胶树鲨烯合酶 cDNA 编码区片段,并进行序列分析。结果表明：橡胶树鲨烯合酶 cDNA 编码区为1239 bp,编码413个氨基酸,命名为 HbSQS 。荧光定量分析表明鲨烯合酶基因在不同组织里表达水平存在明显差异,且受乙烯调控。