全文获取类型
收费全文 | 318篇 |
免费 | 47篇 |
国内免费 | 158篇 |
出版年
2024年 | 8篇 |
2023年 | 22篇 |
2022年 | 22篇 |
2021年 | 33篇 |
2020年 | 26篇 |
2019年 | 20篇 |
2018年 | 29篇 |
2017年 | 16篇 |
2016年 | 19篇 |
2015年 | 17篇 |
2014年 | 17篇 |
2013年 | 22篇 |
2012年 | 23篇 |
2011年 | 29篇 |
2010年 | 32篇 |
2009年 | 22篇 |
2008年 | 13篇 |
2007年 | 16篇 |
2006年 | 16篇 |
2005年 | 18篇 |
2004年 | 19篇 |
2003年 | 9篇 |
2002年 | 8篇 |
2001年 | 17篇 |
2000年 | 4篇 |
1999年 | 7篇 |
1998年 | 2篇 |
1997年 | 1篇 |
1996年 | 3篇 |
1995年 | 4篇 |
1994年 | 3篇 |
1993年 | 2篇 |
1992年 | 2篇 |
1991年 | 3篇 |
1990年 | 2篇 |
1989年 | 6篇 |
1988年 | 1篇 |
1986年 | 1篇 |
1985年 | 1篇 |
1984年 | 2篇 |
1983年 | 2篇 |
1982年 | 1篇 |
1981年 | 1篇 |
1980年 | 1篇 |
1979年 | 1篇 |
排序方式: 共有523条查询结果,搜索用时 15 毫秒
471.
472.
稳定表达外源性p16基因肺癌A549细胞株的建立及鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
为构建稳定表达外源性抑癌基因p16的肺癌A549细胞株,用脂质体介导的基因转染方法,借助真核质粒表达载体(pcDNA3)。将抑癌基因p16转移入此基因缺失的人肺癌细胞株A549细胞中,经G418筛选,获得稳定表达的细胞克隆,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学鉴定p16基因的表达,同时对克隆细胞分泌蛋白进行活性检测。结果显示转染p16基因的A549细胞中可以检测到p16mRNA及蛋白的表达,说明建立的p16真核表达载体能在肺肿瘤细胞中分泌表达蛋白,表达P16抑癌蛋白的A549细胞株的建立有助于研究抑癌基因p16在肺癌发生中的作用。 相似文献
473.
绿色荧光蛋白与Wee1 Hu融合基因的构建及其真核表达 总被引:4,自引:0,他引:4
构建Wee1Hu与增强型绿色荧光蛋白 (GFP)融合基因表达载体 ,并对其在真核细胞的表达及生物学效应进行研究 .应用基因工程技术构建重组载体 ,脂质体转染胰岛 β细胞株 ,流式细胞仪和免疫沉淀 Western印迹检测融合蛋白的表达 ,共聚焦显微镜分析融合蛋白在活细胞内的分布 ,3 D结构模建分析其结构特点 ,并用MTT法检测其生物学活性 .结果显示融合基因在瞬时或稳定转染的真核细胞中均获表达 ,融合蛋白主要分布在胞核区 ,融合蛋白中Wee1Hu的空间构象与天然Wee1Hu完全相同 ,表达融合蛋白的胰岛β细胞可避免其被细胞毒T淋巴细胞 (CTL)杀伤 .结果表明GFP Wee1Hu融合蛋白中 ,可发绿色荧光的分子标签GFP未能影响Wee1Hu的结构及其生物学活性 ;Wee1Hu可通过调控细胞周期而阻断CTL介导的细胞凋亡 相似文献
474.
孙筱放 《基因组蛋白质组与生物信息学报(英文版)》2001,(Z1)
探讨小鼠卵裂球移入去核的GV期卵中的体外成熟、激活与发育@孙筱放$美国罗得岛布朗大学医学院妇婴医院! 广州医学院附属市二医院 相似文献
475.
青海海北高寒草甸黄嘴朱顶雀亲鸟递食率 总被引:5,自引:2,他引:3
中国科学院海北高寒草甸生态系统定位站的黄嘴朱顶雀(Acanthis flavirostris)雌雄亲鸟的育幼行为数据收集于1999-2001年的3个繁殖季节(5-8月)。观察使用了一个闭路电视系统,包括放在鸟巢附近5-10cm处的摄像头和35-40m外的监视器。数据分析表明:亲鸟的递食率无年间变化;雌、雄鸟递食率没有差异;总递食率不随雏鸟日龄和日间不同时段改变,但雌鸟在傍晚以前的递食率低于雄鸟并在傍晚高于雄鸟。在雏鸟6日龄前,雌鸟总递食率低于雄鸟,且二者逐步逼近,然后稳定在同一水平。此种性别差异与雌鸟在递食以外所承担的,为雏鸟保温、遮阳以及清除雏鸟粪便等事务有关。这些结果与单配制鸟类亲本投资理论一致。 相似文献
476.
海北高寒草甸生态系统研究定位站没有发现C4植物——来自于稳定性碳同位素的证据 总被引:7,自引:0,他引:7
通过对海北高寒草甸生态系统研究站25个科、70个属、102种植物叶片的稳定性碳同位素的测定,以确定植物群落的光合型。结果表明,所测定的102种植物的稳定性碳同位素比值(δ^13C)介于-28.24‰和-24.84‰之间,说明这102种植物均属于C3植物,无C4植物或CAM植物。植物这种光合型的分布与该生态系统中的环境因子密切相关,是低温、强辐射等环境因素长期作用的结果,也反映了植物对这种特殊环境的适应。 相似文献
477.
根据GenBank发表的H1亚型猪流感HA基因序列设计引物,扩增出HA基因片段.将其克隆到pFastBacGP67B杆状病毒载体上,筛选阳性重组转座载体pFastBacGP67B-H1,转化含有杆状病毒穿梭载体(bacmid)的DH10Bac感受态细胞,构建杆状病毒表达载体获得重组转座子(rBacmid-H1),在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒(rBV-H1),再感染细胞,收获目的蛋白.通过血凝试验、免疫印迹法、免疫组化分析表明该蛋白得到表达,且具有良好的生物学活性.利用表达的蛋白作为猪流感间接ELISA的抗原,初步建立H1亚型猪流感的间接ELISA检测方法,并对内蒙古、辽宁和黑龙江等地送检的93份猪血清进行了检测,阳性率为31.18%,为研制开发快速、准确、简便的H1亚型猪流感鉴别诊断试剂盒奠定基础. 相似文献
478.
锯缘青蟹嗅觉器官的保护性形态特征 总被引:3,自引:0,他引:3
用光镜和扫描电镜对锯缘青蟹嗅觉器官保护性的形态学结构进行了研究。内鞭基部具一个半圆锥形凹面 ,它使内、外鞭间形成约 4 0°的基本夹角。化感刚毛与着生面呈 30°~ 5 0°角 ,其小于两鞭间 4 0°~ 90°的可变张角。这种空间关系能有效地避免内鞭折断化感刚毛的可能 ,因而内鞭在化感刚毛前方形成了天然保护屏障。化感刚毛良好的柔韧性、基部的念珠状结构以及中部分节等特征可能在避免自身折断或变形方面具有作用。另外 ,外鞭顶段迎水面的杆状刚毛和刺状刚毛、内鞭迎水面上以及底节远侧端的刺状刚毛所处的位置 ,均是化感刚毛的重要门户 ,因此推测这些触觉性的刚毛可能有利于化感刚毛避开来自上、下及前方的絮状污物 相似文献
479.
人白细胞介素12(hIL\|12)是细胞介导免疫发生的关键调节因子,也是目前发现的唯一的异源二聚体细胞因子,由P35和P40两个亚基经二硫键连接而成。利用DNA重组技术,分别构建了含hIL\|12 p35基因和p40基因的重组转移载体质粒pAcAB3\|p35和pAcAB3\|p40。将两个重组转移载体分别与致死缺陷型线性化苜蓿丫纹液蛾核型多角体病毒(AcNPV BaculoGold Linearized Baculovirus)基因DNA共转染昆虫细胞,构建出遗传稳定的重组病毒AcNPV\|OCC\|hIL\|12(p35)与AcNPV\|OCC-\|hIL\|12(p40)。将两种病毒分别感染Sf9细胞,取细胞培养物上清和细胞裂解物上清进行SDSPAGE和Western blot检测,结果显示hIL\|12 p35和p40两基因均在昆虫细胞中获得表达,且能分泌至胞外。表达产物具有免疫原性。 相似文献
480.
基于MaxEnt模型的三江源区草地濒危保护植物热点区识别 总被引:1,自引:0,他引:1
三江源地处全球生物多样性热点之一的青藏高原腹地, 是高寒草地生物多样性的集中分布区。但过去几十年中, 人为干扰和气候变化等因素导致高寒草地严重退化, 草地生物多样性受到极大威胁。本研究利用最大熵(MaxEnt)模型模拟了三江源区40种濒危保护植物当前及未来气候变化情景下的热点分布区。根据最大熵模型估计结果统计, 目前三江源濒危保护植物的热点区面积89,438 km2, 主要分布于三江源东部和南部, 其中濒危物种大于30种的最热点地区面积485 km2, 主要分布于囊谦县、玉树市、班玛县、久治县和河南县。未来在增温增湿的气候变化情景下, 最大熵模型模拟的三江源区草地濒危保护植物的热点区将向西北部扩大, 有利于植物多样性的维持和提升。然而, 模型模拟还发现, 在囊谦县、玉树市、班玛县、久治县和河南县等县市, 均有濒危保护植物大于25种以上的热点区域未被重点保护区覆盖, 总面积为4,423 km2。这一区域被划分为可开展畜牧生产活动的一般保护区, 受到人为干扰的可能性较大, 应予以更多关注与保护。 相似文献