UV-B辐射对南方红豆杉生活史型和紫杉烷类含量的影响

运用植物生活史型的理论与方法,研究了UV-B辐射增强对南方红豆杉Taxus chinensis var. mairei表型性状和紫杉烷类次生代谢产物的影响。结果表明,随UV-B辐射强度增加,南方红豆杉无性生殖表型性状(C)明显增强(z值由0.18增加到0.52),营养生长表型性状(V)相应降低(x值由0.82降低至0.48);3.25 μW · cm^-2 · nm^-1UV-B辐射处理较对照组和9.76 μW · cm^-2 · nm^-1 UV-B辐射处理组生物量增量更高;增补UV-B辐射处理显著促进了南方红豆杉叶片中紫杉醇(Taxol)的积累,但对10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-deacetylbaccatin Ⅲ,10-DAB)、7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇(7-xylosyl-10-deacetyltaxol,7-xyl-10-DAT)有一定的抑制效应,其中3.25 μW · cm^-2 · nm^-1UV-B辐射处理对紫杉醇诱导效果最为明显。结果表明,在南方红豆杉田间栽培中应注意上层树种搭配、修剪,从而形成适当的UV-B辐射胁迫以诱导紫杉醇含量及生物量增量,达到高产、优质的生态培植目标。     

动物实验中的兽医作用

实验动物是现代医学研究中的重要基础和条件,随着我国实验动物科学的迅速发展和实验动物和动物实验质和量的不断提高,对实验动物兽医的需求越来越大,对实验动物兽医的要求和期望也越来越高,本文简要阐述了兽医在动物实验中的作用.文章就实验动物兽医应该具备的资质、实验动物兽医的基本职责以及实验动物健康与兽医管理等方面进行了讨论,明确了实验动物兽医的各项基本职责及任务.兽医在实验动物的管理以及动物实验的过程中有着非常重要的作用,在动物实验中应充分发挥兽医的作用.     

贝莱斯芽孢杆菌抗真菌能力及基因组分析北大核心CSCD

蛋白水解酶及脂肽类化合物具有广谱的抑菌活性,这些抑菌活性蛋白及物质拥有巨大的研究和开发潜力。本研究通过蛋白水解酶平板筛选到一株对6种不同病原真菌有较明显抑菌效果的菌株,命名为X49,对该菌株进行理化分析,并由16S rRNA基因测序、API测试和电镜分析鉴定菌种,进一步分析其基因组序列,再利用偶氮酪蛋白方法分析蛋白水解酶活性及提取脂肽类化合物进行抗真菌测试。结果表明,该菌株在10–50℃、pH 4.0–9.0范围内均可以生长,对环境盐浓度的适应性较强,在10%NaCl浓度下仍然能够生长。菌种鉴定发现X49菌株属于贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。基因组分析则显示,B. velezensis X49菌株有11个编码的丝氨酸蛋白酶,其基因编号1_894属于S8枯草杆菌蛋白酶家族,与已知具有抗真菌能力的丝氨酸蛋白酶有高达99%的相似度。另外有多达30个编码的非核糖体肽合成酶,其中包含参与合成已知的表面活性素、伊枯草菌素、丰原素、杆菌肽及短杆菌肽脂肽类化合物。胞外蛋白水解酶活性分析发现其在高温下仍具有一定的活性。将B. velezensis X49菌株与中药干姜共发酵后,提取出的脂肽类化合物,其抑菌功效大大提高。由此可见,本研究筛选出的B. velezensis X49菌株对于植物及人类病原菌都有很显著的抑制作用。而与中药共发酵的活性物质可作为未来药物的研究开发。     

褐飞虱两个糖转运蛋白的功能分析及调控海藻糖代谢的影响

海藻糖转运蛋白（Trehalose transporter,Tret）可将昆虫“血糖”——海藻糖由脂肪体转运到血淋巴中,是维持昆虫体内海藻糖平衡的重要转运蛋白。本研究通过对褐飞虱Nilaparvata lugens两条糖转运蛋白序列（NlTret1、NlTret1 X1）进行生物信息学分析,并利用RNAi技术沉默NlTret1与NlTret1 X1基因,探讨其对褐飞虱调控海藻糖代谢的生物学功能。生物信息学分析表明,NlTret1与NlTret1 X1分别有1 353 bp和1 488 bp的开放阅读框,编码具有450和495个氨基酸残基,蛋白分子量大小为49.984 kDa和53.059 kDa,理论等电点pI为6.53和7.46;保守结构域分析NlTret1和NlTret1 X1分别包含10个和12个跨膜结构域,属于MFS超家族;二级结构以及三级结构预测NlTret1和NlTret1 X1主要包含无规卷曲和α螺旋结构。进化树分析显示NlTret1和NlTret1 X1皆与同为半翅目昆虫的Tret1蛋白亲缘关系接近。与注射dsGFP相比RNAi后显著抑制了靶标基因的表达量。荧光定量检测海藻糖代谢通路TRE和TPS基因,结果显示注射dsNlTret1 48 h后NlTRE1-1、NlTPS2基因表达量极显著下调,NlTRE1-2、NlTRE2与NlTPS1、NlTPS3基因表达量极显著上调;而注射dsNlTret1 X1则为NlTRE1-1、NlTRE2与NlTPS1、NlTPS2基因表达量极显著降低,NlTRE1-2和NlTPS3基因表达量极显著增高。注射dsNlTret1与dsNlTret1 X1后海藻糖酶活性均显著性降低,同时NlTret1的沉默显著抑制了糖原含量和海藻糖含量,NlTret1 X1的沉默仅使葡萄糖含量显著增高。褐飞虱两条糖转运蛋白序列经初步分析确定为海藻糖转运蛋白,这两个海藻糖转运蛋白在转运糖类物质中发挥着不同的作用,其中NlTret1 X1可能参与葡萄糖运输功能,而NlTret1则更可能参与海藻糖特异性转运。研究结果有利于探究海藻糖转运蛋白Tret调控海藻糖代谢的作用机制,为将来通过其调控昆虫海藻糖代谢平衡治理褐飞虱等害虫提供理论依据。     

牧草盲蝽实时定量PCR内参基因的筛选

【目的】筛选出适合牧草盲蝽Lygus pratensis在不同条件下稳定表达的内参基因。【方法】选取编码牧草盲蝽α-微管蛋白、β-微管蛋白、肌动蛋白、延伸因子、琥珀酸脱氢酶复合体A、泛素、转录起始因子TFIID亚基、谷胱甘肽S-转移酶、核糖体蛋白L32及TATA盒结合蛋白的10条基因为候选内参基因,采用qRT-PCR技术测定其在牧草盲蝽不同性别成虫、成虫不同组织、不同龄期、对功夫菊酯不同抗性成虫、不同温度及不同杀虫剂分别处理后的成虫共6类样品中的表达量;采用BestKeeper, geNorm, NormFinder及RefFinder 4种计算程序对各候选基因的表达稳定性进行评价。【结果】依据获得的有效qRT-PCR数据前提,利用不同计算方法综合分析得出：在牧草盲蝽成虫不同组织中和对功夫菊酯不同抗性成虫中最稳定表达的内参基因均为RPL32;不同温度处理、不同性别成虫中、不同杀虫剂处理和不同龄期牧草盲蝽中最稳定表达的内参基因分别为UBQ, SDHA, β-tubulin和TAF。通过geNorm软件判断配对变异数确定的内参基因最佳数目,结合RefFinder对基因表达稳定性综合排序的结果可得：牧草盲蝽不同成虫组织中、不同性别成虫中、不同龄期、对功夫菊酯不同抗性成虫中、不同温度及杀虫剂分别处理的成虫等各组的最优内参基因组合分别为RPL32+TAF, SDHA+GST, TAF+GST+UBQ, RPL32+GST, UBQ+ACT+β-tubulin和β-tubulin+TAF+RPL32。【结论】本研究获得的牧草盲蝽在不同条件下表达最稳定及最适内参基因组合,都可用于后续的基因定量表达研究。     

五种裂腹鱼亚科鱼类外胚层发育不良因子A受体基因Edar的克隆和序列分析

裂腹鱼亚科鱼类具有丰富的体表附属器官变异,而Edar是控制这类结构发育的关键基因。以5种裂腹鱼的代表物种为材料克隆其Edar基因的编码区片段,序列分析表明:该基因编码的蛋白在裂腹鱼中存在长度不同的组氨酸重复序列,串联组氨酸插入可能与蛋白定位有关;基因树支持裂腹鱼与金线鲃具有最近的亲缘关系;分子进化分析未检测到正选择信号,裂腹鱼Edar基因的低复杂区可能是受选择区域。以上结果说明裂腹鱼Edar基因的结构变异可能与裂腹鱼表型变异和演化有关。     

第一滴和第二滴末梢血血糖值差异性的多中心临床研究

目的:本研究旨在探讨在洗手消毒和不洗手消毒两种情况下,第一滴与第二滴末梢血血糖值之间的差异,以及第一滴末梢血血糖值与对照血糖值之间的差异,及此差异对临床治疗决策的影响。方法:研究于2014年5月20日至5月29日在全国四个城市的四家糖尿病专科医院中同步进行,共纳入住院糖尿病患者240例,分别测定洗手消毒以及不洗手不消毒情况下第一滴和第二滴末梢血的血糖值,使用Wilcoxon符号秩和检验方法比较第一滴与第二滴末梢血血糖值及第一滴末梢血与对照血糖值,利用误差栅格分析(Error Grid Analyze,EGA)图分析第一滴与第二滴末梢血血糖值及第一滴末梢血与对照血糖值的一致性。结果:分别获得洗手消毒和不洗手消毒情况下的血糖监测结果 1183对和715对。无论是否洗手消毒,第一滴与第二滴末梢血的血糖值以及第一滴末梢血与对照血糖值之间的差异均具有统计学意义(P值均为0.000)。在洗手消毒和不洗手消毒情况下,第一滴与第二滴末梢血血糖值偏差小于20%的百分比分别为98.6%和97.8%,落于EGA图的A区;第一滴末梢血与对照组血糖值的偏差小于10%的百分比分别为98.2%和97.6%,在EGA图中,落于A区的百分比分别为99.8%和99.6%。结论:在糖尿病的自我管理和临床实践中,无论是否洗手消毒,使用第一滴末梢血进行血糖监测已经足够准确可靠,且更为方便快捷。     

腰腹肌运动联合超声波对非特异性下腰痛的治疗效果及机制

为了解腰腹肌运动联合超声波治疗的效果,本研究对腰腹肌运动联合超声波治疗非特异性下腰痛进行了探讨。研究显示,治疗4周后,腰腹肌运动+超声波治疗组的疼痛评分(0.73)显著低于超声波治疗组(1.22)(p<0.05)。腰腹肌运动+超声波治疗组的立位体前屈活动幅度(2.35 cm)显著低于超声波治疗组(6.23 cm)(p<0.05)。腰腹肌运动+超声波治疗组的屈伸肌总功和屈伸肌峰值力矩比显著高于超声波治疗组(p<0.05)。腰腹肌运动+超声波治疗组的Oswestry功能障碍指数问卷表(ODI)评分显著低于超声波治疗组(p<0.05)。治疗4周后,腰腹肌运动+超声波治疗组的血清超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平显著高于超声波治疗组,而丙二醛(MDA)水平显著低于超声波治疗组(p<0.05)。为了进一步考察运动联合超声波疗法对下腰痛的治疗机制,本研究建立了完全弗氏佐剂诱导的腰椎间盘退变大鼠模型。采用阿利新蓝染色检测大鼠椎间盘纤维环区和髓核区蛋白多糖的水平,并采用免疫组化染色检测蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的表达,发现运动联合超声波治疗可明显提高大鼠蛋白多糖、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖水平。本研究表明,与超声波治疗相比,腰腹肌运动联合超声波治疗可更大程度地降低非特异性下腰痛患者的疼痛,提高肌肉功能和腰椎功能,增强血清抗氧化能力,并减少氧化应激损伤。此外,该联合疗法可明显提高腰椎间盘退变大鼠椎间盘中的蛋白多糖、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖水平。     

淫羊藿苷对RSV感染诱发哮喘小鼠体内PGD2水平的影响

摘要 目的：观察淫羊藿苷对RSV感染诱发哮喘小鼠血清及支气管肺泡灌洗液中前列腺素D2（Prostaglandin D2,PGD2）表达水平的影响,以期为哮喘治疗寻找新的靶点。方法：30只Balb/c小鼠随机均分为三组：即正常组,OVA/RSV-YYH组（即淫羊藿苷治疗组）及OVA/RSV-非YYH组（即未经淫羊藿苷治疗组）。卵蛋白致敏RSV感染诱发小鼠哮喘模型成功建立后,予以淫羊藿苷2.5 mg连续腹腔注射治疗2周,比较治疗前后肺功能检测结果、支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中细胞分类计数、血清及BALF中PGD2表达水平、肺组织病理学变化。结果：淫羊藿苷治疗后,哮喘小鼠肺功能较治疗前明显改善,差异有统计学意义（P<0.05）;PGD2水平较前明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）;各分类白细胞计数较前明显减少,差异有统计学意义（P<0.01）,气道管壁增厚及管腔狭窄现象较前明显改善,肺组织炎症细胞浸润较前减少。结论：淫羊藿苷可有效降低RSV感染诱发哮喘小鼠体内炎性介质PGD2水平,从而改善气道重塑,减轻小鼠的哮喘症状,它可能是以后哮喘治疗的一个新的靶点。     

沙葱萤叶甲核糖体蛋白基因GdRpS3a的克隆、分子特性及表达分析

核糖体蛋白(ribosomal protein,Rp)是一类参与蛋白质合成、细胞代谢、机体免疫及信号传导等重要功能的蛋白质.本研究旨在克隆沙葱萤叶甲Galeruca daurica核糖体蛋白S3a基因cDNA全长序列,分析其分子特性和表达模式,以期为进一步研究其在沙葱萤叶甲生长发育及滞育中的作用提供必要的基础.根据现有的沙葱萤叶甲转录组测序数据,应用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆获得了沙葱萤叶甲RpS3a基因的全长cDNA序列,命名为GdRpS3a(GenBank登录号:MN660144).该基因全长为800 bp,开放阅读框全长为687 bp,编码228个氨基酸,具有核糖体蛋白S3a家族的保守功能域;预测分子量为25.63 kDa,等电点pI为10.53,无信号肽和跨膜结构.同源序列比对和系统发育分析表明,GdRpS3a与玉米根萤叶甲Diabrotica virgifera virgifera RpS3a的亲缘关系最近,其氨基酸序列一致性最高为54.10％.采用qPCR技术检测该基因在沙葱萤叶甲不同发育阶段(卵、1～3龄幼虫、预蛹、蛹及成虫羽化3、7、10、15、25、40、60、80和100 d)和3日龄成虫在不同温度(0、5、10、15、20、25、30、35和40℃)处理1h后的表达谱.结果 表明:GdRpS3a在不同发育阶段的沙葱萤叶甲体内均有表达,在成虫滞育结束后表达量最高,在卵期和成虫滞育期间低表达.温度对GdRpS3a的表达有显著的影响,30℃下最高,0℃下最低.GdRps3a的表达与沙葱萤叶甲生长发育阶段及环境温度有关,可能在沙葱萤叶甲成虫夏滞育中起着重要作用.