Bt Cry1Ac抗性粉纹夜蛾离体细胞与敏感细胞mRNA的差异显示

为了研究昆虫对Bt的抗性机制 ,以苏云金芽孢杆菌Cry1Ac活性毒素对粉纹夜蛾离体细胞连续筛选 80代 ,获得了高抗性细胞。采用DDRT PCR技术比较了该抗性细胞与非选择敏感细胞mRNA的差异 ,经反向RNA斑点印迹杂交确证了 5个片段为两种细胞的显著差异表达序列标签(ESTs)。序列分析结果表明 ,敏感细胞特有的三种ESTs都位于cDNA的非编码区 ,两种ESTs(GenBank注册号 :S1 ,CF32 2 4 1 5 ;S3,CF32 2 4 1 7)与数据库中EST没有显著同源性 ,另一种S2(GenBank注册号 :CF32 2 4 1 6)与已登录的某些昆虫的ESTs具有一定的同源性。从抗性细胞特有的R1 (GenBank注册号 :CF32 2 4 1 3)推导出的氨基酸序列与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶有 60 %～63%的同源性 ,从抗性细胞特有的R2 (GenBank注册号 :CF32 2 4 1 4)推导出的氨基酸序列与黏蛋白类有约 30 %的同源性。这些差异表达基因可能与抗性的形成相关。     

贡嘎蝠蛾幼虫肠道真菌多样性分析

[目的]分析贡嘎蝠蛾肠道(Hepialus gonggaensis)幼虫肠道真菌多样性.[方法]采用常规分离与分子鉴定的方法和基于ITS(internal transcribed spacer)基因的RFLP方法,建立贡嘎蝠蛾幼虫肠道真菌的ITS克隆文库,分别用MspⅠ、HaeⅢ和Taq Ⅰ对205个阳性克隆的质粒酶切指纹图谱分析,结果显示有23个不同的RFLP操作分类单元(OTU),对这23个操作分类单元的阳性克隆子进行测序并绘制系统进化树.[结果]结果显示贡嘎蝠蛾幼虫肠道内存在8个属的真菌类群.其中被孢霉属(Mortierella)和丝孢酵母属(Trichosporon)的丰度最高,分别占克隆文库的46.34%和40.00%,鉴定为肠道内的优势真菌类群.用常规分离与分子鉴定方法只获得隐球酵母(Cryptococcus magnus)、Geomyces sp和丝孢酵母(Trichosporon porosum)3个类群的真菌.结合常规分离法与RFLP法能够更有效的分析肠道微生物的多样性,获得更多更全面的微生物多样性信息.     

三磷酸腺苷发光法快速检测结核分枝杆菌药敏技术的研究

目的 建立一种利用三磷酸腺苷( ATP) 与荧光素酶反应测定结核分枝杆菌( 简称结核杆菌) 释放的ATP 来判断结核杆菌药敏的技术。方法 ATP 生物发光法( 简称ATP 法) 通过裂解液体培养基中的结核杆菌, 释放活菌中的ATP, 加入荧光素酶使之发光以检测结核杆菌的活性。共采用H37Rv 标准株和10 株临床分离菌株, 用ATP 法与BACTEC 3D 法同步平行进行利福平药敏检测, 连续7 d 检测结核杆菌释放的ATP, 观察其生长曲线, 并以此判断对药物的敏感性。结果 在生长5 ～7 d的培养基中ATP法可以检测到敏感菌释放的ATP, 并且显著高于耐药菌所释放的ATP, 通过与BACTEC 3D 法相比确定其判断药敏的临界值, 检测结果与L-J 法及同步平行的BACTEC 3D 法对照组符合率达100% 。结论 ATP法可用于结核杆菌对抗结核药物敏感性的检测, 且因其价格较低, 无放射性元素的存在, 作为一种新型的结核杆菌药敏检测技术具有巨大的临床应用潜力。     

2008年初特大冰雪灾害对粤北地区杉木人工林树木损害的类型及程度

2008年8月, 采用典型取样法, 设置20 m × 30 m (或15 m × 30 m)的方形样地13个, 对广东省天井山林场杉木(Cunninghamia lanceolata)人工林冰雪灾害进行调查。结果表明: 1)粤北地区杉木人工林受损严重, 样地内受害杉木比例高于80%, 主要集中在海拔500-900 m的地区; 2)杉木人工林受损类型主要划分为3种, 以折断类型为主(65.09%), 其次为倒伏(或翻蔸, 18.37%)和弯曲(3.20%)。其中, 根据不同程度将折断划分为5个级别: 轻微受损, 即断稍(占折断总数的12.28 %); 轻度受损, 即树冠顶端至中部断裂(38.49%); 中度受损, 即树冠中部至下部断裂, 受到较严重损伤(31.15%); 严重受损, 即树冠全部受损(15.97%); 极严重受损, 即树冠近根部断裂或折断后枯死(2.11%), 树冠受损为杉木受灾的主要特征; 3)林分密度过高(> 3 500株·hm^-2)或过低(< 1 500株·hm^-2)都易造成杉木折断, 坡向与坡位对其影响较小, 合理的密度调控至关重要; 4)杉木胸径对受损类型及程度的敏感性较高, 表现为粗壮杉木易发生断稍和较轻微的树冠受损, 细弱杉木虽不易折断, 但一经折断则受损严重。适宜的尖削度对有效预防和减轻杉木受损十分重要。     

一个新的水稻叶形突变体(tll1)的遗传分析与精细定位

利用甲基磺酸乙酯(ethylmethane sulphonate, EMS)诱变粳稻品种日本晴获得了一个遗传稳定的叶形突变体 thread-like leaf 1 (tll1)。该突变体在杭州表现为矮化、窄叶, 极端时仅剩主脉, 呈细丝状。将该突变体分别与籼稻品种南京6号、浙辐802和9311进行正反交配组, 遗传分析表明该突变体性状由1对隐性单基因控制。通过SSR和STS分子标记对F₂代分离群体进行遗传定位, 将该基因初步定位在第12染色体SSR标记RM247和RM101之间。随后利用已公布的粳稻品种日本晴和籼稻品种9311的基因组序列, 发展了7对有多态的STS标记, 最终将该基因定位在FL13和FL14之间约94.3 kb的区间内, 为进一步克隆TLL1基因奠定了基础。     

肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对离体兔黄体细胞孕酮分泌的影响及其作用机制

肿瘤坏死因子α(ＴＮＦα)是免疫内分泌网络中引入瞩目的一种细胞因子。近几年来发现ＴＮＦα存在于大鼠、牛、兔和人卵巢中。ＴＮＦα抑制大鼠和人黄体细胞ｃＡＭＰ生成和孕酮分泌。但ＴＮＦα对兔黄体细胞机能活动的影响目前尚未见报道。本实验研究了ＴＮＦα对兔黄体细胞机能活动的作用,并探索其作用机制,旨在了解ＴＮＦα在黄体萎缩中的作用。1　材料和方法(1)药品　重组肿瘤坏死因子α,人绒毛膜促性腺激素(ｈＣＧ)、人促性腺激素(ＦＳＨ)、Ｍ199培养基于粉、孕马血清促性腺激素(ＰＭＳＧ)、孕酮放射免疫测定药盒、ｃＡＭＰ放射免疫测定…     

从山东费县不同季节优势恙螨分离到恙虫病立克次体(英文)

对山东费县秋冬型恙虫病疫源地恙螨进行了调查并进行恙虫病立克次体（Ｒｔ）分离。从３５２只活鼠体外收集到１１ ７６２只恙螨,隶属２属５种,太平洋无前恙螨数量最多,占３６．７３％;其次是临淮岗纤恙螨（２４．０４％）;小盾纤恙螨（２１．６５％）;须纤恙螨（１３．５７％）和泰山纤恙螨（３．９６％）。小盾纤恙螨出现在９—１２月,高峰在１１月;须纤恙螨出现在１０月一翌年４月,高峰在１２月;临淮岗纤恙螨从５月到１１月存在,高峰在８月;太平洋无前恙螨出现在４—１２月,高峰在７月。从小盾纤恙螨、须纤恙螨、临淮岗纤恙螨及太平洋无前恙螨中共分离到１２株Ｒｔ,血清分型结果分离株以Ｇｉｌｌｉａｍ型为主,但存在Ｋａｒｐ型Ｒｔ。这些结果表明,上述４种恙螨均能自然感染Ｒｔ,有在该地区充作不同季节Ｒｔ传播媒介的可能。结合以往的研究结果,当地小盾纤恙螨集中出现于发病季节,其消长与当地人群发病基本一致,且能叮刺、经卵传递Ｒｔ,从而证实小盾纤恙螨是引起该地区秋冬型恙虫病流行的最重要的媒介。     

单条草的皂甙成分

从单条草（ＬｙｓｉｍａｃｈｉａｃａｎｄｉｄａＬｉｎｄｌ）全草中分离出３个皂甙类化合物,经波谱分析并结合化学方法鉴定为：报春花素Ａ３ＯβＤ吡喃木糖基（１→２）βＤ吡喃葡萄糖基（１→４）［βＤ吡喃葡萄糖基（１→２）］αＬ吡喃阿拉伯糖甙（１）、原报春花素Ａ３ＯβＤ吡喃木糖基（１→２）βＤ吡喃葡萄糖基（１→４）［βＤ吡喃葡萄糖基（１→２）］αＬ吡喃阿拉伯糖甙（ｌｙｓｉｋｏｉａｎｏｓｉｄｅ,２）和α菠甾醇葡萄糖甙（３）。其中１是新化合物,命名为单条草甙（ｃａｎｄｉｄｏｓｉｄｅ）。     

鹤山丘豆科混交林下几种植物的水分生态研究

测定了鹤山豆科混交林的土壤含水量、林下３种植物（本叉苦、鬼灯笼和山菅兰）叶片的蒸腾速率、气孔导度和相应的环境因子,了解林下植物的水分生理生态特征。在湿季,蒸腾速率和气孔导度的日变化曲线呈单峰型,两者的变化趋势相似。在旱季,两者之间的日变化曲线存在差异,山菅兰的蒸腾速率呈双峰型,其它两种植物呈单峰型;气孔导度的峰值都出现在早晨。鬼灯笼的蒸腾速率呈双峰型,其它两种植物呈单峰型;气孔导度的峰值都出现在早     

人类连接蛋白基因Cx26的新调控区序列

人类连接蛋白２６基因（ｃｏｎｎｅｘｉｎ２６,Ｃｘ２６）已被看作乳腺癌上皮细胞中的抑瘤基因候选者。为了阐明此基因的调控机理,本文对其转译起始点上游的一个ＤＮａｓｅ１超敏区片段１．６ｋｂ进行了序列分析和ＣＡＴ报告基因分析。结果表明此１．６ｋｂ片段具有强效启动子功能,其中含有两个ＧＴ盒（分别位于－６１５８ｂｐ和－６２１３ｂｐ）,一个非ＴＡＴＡ的ＴＴＡＡＡＡ盒位于－６２３７ｂｐ,这是在人类Ｃｘ２６基因中新发现的第二个启动区。